Аллергологиядағы молекулалық зерттеу әдісі

1. Аллергологияда қолданылатын . молекулалық генетикалық зерттеу әдістер әдістеі ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... .3
2. Аллергологиялық аурулар кезінде болатын гендік өзгерістер ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ..3
3. Бронх демікпесін анықтауда қолданылатын молекулалық генетикалық зерттеу ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ..4
        
        Жоспары:
* Аллергологияда қолданылатын . молекулалық генетикалық зерттеу әдістер әдістеі.............................................................................................3
* Аллергологиялық аурулар кезінде болатын гендік өзгерістер..........................................................................................................3
* Бронх демікпесін анықтауда қолданылатын ... ... ... ... ... Молекулалық-генетикалық әдістер.
Бұл әдістер ДНҚ фрагментін талдауға , оның жеке ... ... ... ... ... ... береді.
Полимераздық тізбектік реакция
Соңғы жылдарда клиникалық практикада полимераздық тізбектік реакция әдісі кең ... ... ( ПЦР ... ... chain reaction, PCR diagnostics ). Бұл лабораторияға зерттеу үшін әкелінген әр ... ... ... ... ... ... анықтаудың арнамалы және сезімталдығы жоғары әдіс болып табылады. Бұл қан, ... ... зәр, ... кез - ... ... ... ( қуық асты безі сөлі, плевралық, жұлын ми, буындық сұйықтық, ... ... ... т.б.), ... он екі елі ... аш ішек кілегейінің биоптаты, т.б.
Микробиологиялық зерттеу әдістерінен айырмашылығы, анализ ... ... ... ПЦР - ... ... арқасында организмге енген микроорганизмнің ДНҚ бөлігінің сан алуан көшірмесін жасап шығаруға және анықтауға болады. Ол үшін зерттелетін сынамада арнамалы ... 200 ... ... ... ... болса жеткілікті.
ПЦР әдісі принципі жайында алғаш рет 1983 жылы Кэри ... ... ... Бұл молекулалық биология саласындағы ең жоғары жетістіктердің бірі болды. ПЦР - анализі әдісін ашқаны үшін Кэри Маллис ... ... ... ... ... ие ...
ПЦР әдісі негізі болып термостабильді ДНҚ - полимераза ферменті көмегімен in vitro жасалған, ... ДНҚ ... ... ... ... Бұл фермент полимеразды тізбектік реакциясындағы барлық процесстерді және катализдеуге мүмкіндік беретін, соның ішінде ... ... ... керемет қасиеттерге ие болып келеді.
Клиникалық үлгінің ПЦР анализі үш негізгі сатыдан тұрады:
а) ДНҚ ... РНҚ - ны ... ДНҚ ... ... ДНҚ ... ... детекциясы ( нәтижелерді тіркеу ).
Б і р і н ш і с а т ы д а ... үшін ... ... материал арнайы өңдеуден өтеді, яғни сынамадан клеткалық материал, пептидтер, көмірсу, полисахаридтер мен ... ... ... ... ... ... ДНҚ жіпшелері сақталып қалады. Бұл ПЦР анализдің келесі реакциясының қамтамасыз етеді.
К е л е с і с а т ы ДНҚ - ... мен ДНҚ ... ... ... ... ... үлгіге ДНҚ -полимераза ферменті, төрт түрлі мононуклеидтердің ( А, Г, Т, Ц ) жеткілікті мөлшерінен ... ... қосу ... ... ... ДНҚ - матрица (праймерлер) - инфекция қоздырғышының жасанды жолмен синтезделген қысқа ДНҚ , мұнда ДНҚ ... ... ... әрқайсысы ДНҚ фрагментінің бір ұшымен сәйкес келеді.
ДНҚ - амплификатор деп аталатын арнайы құрылғыда, алынған үлгіні қыздырған кезде, екі ... ... ДНҚ ... ... яғни ДНҚ бір ... екі жіпшелерге бөлінеді. Үлгіні салқындатқан кезде осы жіпшелердің соңғы бөліктеріне праймерлер қосыла ... және ДНҚ - ... ... арқасында үлгіде бар нуклеотидтерден ДНҚ - ң екінші спиралі құралады. Осылайша екі ... екі ... ДНҚ ... ... ... синтезінің бірінші циклы аяқталған соң, қайтадан осы екі спиральдің термиялық денатурациясы басталады. Нәтижесінде төрт бірспиральді ДНҚ жіпшелері ... ... ал үлгі ... ... екі ... төрт ДНҚ жіпшелері алынады.
Осылайша, амплификация циклын бірнеше рет ... ... ... ДНҚ ... ... және миллиардтаған көшірмелері . Кейін ол полиакриламидті, агарлы гельде электрофарез немесе иммуноферментті анализді қолданғанда ( ПЦР- ... ү ш і н ш і с а т ы с ы) ... ... мүмкін. Осы мақсатта амплификация өнімдерінің қоспасына ДНҚ фрагментіне арнайы ерітінділер қосылады. Ерітінділер ... ... ... ... ... бактерия ДНҚ-cы бар екендігін көрсететін флуоресциация қабілетіне ие болып келеді.
1-сурет.Амплификация тәсілі бойынша ДНҚ синтезделу үлгісі.
ПЦР негізгі артықшылығы анализ жасау уақытының ... (2-3 ... ... ... және ... ... ... саналады. ПЦР зерттеуге кез-келген зерттеу материалын, соның ішінде басқа зерттеу әдістерімен қолдануға келмейтін ... - ... ... зәр, қан, ... шәует, эпителий клеткаларының жағындысы, т.б. қолдана беруге болатындығы маңызды болып келеді.
Нуклеин қышқылдарының гибридизациясы ... ... ... ... бөлгеннен кейін, оларды полиакриламидті немесе агарлы гельде электрофарезден ... ... соң, ДНҚ ... ... ... ... ... фрагменттерін анықтау үшін , Саузерн бойынша блотгибридизация ... ... ... ... бойынша микробиологиялық ингибиторлық тест, гибридизация әдістері, биохимиялық микробиологиялық экспресс- әдістер - ... ... ... ... ... әдістер де тұқым қуалаушылық ауруларды құрсақішілік ұрықтық даму кезінде уақытында анықтау үшін көп мағлұмат береді және қазіргі ... кең ... ... ... ... ... дерматит пен аллергологиялық аурулардың гендік өзгерістері.
Профиллагрин геніндегі мутация филлагриннің өндірілуін тоқтатады, соның нәтижесінде әр түрлі ... ... ... пен ... да ... ... ... әкеледі. Мутацияның салдарынан терінің қорғаныш қызметі төмендейді, осыған байланысты эпидермис арқылы аллергендер денеге енеді де, жергілікті және жалпы аллергиялық реакция ... (Palmer et al., 2006; Smith et al., 2006; Elias et al., 2008; Akiyama et al., 2010; ... et al., 2010; Mildner et al., 2010; Poni?ska et al., 2011; Zhang et al., 2008, 2011; Kezic et al., 2011).
3, ... ... ... ... ... обструкциясы синдромымен көрініс береді және созылмалы персистирленген қабыну процессімен сипатталады. Қабыну эозинофильдік болып келеді және СD ... ... ... ... ... ... ... кортикостероидтармеен оңай басылады.
Бронх демікпесінде тыныс жолдарының құрылымдық ... мен ... ... ... ... ... орын ... Қазіргі таңда цитокиндердің 50 жуық түрі анықталған, бірақ олардың бұл аурудың патофизиологиясындағы рөлі толық түсінікті емес.
Қабыну медиаторлары бронх констрикцияның плазма ... , ... ... ... ... белсенділігін тудырады, коллаген талшықтары депозициясы нәтижесінде фиброз дамуына, бронх қабырғасының моноциттерінің гиперплазиясы мен гипертрофиясына әкеледі, кілегей асты қабатының ... ... ... және тыныс жолдары қабырғасының иннервациясын бұзады.
Атопия бронх демікпесі дамуында иммунопатология сияқты саналатыны белгілі. Атопиялық реакцияларда Т-хелпер клеткаларының 2 типінен өндірілетін ... ... рөл ... IL-4, IL-5, IL-9 және IL-13. Аллергиялық реакциялардың туындауы негізінде Т- хелпер-2 типінің Т-хелпер-1 қарағанда басым болуы жатады. ... ... ... ... ... ... ...
Тһ-2 тәуелді цитокиндер (IL-4, IL-5, IL-9,IL-13) гендер кластерін кодтайтын ... ... ... ұзын иығында (5q31.1-5q33) орналасқан.
Аллергиялық қабыну дамуында Интерлейкин - 4 ... ... ... ... Ол В - лимфоциттерді IgE өндіруге ... ... ... ... ... ... ... нәтижесінде Т-хелперлер, моноциттер, базофильдер мен эозинофильдер қабыну ошағына жиналады, сонымен қатар Тһ-2 лимфоциттер дифференцировкасы жүреді.
Бронх ... ... ... ... ... ... медиаторлардың бірі болып қабынуға қарсы цитокин TNFα ... TNFα - ны ... мен ... ... ... Олар интерлейкиндер каскады (IL-1, IL-6, IL-8) инициациясында маңызды рөл атқарады. TNFα оксидативті стресс дамуындағы рөлі индуцибельдік NO-синтаза (iNOS2) белсенсендіруге ... TNFα ... ... ... ІІІ ... ... 6-хромосоманың қысқа иығында орналасқан (6р21.3).
Бронх демікпесінің дамуына әкелетін цитокин гендерінің (IL4, TNFα) әсері мен рөлі жайында ... ... ... ... зерттеу жасалған. Зерттеуге Астана қаласының Онкологиялық диспансерінің пульмонологиялық бөлімшесінде Бронх демікпесімен емделіп жатырған 58 науқас ... ... 35-і (60,3%) ер ... және 23-і (39,7%) әйел адамдар болған. Жас айырмашылығы 32-78 жас аралығында болған. Бронх демікпесінің клиникалық диагнозы БД емдеу мен ... ... ... ... ... ... рентгенологиялық зерттеулермен дәлелденген. 44 науқас персистирленген орташа ағымды астма, ал 14 науқас ауыр ағымды персистирленген астмамен ауырған.
Зерттеу жүргізуге материал ... қан ... және Ісік ... факторы (TNFα) , интерферон-g(ИНФ-g), интерлейкиндер 4, 2, и 10 (IL4, IL2 и IL10), қан ... ... ... Е (IgE) ... ... ... гені -589С/Т және IL5 гені - 709C/T полиморфизмін ... үшін ... ... реакция әдістері қолданылған.
Реакция өнімдерін 3% агарлы гельде және ... ... ... ... ... ... ... талдау жасаған.
Зерттеу қорытындысы бойынша, науқастардың қан сарысуынан жалпы иммуноглобулин Е көп мөлшерде табылды. IL-4/ -INF цитокиндер қатынасын талдау кезінде Тһ-2 ... ... ... ... анықталды. ТNF - α БД ауыр ағымында жоғары деңгейде болған.
Алынған ... ... ... ... ... ... ТNF - α ... 308-А - генотипі бар адамдар бронх демікпесімен ауыру қаупі жоғары екендігі анықталды. ... ... ... яғни дені сау ... ... БД ауыратын адамдардың қан сарысуында IL-2, IL-4, TNF-α, IL-10 ... ... ...
Ресей зерттеушілері аллергиялық аурулармен ауыратын адамдар мен сау ... екі ... ... ... популяциядағы кең таралған екі ген FLG - с.2282del4 ... және ... ... ... с.2282del4 гені мутациясының гетерозиготты тасымалдаушылары бақылау тобының 3,86% сәйкес келеді. Аллергиялық аурулардағы с.2282del4 аллелі ... ... 4,34% , ал ... ... - 1,93% ... OR=2,31 ... құрады.
Пайдаланылған әдебиеттер:
* Зайцева О.В., Лаврентьев А.В., Зайцева С.В., Самсыгина ... ... ... ... ... и интерферон-
гамма в сыворотке крови у детей при бронхиальной астме в различные периоды заболевания. Аллергология 2000; 3: ... ... ТВ., ... М.И., ... В.А. и др. ... ТМ1- и ... и ... бронхиальной астмы.
Иммунология 2005; 3: 164-167.
* Фрейдин М.Б., Брагина Е.Ю., Огородова Л.М., Пузырев В.П.
Генетика атопии: современное состояние. Вестник ... 2006; ... ... Р.М. ... аллергология. М. 2002. - С. 175-191.
* Интернет желісі. www.google.ru
* www.yandex.ru

Пән: Медицина
Жұмыс түрі: Реферат
Көлемі: 6 бет
Бұл жұмыстың бағасы: 200 теңге









Ұқсас жұмыстар
Тақырыб Бет саны
Бензол молекуласының электрондық құрылысын МПДП әдісімен есептеу22 бет
Глаукомамен ауыратын науқастардың миоцилин геніндегі мутацияларды зерттеу58 бет
Фенол молекуласының электрондық құрылысын есептеу27 бет
Микроағзалардың генетикасы. инфекция және иммунитет жайлы ілім. аллергия5 бет
Мутациялық жағдайлар туралы4 бет
Акрил қышқыл негізінде суда еритін ұнтақ тәрізді полимерлерді алу26 бет
Белоктардың жіктелуі, құрамы20 бет
Бидай изоферменттерінің әр түрлігін электрофорез арқылы зерттеу23 бет
Биологиялық активті заттарды полимерде иммобилизациялау41 бет
Биосенсорлардың құрылысы7 бет


+ тегін презентациялар
Пәндер
Көмек / Помощь
Арайлым
Біз міндетті түрде жауап береміз!
Мы обязательно ответим!
Жіберу / Отправить


Зарабатывайте вместе с нами

Рахмет!
Хабарлама жіберілді. / Сообщение отправлено.

Сіз үшін аптасына 5 күн жұмыс істейміз.
Жұмыс уақыты 09:00 - 18:00

Мы работаем для Вас 5 дней в неделю.
Время работы 09:00 - 18:00

Email: info@stud.kz

Phone: 777 614 50 20
Жабу / Закрыть

Көмек / Помощь