Микротом. Микротом түрлері

Жұмыс түрі: Материал
Тегін: Антиплагиат
Көлемі: 12 бет
Таңдаулыға:

Микротом (грек тілінен аударғанда mikros - кіші және tomē - бөлшектеу, кесу) - микроскопиялық зерттеу нысаны ретінде қолданылатын жұқа кесінділер жасауға арналған құрылғы (ондаған және жүздеген нанометрлерден жүздеген микрометрлерге дейін). Көбінесе микротома биологиялық тіндерді зерттеу кезінде қолданылады, бұл жағдайда олар көбінесе алдын-ала микроскопиялық әдістердің көмегімен бекітіледі.
Қатты заттарды (минералдар, қорытпалар) микроскопиялық зерттеу үшін жіңішке кесінділер қолданылады - жылтыратылған, кейде оюланған препараттар.
Қазіргі заманғы микротомалар - бұл берілген құрылғылармен көптеген үлгілер бөлімдерін қамтамасыз ететін күрделі құрылғылар. Микротомдардың көмегімен алынған кесінділердің қалыңдығы парафинге салынған кезде 1-2 мкм, целлоидинге 10-12 мкм, ал мұздатылған кезде 10 мкм дейін болады. Ультра жұқа бөлімдерді алу үшін арнайы ультрамикротомдар қолданылады.
Тарихы
Қолмен жасалған микротом
Қол микротомын ойлап тапқанға дейін зерттеушілер әдеттегі түзу ұстара қолданды.
Құрылғыны қолмен басқарды, ал үлгіні цилиндрде ұстады және үлгінің жоғарғы бөлігінен қол иіндігінің көмегімен жасады. [1] [3] Алғашқы микротомдардың бірі 19 ғасырдың басында салынған. неміс биологы А.Осхак, серіктес Дж.Пуркин.
Содан кейін тілімдердің біртектілігі мен жіңішкелігіне қойылатын талаптар өскен сайын материалды пышаққа жеткізумен де, пышақпен материалмен қамтамасыз ету кезінде де жетілдірілген құрылғылар пайда болды.
Ең жақсы кесінділер алуға байланысты қосымша міндеттерді бөліп көрсету керек: қолмен дайындалатын және микротомаларға арналған пышақтар, оларды қайрау және қайта тегістеу үшін пышақ жасау; үлгілерді кесу алдында қатайту - парафинге, целлоидинге салу немесе мұздату.
Біраз уақыт бойы арнайы жасалған шыны чиптерден жасалған пышақтар қолданылған.

Алғашқы микротомдардың біреуінің сызбасы (Каммингстен кейін, 1770. [1]).

Қолмен жұмыс жасайтын микротом

Микротом түрлері

Қолмен жұмыс жасайтын микротомалар қазіргі кезде қиманың қалыңдығының төмен репродуктивтілігіне байланысты қолданылмайды.
Шананың микротомы
Шананың микротомы - ең көне дизайндардың бірі. Құрылғының атауы пышақ пен блоктық қысқышы бар беру механизмінің (объект ұстағыш) арнайы сырғанақта қозғалуымен байланысты. Көбіне микротомда қозғалмалы пышақ пен зат арнайы ұстағышқа бекітілген. Нысан микрометрлік бұрандамен күшейтіліп, көтеріледі, ал микротома пышағы көлденең жазықтықта қозғалады. Кейде құрылғы біршама ерекшеленеді: нысан қозғалады, пышақ қозғалмайды.
Роторлы микротома
Роторлы (доңғалақты) микротома (латын тілінен аударғанда rotational - айналмалы қозғалыс) қозғалмайтын пышақ бар, ал зат соған қатысты қозғалады. Мұндай микротом тұрақты қалыңдығымен үлгінің кесінділер сериясын алуға мүмкіндік береді.
Модельдер: РОТМИК-1 (LEICA-дан RM 2135 микротомының аналогы), парафинге және басқа ортаға салынған заттардың үлгілері бөлімдерін алуға арналған және стандартты кассеталарда, блоктарда немесе ағаш субстраттарда дайындалған. Тіліктердің қалыңдығы 0,5 - 60 мкм; микротомның салмағы 35 кг.
Парафин секцияларына арналған микротом.
Микротомды аралау:
Ультрамикротома
Қалыңдығы 10 нм және одан да көп бөлімдер алуға арналған микротомдарды ультрамикротомдар ( ультратомалар) деп атайды .
Micromome Microm HM 200
Ультрамикротома электронды микроскоппен зерттелетін өте жұқа кесінділер алу үшін қолданылады (20 нм-ге дейін, минимум 5 нм). Пышақты немесе затты белгілі бір төмен биіктікке беру жұқа кесінділердің алынуын қамтамасыз етеді (әдетте қалыңдығы 200 Å-ден аспайды, мүмкін шамамен 50 Å). Тілімнің минималды қалыңдығы құю ортасының сапасына және пышақ жиегінің анықтығына байланысты.
Көбінесе олар бекітілген пышақпен және қозғалмалы затпен схемаларды қолданады. Мұндай құрылымдарда қозғалыс механикалық, көбінесе - жылу беру арқылы жүзеге асырылады (объект бекітілген тіреуіш штангасының дозаланған кеңеюіне байланысты). Жылумен жабдықтау схемасын 1953 жылы Ф.Шёстранд ұсынған. Ультрамикротомдар үшін шыны және гауһар пышақтар қолданылады, олардың сапасы микроскоптың қараңғы өрісінде тексеріледі - кесу жиегі жарқын түзу сызық тәрізді болуы керек.
Криомикротома.
Бекітілмеген тіндердің жұқа бөлімдерін алу үшін препараттарды салқындату арқылы мұздату микротомдары (криомикротомдар) жасалды. Олардың дизайны биологиялық тіндердің сұйық көмірқышқыл газымен тоңуын қамтамасыз етеді (олар крио-ультрамикротома - крио камерамен біріктірілген ультрамикротом атауын да қолданады).
Мұздату микротомалары, әсіресе тез арада зерттелетін, мысалы, хирургиялық операциялар кезінде, жедел гистологиялық анализ үшін бекітілмеген тіндердің бөлімдерін алу үшін өте пайдалы). Су немесе тұзды ерітіндідегі тіндердің бөліктері сұйық көмірқышқыл газымен мұздатады.

Микротомды пышақтар.
Қолдану:
Микротомдар зерттеу үлгілерін дайындау үшін классикалық оптикалық микроскопияда, сондай-ақ биологиялық объектілердің электронды және сканерлі зондтық микроскопиясында кеңінен қолданылады.

Микротом MICROTOM (грек тілінен аударғанда mikros - кіші және temno - кесілген), бөлімдерді микроскоппен зерттеуге ыңғайлы етіп жасауға арналған құрал. M. құрылғысының жалпы принципі - зат микрометриялық бұранданың көмегімен тікелей немесе көлбеу жазықтық бойымен тік бағытта микронмен көрсетілген белгілі бір кіші мәнге көтеріледі; пышақ көлденең жазықтықта қозғалады, оны тікелей қолмен ұстайды (қарапайым үлгілерде) немесе арнайы ұстағышқа қысады. M.-ді кесу үшін затты мүмкіндігінше тығыз етіп, біртекті ортаға құю керек. парафинде немесе целлоидинде; сіз сондай-ақ спрей эфирін немесе сұйық СО2 көмегімен мұздатуға болады. Толтыруға байланысты, сонымен қатар зерттелетін объектінің қасиеттері сияқты, микротом қалыңдығы 1 fi дейінгі бөліктерді алуға мүмкіндік береді (бұл қол ұстара арқылы тікелей кесу кезінде қол жетімді емес), сонымен қатар бірдей қалыңдықтағы кесінділер тізбегін саңылаусыз алуға мүмкіндік береді. M. нұсқаулары M. қалың қабырғалы металл цилиндрден тұрады, оның үстіңгі жағы жақсы жылтыратылған, оның үстінде қарапайым ұстара немесе арнайы пышақ қолмен ұсталады. Цилиндрдің ішінде жіңішке бұрандалы жіп бар; оның төменгі жағында басы бар микрометриялық бұранда бар, оған цилиндрлер астарында дайындықтың қаншалықты алға жылжығанын көрсететін градациялар қолданылады. Бұранданың жоғарғы ұшында кесілетін нысан бекітілген платформа бар. Құрал арзан және тек дөрекі кесектерге жарайды.- Студент М. үстелге бекітіліп, берік металл қаңқадан тұрады, онда микрометриялық бұранда өз жүрісінің индикаторымен және затты нығайтуға арналған платформамен немесе препарат желімделген ағаш немесе орнықты кубқа арналған қысқышпен бекітіледі. Жақтаудың жоғарғы бөлімінде жер доға бар, оның бойымен қысқышпен жабдықталған пышақ ұстағыш жүреді. Препарат пышақтың артқа тартылған сайын қолмен немесе автоматты түрде қозғалады, ол үшін бұрандада тісті доңғалақ бар, пышақ ұстағышымен байланысқан және реттегішпен жабдықталған, бұл препаратты жоғары қарай белгілі бір микронмен тамақтандыруға мүмкіндік береді. Мұндай микротома өте жұқа кесінділер алуға мүмкіндік береді.- Ұқсас микротом сұйық СО2-мен мұздатылған заттардың кесінділерін жасау үшін қолданылады (Юнг, Рей-Черттен мұздату микротомдары; 1-сурет). Осы мақсатта объектіге арналған сұйық СО2-ге арналған бүріккіш бекітілген, шеттері бұл жерде болаттан жасалған икемді металл түтік арқылы жеткізіледі., „Әдетте қысымды төмендететін клапанмен жабдықталған цилиндр. Бүріккіштің өзінде қажетті сұйықтық СО2 ағынын іске қосуға немесе оның ағынын толығымен жабуға және тоқтатуға мүмкіндік беретін кран бар. Мұздатылған объектілердің кесінділері жақында кең таралды, ал кейбір әдістерін өңдеу үшін hist. материалдар мүлдем алмастырылмайды, өйткені * - * және min жаңа, itkJI J * кейде әр түрлі реактивтермен бекітілмеген материалдарды өңдеуге мүмкіндік береді. Сонымен қатар, М.-ны қатыру. пат.-hist-ке қажетті дайындықты тез алуға мүмкіндік беретін қиын және ұзақ толтыруды жояды. Зерттеулер.Ауыр шойын тіреуінде тік қалың тақтайша бекітіліп, сол жақтағы кесіндіге сол пластина өткір бұрышта бекітіліп, аталатын түзіледі. бұранданың және арнайы ұстағыштың көмегімен М пышағы бекітілген сына тәрізді массивтік бөлікке арналған ыдыс, бұл сына тәрізді кесіндіде және 1. Мен микротоммен Сарто-и - көмірқышқыл газы бар цилиндрмен қатып қаламын; 2 - мұздатылатын затқа арналған үстелмен бүріккішке (3) апаратын металл түтік; 4 - пышақ; 5 - бүріккішке түртіңіз. аталған тақтайшалардан пайда болған бұрыштың бүйірлері бір-бірімен сәйкес келетін және пышақ жүргізушісінің осы слайдта тегіс сырғып кетуіне мүмкіндік беретін жерге тұйықталған жолақтар. Тұғырдың сол жағында Illlllllllllnirtl'llllUII ' сол жақтағы үйірге сол бұрыш екіншісін сүйір бұрышпен бекітіп, сол деп аталады. бұранданың және арнайы ұстағыштың көмегімен М пышағы бекітілген сына тәрізді массивтік бөлікке арналған ыдыс, бұл сына тәрізді кесіндіде және 1. Мен микротоммен Сарто-и - көмірқышқыл газы бар цилиндрмен қатып қаламын; 2 - мұздатылатын затқа арналған үстелмен бүріккішке (3) апаратын металл түтік; 4 - пышақ; 5 - бүріккішке түртіңіз. аталған тақтайшалардан пайда болған бұрыштың бүйірлері бір-бірімен сәйкес келетін және пышақ жүргізушісінің осы слайдта тегіс сырғып кетуіне мүмкіндік беретін жерге тұйықталған жолақтар. Тұғырдың сол жағында Illlllllllllnirtl'llllUII ' сол жақтағы үйірге сол бұрыш екіншісін сүйір бұрышпен бекітіп, сол деп аталады. бұранданың және арнайы ұстағыштың көмегімен М пышағы бекітілген сына тәрізді массивтік бөлікке арналған ыдыс, бұл сына тәрізді кесіндіде және 1. Мен микротоммен Сарто-и - көмірқышқыл газы бар цилиндрмен қатып қаламын; 2 - мұздатылатын затқа арналған үстелмен бүріккішке (3) апаратын металл түтік; 4 - пышақ; 5 - бүріккішке түртіңіз. аталған тақтайшалардан пайда болған бұрыштың бүйірлері бір-бірімен сәйкес келетін және пышақ жүргізушісінің осы слайдта тегіс сырғып кетуіне мүмкіндік беретін жерге тұйықталған жолақтар. Тұғырдың сол жағында Illlllllllllnirtl'llllUII ' Мен Сарто-и микротомымен қатамын - көмірқышқыл газы бар цилиндр; 2 - мұздатылатын затқа арналған үстелмен бүріккішке (3) апаратын металл түтік; 4 - пышақ; 5 - бүріккішке түртіңіз. аталған тақтайшалардан пайда болған бұрыштың бүйірлері бір-бірімен сәйкес келетін және пышақ жүргізушісінің осы слайдта тегіс сырғып кетуіне мүмкіндік беретін жерге тұйықталған жолақтар. Тұғырдың сол жағында Illlllllllllnirtl'llllUII ' Мен Сарто-и микротомымен қатамын - көмірқышқыл газы бар цилиндр; 2 - мұздатылатын затқа арналған үстелмен бүріккішке (3) апаратын металл түтік; 4 - пышақ; 5 - бүріккішке түртіңіз. аталған тақтайшалардан пайда болған бұрыштың бүйірлері бір-бірімен сәйкес келетін және пышақ жүргізушісінің осы слайдта тегіс сырғып кетуіне мүмкіндік беретін жерге тұйықталған жолақтар. Тұғырдың сол жағында Illlllllllllnirtl'llllUII 'llll'l '' 2-сурет. Сапный микротомы: 1 -- пышақ; 2 - зерттеу нысаны; 3 - слайдтың тегістелген жолақтарының бірі; 4 - пышақтың үстіне төгілетін алкоголь қалдықтарына арналған кесе; 5 - затты өрескел төмендетуге және көтеруге арналған тұтқа; 6 - бөлімдері бар диск. М-де микрометрия ... жалғасы

Сіз бұл жұмысты біздің қосымшамыз арқылы толығымен тегін көре аласыз.