Құю парафин

Презентация қосу

Тақырыбы:Микротехникамен танысу. Дайын
гистологиялық препараттармен жұмыс
жасауды жүргізу.
Гистологиялық зерттеу әдістері қолданылады
зерделеу үшін құрылыстар мен функциялары
жасушалар мен ұлпалардың қалыпты,
патологиялық және экспериментке. Негізі
гистологиялық зерттеу әдісі болып табылады
гистологиялық техника кешені әдістемелік
тәсілдерді дайындау кезінде пайдаланылатын
препараттар жасушалар мен ұлпалардың,
олардың микроскопиялық зерттеу.
Микроскопиялық зерттеу, клетка және
ұлпалардың жүргізілуі мүмкін екі негізгі
жолдармен жағдайына байланысты зерттелетін
объектісі: зерттеу, тірі жасушалар мен тіндерді
зерттеу неживых жасушалар мен ұлпалардың
құрылымын сақтайтын арқасында арнайы
тәсілдеріне тіркеу.
Гистологиялық препараттар — микроскопиялық зерттеулерде пайдаланылады.
Гистологиялық препараттарды дайындау процесі төмендегідей кезендерден тұрады:
1) зерттеуге керекті гистологиялық материалды тиісті мүшелерде жануарлар организмі
мүшелері мен ұлпаларынан кесіп алып бекіту (формалин, алмас және т.б. ерітінділерде),
2) бекітілген гистологиялық материалды тығыздап қатайту (спирттер ерітінділері қатарынан
— 60 , 70 , 80 , 96 , 100 өткізіп сусыздандырып, парафин немесе целлоидиннің эфирдегі
ерітіндісіне салып қатайту),
3) қатайған кесекшелерден микротом арқылы жұқа жонындыларды дайындау,
4) жарық микроскопымен зерттеуге дайындалған жонындыларды бояу (гистологиялық
бояғыштар қолданылады), 5) боялған жонындыларды төсеніш және жапқыш шынылар
арасына канада бальзамына салып қатыру.
1. Техника гистологиялық препараттарды дайындау
үшін микроскопты
Негізгі кезеңдері дайындау гистологиялық препараттар:
1. Материал алу;
. Бақылау;
. Жуу суда;
. Сусыздандыру және тығыздау;
. Құю;
. Қималарды дайындау;
. Бояу;
. Қорытынды мұғалім.
Қысқаша сипаттамасы кезеңнен тұрады:
. Материал алу
Гистологиялық зерттеуге арналған берут тілімдерін, ағзалар
мен тіндердің көлемі 1 см3. Материал мүмкіндігінше алуға
мүмкіндігінше ертерек қайтыс болған соң, адамдар (зерттеу
әдісі материалдың адам мәйітінің аутопсия).
Диагностикалық мақсатта материалды гистологиялық
зерттеу мүмкін забираться адамдардың прижизненно
көмегімен арнайы құрал-саймандардың немесе операциялар
кезінде. Бұл әдіс материалды алу деп аталады биопсия.
2. Бақылау
Алынған гистологиялық зерттеуге арналған материал бірден ұшырауы тиіс
тіркеу. Бақылау әдісі — мата өңдеу, бекіту мақсатында оның тірі кезіндегі
құрылымын. Бұл арқылы қол жеткізіледі ықпал ету матаға арнайы ерітінділер
(бекіткіштер). Ең елеулі өзгеріс болып жатқан тіндерде әсерінен босату
процесі болып табылады ұю (коагуляция) белоктар. Саны босату керек брать в
20-100 есе көп көлемін кусочка тіркелетін материал. Бар фиксаторлар
қарапайым және күрделі. Қарапайым жатады 10-20% формалин ерітіндісі, 96
ºс, спирт, 100 (абсолюттік) спирт, 1-2% ерітіндісі осмиевой қышқылы және т.
б. Күрделі бекіткіштер: спирт — формол (спирт 70º — 100 мл. және формалин
2-5 мл) сұйықтықты Ценкера (сулема — 5 г, күкірт қышқылды натрий — 1 ж.,
двухромовокиолый калий — 2,5 г, дистилденген су — 100 мл., мұзды сірке
қышқылы, 5 мл.) және т. б. Ұзақтығы белгілеу — бірнеше сағаттан 1 тәулікке
және одан қасиеттеріне байланысты босату және сипаттағы зерттелетін
материал.
3. Суда жуындыру
Белгілегеннен кейін материал жуады (көбінесе бірнеше сағат бойы ағынды сумен) бірге болудан босату
үшін, оны шамадан тыс босату және әр түрлі жауын-шашынның тіркейтін сұйықтықтар.

4.Құрғату
Сусыздандыру мата жүргізіледі бірте-бірте (үшін жоқ сморщивания) жүргізу арқылы оны арқылы
спирттер артып келе жатқан бекіністің: 50º, 60º, 70º, 80º, 90º, 96º, 100º. Әрбір спиртте тілімдерін
орналасқан бірнеше сағаттан 1 тәулікке шамасына қарай кусочка.

5. Тығыздау (құю)
Құю кезінде кесектерін алдын ала пропитываются сол сұйықтықтармен, олар еріткіштермен үшін
парафин (ксилол немесе толуол). Құю парафин. Құю кезінде парафин кесектерін абсолютті спирт
ауыстырылады қоспасы абсолютті спиртті хлороформом немесе ксилолом алынған тең, содан кейін таза
ксилол және, ақырында, балқытылған қанық ерітіндісі, парафин » хлороформе, олар термостатта
температура кезінде 37º дейін 1 тәулік және одан да көп. Одан әрі құю жүргізіледі термостатта
температура кезінде 54º -56º үш порциях парафин. Түпкілікті құю жүргізіледі парафин қосылған балауыз,
ол құяды арнайы қағаз қораптар немесе шыны тостаған, содан кейін бұл қораптар немесе тостаған пайда
болғаннан кейін жер бетінде парафин пленка, суға батырады. Жүреді толық затвердение парафин.
Тілімдерді ортамен олардың парафинмен извлекают келген қорапша көмегімен балқытылған парафин,
наклеивают ағаш кубиктер, өнімділігі парафинді блоктар. Тығыздау, сондай-ақ қол жеткізуге болады
қатыру арқылы кусочка органның (шұғыл биопсиясы).
6. Қималарды дайындау
Үзіктер блоктардан жасалады арналған микротоме. Кең тараған микротомы шана және замораживающий.
Арнайы құрылғыларда микротома қыспаққа алынып, мұның өзі парафиновый блок және микротомный
пышақ. Тетігі бар, поднимающий объектодержатель блогы бар берілген саны микрометр. Бұл мүмкіндік
береді әрбір скольжении пышақ жазықтығында параллель блогының үстіңгі бетінде алуға үзіктер қалыңдығы
5-10 микрометр отырып, парафинді блоктарды.

7. Бояу
Дайындалған микротоме үзіктер боялады. Алдында бояумен бірі парафинді кесінділер міндетті түрде алып
тастайды парафин (растворением » ксилоле).
Бояу қажет үшін айқын анықтауға микроскоппен көрінетін объектінің құрылымдары. Бұл боялмаған срезах
көпшілігі құрылымдары бірдей преломляет жарық, сондықтан оларды қарауға мүмкін емес. Анықтау срезе
гистологиялық құрылымдардың негізделген неодинаковом олардың қатысты красителям. Бір құрылымын
кесім енеді реакциясын бастап қышқыл бояғыштармен бояу және олар боялады (ацидофильные,
оксифильные құрылымын) басқа жауап берсе, негізгі бояғыштармен бояу және боялады, көбінесе олар
(базофильные құрылымдар). Кейбір құрылымын боялады және қышқыл және негізгі бояғыштармен бояу.
Зерттеу әдістері гистология және цитология
Зерттеу әдістері гистология қамтиды гистологиялық препараттарды дайындау және оларды зерттеу
микроскоптың көмегімен.
Негізгі әдісі гистологиялық зерттеу болып табылады жарық микроскопия, түрлерімен мыналар болып
табылады:
фазалы-контрастная микроскопия — негізделген жылжыған фазалардың жарық толқындардың өту кезінде
күн сәулесі арқылы әр түрлі тығыздығы бойынша зерттелетін объектінің құрылымын, бұл әкеледі арттыру
кереғарлығы осы құрылымдардың және қарауға мүмкіндік береді боялмаған және тірі жасушалар;
интерференционная микроскопия — негізделген әртүрлі барысында сәулелерінің беретін мұндай объектінің
бейнесі, ол туралы айтуға болады концентрациясы әр түрлі заттардың клеткадағы; поляризационная
микроскопия — негізделген екі лучепреломлении жасушалық құрылымдар, зерттеуге мүмкіндік береді
спираль немесе көрінетін басқа да зерттеу әдістері құрылымын (мысалы, миофибриллы);

Бірі қазіргі заманғы әдістерін, пайдаланылатын гистология, болып табылады конфокальная микроскопия
алуға мүмкіндік беретін үш өлшемді сурет зерттелетін объектінің, арнайы компьютерлік бағдарламалар
арқылы.

Ұқсас жұмыстар

Парафинді нысандарды кесекшеге құю

Балқитын үлгіге құю

Гистологиялық препараттарды дайындау әдістері

ПАРАФИН БЛОКТАРЫНАН СЕКЦИЯЛАРДЫ ДАЙЫНДАУ

Дәрілік заттарды және негізді дайындау

Термопластикалық қалыптық материалдар

Негізді дайындау

ЖҰМСАҚ ДӘРІЛІК ЗАТ ФОРМАЛАРЫ

МҰНАЙ ҚҰРАМЫ

Ішкі жұқпайтын ауруларда қолданылатын физикалық күштер

Пәндер