ДНҚ молекуласын бөліп

Презентация қосу

GREAT
ДНҚ молекуласын

Massive X presentation to DesignBall team
зерттеудің маңызы
және ерекшеліктері
Massive X

Биологиялық материалдан
ДНҚ молекуласын бөліп

LIVE
алу

Молекуц
Орындаған: Махашбай Асылзат , Жеңісбекқызы Жібек,
Төлегенова Тамила Бт18-42к
C Қабылдаған: Тілеулес Ж.Б.

b
c
Massive X presentation to DesignBall team
І. Кіріспе
ІІ. Негізгі бөлім
2.1. ДНҚ молеуласын

Жоспар
Massive X

бөліп алу процесі
2.2. Шаштан ДНҚ
молекуласын алу
2.3. Сүйек
қалдықтарынан ДНҚ
молекуласын бөліп алу 2
2.4. Тістен ДНҚ бөліп
алу
ІІІ. Қорытынды
C
IV. Пайдаланылған әдебиеттер
b
c
ДНҚ-теріс заряды бар ұзын молекула: ол жеке

GREAT
ақуыздарды, жасушаларды, тіндерді және бүкіл
ағзаларды жинау туралы нұсқауларды кодтайды.
ДНҚ сирек жағдайларды қоспағанда, барлық
жасушаларда болады: мысалы, жетілген

Massive X presentation to DesignBall team
сүтқоректілердің эритроциттері оттегін жақсы
тасымалдау үшін генетикалық материалмен ядро
жоғалтады.
Massive X

ДНҚ молекуласын не үшін
бөліп алады?
Себебі, Биоматериалды өңдеу және ДНҚ оқшаулау — молекулалық-

LIVE
биологиялық зерттеудің бірінші кезеңі. Генетикалық материал
жасушалардың ядроларында сақталады, оларды жою керек, әйтпесе ДНҚ
ерітіндіге енбейді және талдау мүмкін болмайды.
БИОМАТЕРИАЛ

бИОМАТЕРИАЛ
Шаш, қан, сүйек, тіс, сүйек
ТҮРЛЕРІ т.б.

C
ДНҚ сапасының дәрежесі биологиялық үлгінің сапасына ,
b оқшаулау әдісіне де байланысты. Қазіргі уақытта ДНҚ
c оқшаулаудың көптеген әдістері жасалды.
Лабораторияда
ДНҚ бөліп алу процесі

Massive X presentation to DesignBall team
• Липидтер және қант ерітіндіге түсуі үшін жасушалар мен
жасуша ядроларының мембраналарын бұзу керек. Ол үшін SDS
детергентімен (сілекей үшін) немесе гуанидин тиоцианатымен
Massive X

(қан үшін) лизис буферін қолданады. Детергент мембраналарды
бұзады, ал ерітіндінің буферлік компоненті рН-ны ДНҚ үшін
оңтайлы деңгейде ұстайды.

//Ақуыздардан тазарту.
Ерітіндіге енгізілген ДНҚ онымен байланысты
ақуыздардан босатылуы керек. Лизис буферінің тағы
бір компоненті жасуша ақуыздарының бұзылуына
жауап береді , ол протеин К, фермент ақуызына
байланысты. К әріпі кератиндерді ыдыратуға 4
негізделген

ДНҚ-ны қоспалардан тазарту. ДНҚ-мен байланысатын және
жасушаның қалған органикалық компоненттерінің өтуіне Сақтау буферінде ДНҚ-ны ерітіңіз. Мембранамен
байланысқан ДНҚ элюция үшін буфермен жуылады
C
мүмкіндік беретін кремний мембранасы бар пробиркаларда

c
(элюция адсорбцияланған затты ерітіндіге шығару процесі
центрифугалаймыз. Центрифугалау мембрана арқылы сүзу
b деп аталады). Буферде ерітілген ДНҚ бірнеше жыл бойы -
жылдамдығын бірнеше есе арттырады. Изопропанол немесе 20°C температурада сақталуы мүмкін
c спиртімен ДНҚ мембранасы бірнеше рет шайылады
этанол
Қанша көлемде жиналу керек? Шаштан ДНҚ
бөліп алу Шашты микроскоптайды, жуады, шаш тамырын 2-3
мм өзектен кесіп, "Эппендорф"пробиркасына
салады.

• Шаштың тамырында гендерлік және жеке сәйкестендіруді Пробиркаға Chelex ион тәрізді шайыры жүзгінінің

Massive X presentation to DesignBall team
тексеру үшін қажет ядролық ДНҚ бар. 20% 100 мкл қосылады.
• Шаштың керемет үлгілері иықтың артқы жағында шаштың
Термостатта 12 сағат (түн) бойы 56 °С
қалың және тамырлары үлкен жерлерде кездеседі.
температурада ұстайды.
Massive X

• Толық жеке профиль алу үшін жеткілікті ДНҚ-ны қамтамасыз Жоғары жылдамдықта вортексте 5-10 с шайқайды.
ету үшін тамырлары бар 15-20 шашты жинау керек.
• Шаш үлгілері құрғақ күйде сақталып, бөлме Содан кейін түтік шашты қайнаған суға 8 мин.
шашты толығымен ерітіндіге батыру керек.
температурасында конверттерге жіберілуі керек. Құрғағыш
дорбаны конвертпен бірге дәлелдемелер пакетіне немесе Ziploc- Жоғары жылдамдықпен 5-10 с үшін шайқау үшін
қа салу керек. қайтадан вортекске салынады.
• Кептіретін дорба ылғалдың ДНҚ-ның бұзылуына жол
Шаш гидролизатын центрифугалайды 2-3 мин 10
бермейді.
000 - 15 000 айн / мин. Супернатант ПТР
реакциясын қою үшін қолданылады. Реакцияға ПТР 5
реакция қоспасының жалпы көлемі 25 мкл болған
кезде үлгінің 15 мкл аспайды.
Стерильді дистилденген суда дайындалған Chelex ион
алмастырғыш шайырының 20% суспензиясын қолдану
керек.
C Әдістің принципі-әр түрлі қоспаларды, соның ішінде
ақуыз қоспаларын сіңіретін Chelex ион алмастырғыш
b
шайырымен қайнатылған кезде шашты гидролиздеу,
c
"еріту".
Тырнақ пластинкаларынан ДНҚ молекуласын бөліп алу

“ Ақуыз кератинмен толтырылған мүйізді қабығынан тұрады.

Massive X presentation to DesignBall team
Тырнақ пластиналары мен олардың бөліктері жеткілікті
Massive X

генетикалық материалдан тұрады және жұмсақ
ұлпаларға қарағанда ыдырауға төзімді
. Осыны ескере отырып, тырнақ пластиналары
белгісіз адамдарды анықтау кезінде сот-
медициналық сараптама объектісі ретінде
қолданылады, ал тырнақ фрагменттері заттай
дәлелдерге сот-медициналық сараптама жүргізу
кезінде болжамды қылмыскердің биологиялық ізі
ретінде зерттелуі мүмкін
Бастапқыда ДНҚ-ны тырнақтардан оқшаулау үшін 6

фенолхлороформды экстракция әдісі қолданылды, содан кейін ДНҚ
препаратын тазарту және шоғырландыру.

Бұл улы реактивтерді қолданумен байланысты және ДНҚ-ның үлкен
C шығындарымен бірге жүретін көп сатылы, көп уақытты қажет
b ететін және ұзақ процесс. Қазіргі уақытта ДНҚ-ны оқшаулаудың
тиімді және ыңғайлы әдістері жасалды, бұл көп жағдайда фенол
c
әдісінен бас тартуға мүмкіндік береді.
Сүйек қалдықтарынан
ДНҚ молекуласын бөліп
алу

Massive X presentation to DesignBall team
Lorem ipsum dolor sit amet
Massive X

Процедура сүйек қалдықтарынан ДНҚ ДНҚ экстракциясының тиімділігін Фенол/хлороформ ақуыздарының
алу кезеңдерін қамтиды және оны арттыру үшін жасушалық лизатқа фрагменттерінен тазарту 7
тіндер мен сүйек кемігінсіз құрғақ қосымша реагенттер – Тио - қалпына жүргізіледі, ДНҚ ерітіндісін
сүйектер үшін қолдануға болады. ДНҚ келтіргіштер, мысалы, дитиотрейтол концентрациялау Centricon100
экстракциясына натрий немесе 2-меркаптоэтанол енгізіледі , концентраторының көмегімен
додецилсульфаты мен К олар дисульфидті ақуыз қосылыстарын жүзеге асырылады
протеиназасының қатысуымен жасуша бұзады, осылайша молекулааралық
C ядросының лизисі кіреді. жасуша ансамбльдерін ыдыратады
b
c
ДНҚ молекуласын зерттеу қолданылатын негізгі
салалар

Massive X presentation to DesignBall team
Massive X

#01
• Ауруларды #02 #03
диагностикалау
және емдеу • Әкелік және • Сот- #04
құқықтық ықпал медициналық • Ауыл.
сараптама және шаруашылығы 8
ДНҚ және ДНҚ

C
b
c
ДНҚ молекуласының сапалық дәрежесі

Зерттеулерде ДНҚ үлгісін
қолданар алдында оның
сапалы екеніне көз жеткізу

Massive X presentation to DesignBall team
керек. ДНҚ сапасының негізгі
көрсеткіштері-қос ішекті,
Massive X

тұтастық, үлгінің тазалығы,
ингибиторлардың болуы.

Ингибиторлар. ПТР өтуіне кедергі келтіретін ингибиторлардың бар-
жоғын тексеру және үлгіні ПТР-да қолдануға жарамды екеніне көз
жеткізу үшін SPUD qPCR талдауын орындау арқылы мүмкін болады
Қостізбектілік. Үлгінің Қос тізбегін спектрофлуориметрия арқылы
тексеруге болады. Егер үлгінің >70% екі ішекті болса," екі ішекті "
бүкіл үлгіні қарастыруға болады

Тұтастық. ДНҚ тұтастығын анықтау үшін гель электрофорезі және ПТР
C анализі қолданылады. Гель электрофорезімен ДНҚ-ның
b молекулалық массасы анықталады; егер барлық жолақтар >30 кб
болса, бұл ДНҚ үлгісі деградацияға ұшырамағанын білдіреді
c
Сбор и хранение ДНК-содержащего
биоматериала

Massive X presentation to DesignBall team
и выделенной ДНК
Долудин Ю.В., Лимонова А.С., Козлова В.А.,
Ефимова И.А., Борисова А.Л.,

Пайдаланылған әдебиеттер
Мешков А.Н., Покровская М.С.,
Massive X

Драпкина О.М.
ФГБУ “Национальный медицинский
исследовательский центр терапии и
профилактической медицины”
Минздрава России. Москва, Россия

https://blog.genotek.ru/dna-isolation-practice
https://chem21.info/article/718954/

C
b
c

Ұқсас жұмыстар

ДНҚ зерттеу әдістері. ДНҚ диагностикасының тура және көлденең әдістері. ДНҚ – фингерпритинг

Рекомбинантты ДНҚ молекуласын құрастыру технологиясы

Гендік инжинерия

Гендік инженерияға анықтама

Гендік инженерия және жұмысының кезеңдері

Гендік инженерия технологиялары

Рекомбинантты ДНҚ құрылысы. Рекомбинантты ДНҚ технологиясы (РДТ)

Зерттеудің молекулалық - генетикалық әдістері

ДНҚ тізбегінің реттілігін анықтаудағы классикалық әдістер

Өсімдіктердің гендік инженериясының негіздері

Пәндер