Грам тәсілі

Х. Досмұхмедұлы атындағы Атырау университеті.

Жаратыластану және ауылшаруашылық ғылымдар факультеті.

Биология және ауылшаруашылық пәндер кафедрасы

Топ: 5В011300Биология 43

Курс: 4

Орындаған: Тәшенова М

Тексерген:Аға оқытушы, магистр Тапешова Ш

( 2-аралық бақылау № 31)

Бояудың күрделі және қарапайым тәсілдерінің айырмашылықтары. Грам тәсілімен бояу тәртібі. Грам-теріс және грам-оң бактериялардың айырмашылықтары

Жоспары

Бояудың күрделі, қарапайым тәсілдері

Грам тәсілі

Грам-теріс және грам-оң бактериялардың айырмашылықтары

Қорытынды

Бақылау сұрақтары

Пайдаланылған әдебиеттер

Бояудың күрделі, қарапайым тәсілдері

Микробтар клеткасы қабырғасының химиялық құрамы мен құрылысы біркелкі емес, сондықтан олар бір бояғышпен әр түрлі боялып, кейін спиртпен, қышқылдармен және басқа реактивтермен әрекет еткенде бірдей түссіздендірілмейді. Микроб жасушасының бөлімдері де бояғыш ерітінділермен біркелкі боялмайды.

қарапайым тәсіл

Күрделі тәсіл

Қарапайым ( 1 ғана бояуыш қолданылады )

Күрделі ( 2 - 3 бояғыш қолданылады )

Қарапайым бояу әдістерін микроорганизмдердің формаларын анықтау үшін қолданады. Бұл кезде жағымдыларды қандай да бір бояумен бояиды. Негізгі бояулардың

Ішінде көбінде негізгі, фенолды фукцинді, сафранилді, бейтарапты қызғылт, безуви, генциан күлгін қолданылады

Күрделі бояу әдістерін жасуша құрылыс мен микроорганизмдердің дифференциациясын жасауда қолданылады

Бояудың күрделі (дифференциалды) тәсілдері микроб клеткасының осы қаситтеріне негізделген. Күрделі тәсілмен бояу процесінде бірнеше бояғыштар қолданылады. Зертхана тәжірибесінде Грам, Циль-Нильсен, Козловский, Меллер, Злоттогорова және басқа тәсілдер қолданылады.

Негізгі (сілтілік)

қызыл: сафранин, негізгі фуксин

фиолетовые: генцианвиолет, кристаллвиолет, метиллвиолет

көк: меттиленді көк

жасыл: малохитті жасыл

коричневые: везувин, хризоидин

Бактериялық бояғыштар

Боялған препараттың дайындалуы келесі кезеңдер арқылы өтеді:

Жағынды дайындау

Кептіру

Фиксациялау

Бояу

2. Қышқылдар

қызыл: қышқылды фуксин, эозин

сары: пикринді қышқыл

Грам тәсілі

Грамм бойынша бояу дегеніміз -бактериялардың бар жоғын, олардың грамы оң немесе теріс екенін анықтау үшін қолданылатын негізгі әдістердің бірі. Бұл тәсілді 1884 жылы дат ғалымы Христиан Иоким Грам ұсынған болатын. Грам ұсынған тәсіл бойынша клеткалардың боялуы клетка қабықшасының құрамына байланысты. Грамтеріс және Грамоң бактериялардың әр түрлі боялуы олардың клетка қабырғалары құрылымына байланысты. Грам-оң бактериялардың клетка қабырғасы грам-теріс микробтардікіне қарағанда қалың және көптеген пептидогликан полимерін иемденген. Сондықтан генцианвиолетпен тығыз байланысып, спиртпен әрекет жасағанда түссізденбейді. Грам-теріс бактериялардың клетка қабырғасы жұқа және оның құрамында пептидогликан аз мөлшерде болады. Осы себептен олар бояумен әлсіз боялып, спиртпен өңсізденеді.

1-Сурет. Христиан Иоким Грам. 1853-1938

Грам бойынша бояу әдісі:

Бекітілген препараттың үстінде фенолды күлгін генцианвиолет сіндірілген сүзгіш қағаздың тілімін 2-3 минут ұстайды.

Сонан соң қағазды алып, жағындыны Люголь ерітіндісімен 2-3 минут өңдейді.

Бояудың келесі кезеңінде жағынды 96%-дық этил спиртімен 30-40 секунд өңделеді де жақсылап сумен жуылады.

Препарат Пфейффердің фуксинімен қосымша 1 минут боялады.

Сумен жуылған соң, сүзгіш қағазбен кептіріліп, микроскопияланады.

Осы тәсіл бойынша бояу нәтижесінде микробтар күлгін немесе қызғылт түстерге боялады. Спирттің әрекетіне қарамастан бастапқы күлгін түсін сақтайтындар Грам оң микробтар тобына жатқызылады (топалаңның, шошқа тілмесінің, қатерлі ісіктің қоздырғыштары, стафилококктар және т. б. ), ал спиртпен өңсізденіп фуксинмен қызғылт қызыл түске қосымша боялатындар Грам теріс микробтар тобына жатқызылады (ішек таяқшасы, сальмонеллалар, пастереллалар және т. б. ) .

2- Сурет. Стафилококк гр+ пен ұсақ таяқшаның гр- қоспасы.

Грам әдісі бойынша боялғандағы көрінген бейне

3- Сурет. Грам оң тәсілі. Бацилла

4-Сурет Грам теріс. Ішек таяқшасы

Грам әдісімен бояу үлгісі

2 3 4

6 7 8

9 10 11 12

Нәтижесі :

Бактериялардың түрін микроскоппен пішініне қарай анықтауға болады: көбінесе олар кокки (дөңгелек) және бацилла (таяқша тәрізді) болады. Міне, грам-позитивті (күлгін) бактериялардың кең тараған түрлері:Грам-позитивті кокктар - ереже бойынша стафилококктар (жүзім шоғыры түрінде) немесе стрептококктар (тізбектер) .

Грам-позитивті таяқшалар қамтиды бациллалар, клостридия, коринебактериялар және листерия . . . Тұқым өкілдері актиномицеттер бұтақтары мен жіптері жиі болады.

Көбінесе грамтеріс (қызғылт) бактериялар үш топқа бөлінеді: кокки (дөңгелек), таяқша тәрізді (ұзын және жіңішке) және аралық пішіні бар коккоид. Грам-теріс кокктар көбінесе әр түрлі түрлермен бейнеленеді Neisseria. Грам теріс таяқшалар қамтиды colibacillus, энтеробактериялар, Клебсиелла, цитобактериялар, серратия, протеус, сальмонеллалар, шигелла, псевдомонас және тағы басқалар. Тырысқақ вибрионы қалыпты немесе қисық таяқшалар түрінде де болуы мүмкін.

Грам-теріс «коккоидты» бациллалар (немесе «коккобактерия») қамтиды бордетелла, бруцеллалар, гемофилия және пастерелла.

6-Сурет. Грам оң бацилла

5-Сурет. Грам теріс тырысқақ вибрионы