Полимеразалық тізбекті реакция және Саузерн-блотинг: принциптері мен қолданылуы

“Онтүстік Қазақстан медицина академиясы” АҚ Биология және биохимия кафедрасы Презентация Тақырыбы:Полимеразды тізбекті реакция (ПТР) . Саузерн бойынша блотгибридизациялау. Орындаған: Тобы: ПҚ 02-19 Қабылдаған: Алманова Н. С. Шымкент 2019

Жоспар

I. Кіріспе Полимеразалық тізбекті реакция (ПТР) II. Негізгі бөлім ПТР түрлері мен артықшылықтары

Саузерн блоттинг әдісі III. Қорытынды Пайдаланған әдебиеттер

Полимеразалық тізбекті реакция (ПТР) - биологиялық материалдағы анықталатын нуклеин қышқылдарындағы (ДНҚ) аз концентрациялы фрагменттердің айтарлықтай ұлғайтылуын қамтамасыз ететін молекулярлық биологиядағы эксперименталды әдіс. Полимеразалық тізбекті реакцияны ең алғаш 1983 жылы американдық ғалым Кэри Мюллис ашқан және ол осы жаңалығы үшін Нобель сыйлығына ие болған. Себебі ПТР мүмкін еместі мүмкін етті.

ПТР түрлері

Классикалық ПТР

Реал-тайм ПТР

ПТР артықшылықтары 1) Жұкпалы ауруларды қоздырушылардың диагностнкасында ПТР өте сезімтал және арнайылыгы жоғары әдіс болады. 2) Диагностиканы жургізуде әр түрлі клиникалык материалды қолдануга болады . 3) Бірмезгілде бір биологиялық сынамада бірнеше микроорганизмді анықтауға мүмкіндік береді. 4) Зертханага материалды жеткізгендеауру қоздыргышты тірідей алып келу міндетті емес. 5) Анализ өте жылдам жасалады. 6) Кейбір микроорганнзмдерді тек ГІТР-мен аныктайды. 7) Кейбір жұкпалы аурулар симптомсыз, яғни ауруга тән белгілер бермей өтеді. Сондыктан ПТР қолданғанда ауру қоздыргыштардың барын табуға мүмкіндік береді. Мысалы, гонорея, хламидоз т. б.

Қолданылуы: ПТР диагностика жұқпалы аурулар қоздырғышын басқа әдістермен (иммунологиялық, бактериологиялық, микроскопиялық) аныктау мүмкін болмаған жағдайда қолданылады. Қазіргі таңда ПТР-ны: археология, медициналық практикада әр түрлі тұкымқуалау, жұқпалы ауруларда, сот медициналық сараптамасында, генетикада әкесін анықтауда қолданылады.

Блоттинг деген не?

Блоттинг - электрофорез жүрген гендегі ДНҚ, РНҚ молекулаларын немесе белокты фильтрге ауыстыру. Егер әдіс ДНҚ-ға байланысты болса, онда оны саузерн-блоттинг, ал РНҚ-га тиісті болса нозерн- блоттинг, белокқа қатысты болса - вестерн - блоттинг деп атайды.

Саузерн блоттинг әдісі

Саузерн блоттинг - ДНҚ-ның белгілі бір реттілігін анықтау үшін молекулалық биологияда қолданылатын әдіс. Бұл әдісті 1975 жылы Эдвин Саузерн ұсынған.

Нәтижесі

Мембранада бекітілген ДНҚ спецификалық аймағымен үлгіні гибридизациялау, үлгіде нуклеотид реттілігінің бар екенін көрсетеді.

Кемшіліктері

Рестрикция сайтын қамтымайтын нүктелі мутацияларды анықтауға мүмкіндік бермейді. Көп жұмысты қажет ететін, қиын және қымбат әдіс.

Саузерн блоттинг әдісі

Қолданылуы Саузерн блот- керекті спецификалық фрагменттерді анықтау үшін, қайта құрылымдарды талдау, бір тізбекті ДНҚ молекуласының полиморфизмін талдау және қос тізбекті ДНҚ электрофорезін анықтау үшін қолданылады.

Қорытынды Бүгінгі күні технология ДНҚ-диагностикалық әдістерді қолданумен көптеген ауруларды анықтауға мүмкіндік береді. Бұған мүмкіндік беретін бірнеше эдіс бар. Міне осылардың қатарына ПТР-ді жатқызуға болады. Бұл әдіс жыл сайын адамзат ағзасындағы аурудың өте жылдам кезеңдерде болуын анықтауға немесе аурудың алдын- алу мүмкіндігін болжауға мүмкіндік бере түседі.

Пайдаланған әдебиеттер тізімі 1. Әбилаев С. А. Молекулалық биология және генетика. Шымкент 2008 2. Мұхамбетжанов К. Қ. Генетика. Алматы 2005 3. Қуандықов Е. Ө., Аманжолова Л. Е. «Молекулалық биология негіздері», Алматы, 2008 ж 4. П. Қазымбет, Л. Аманжолова, Қ. Нұртаева. «Медициналық биология», Алматы, 2008 ж

Ұқсас жұмыстар

Полимеразалық тізбекті реакция (ПТР) және Саузерн-блот гибридизациясы: әдістемесі мен қолданылуы

Иммуноферменттік анализ (ELISA) және полимеразалық тізбекті реакция (ПТР): теориясы мен практикалық қолданылуы

Вестерн-блотинг: принциптері, протоколы және артықшылықтары мен шектеулері

Уран ядросының бөлінуі және тізбекті ядролық реакция: нейтрондық динамика мен баяулатқыштардың рөлі

Тізбекті полимеризация: механизмдері, түрлері және артықшылықтары мен кемшіліктері

Электромагниттер: принциптері, түрлері, тарихи дамуы мен қолданылуы

Ядролық реакциялар мен химиялық элементтердің өзгеруі: бөліну, нейтрондар және тізбекті реакциялар

Ядролық бөліну энергиясы: негізгі ұғымдар, механизмі және тізбекті реакциялар

Химиялық кинетика: реакция жылдамдығы, молекулалық ерекшеліктері және температура мен катализдің әсері

Тәрбие принциптері мен заңдылықтары: теориясы және мектептегі қолданылуы

Пәндер