Микроскоптың жалпы үлкейтуі
Федералдық білім агенттігі
Федералдық мемлекеттік білім беру мекемесі
жоғары кәсіби білім
Сібір федералды университеті
Авторлар
Г олаванова Тамара Ивановна
Иванова Анна Николаевна
Горбанева Тамара Борисовна
Гистология негіздерімен цитология
Зертханалық тәжірибелік сабақ
Красноярск
2013
Аннотация
Мақалада биологиялық саланың барлық мамандықтарының студенттеріне оқытылатын Гистология негіздерімен цитология жалпы курсы бойынша зертханалық тәжірибелік сабақтарға арналған әдістемелік нұсқаулар берілген. Әдістемелік нұсқаулар Гистология негіздерімен цитология курсының бағдарламасына сәйкес құрастырылған және оның зертханалық практикалық сабақтарын өткізуге арналған негізгі оқу-әдістемелік құрал болып табылады. Практикалық курстың міндеттеріне дәрістерде алған теориялық білімдерін бекіту, микроскоппен зерттеу және жануарлар мен өсімдік тектес жасушалар мен ұлпалардың суретін салу, микроскопиялық препараттарды өз бетінше жасау дағдыларын меңгеру кіреді.
Кіріспе 5
Микроскоппен жұмыс істеу ережелері 5
Микроскоппен жұмыс істеу кезіндегі қауіпсіздік шаралары 7
Микроскоп құрылғысы 7
Сыртқы сәулелендіру құралымен микроскоптың жарықтандыруын орнату 8
Негізінде орнатылған сəулелендіру құралы бар микроскоптың жарықтандыруын орнату 10
Тұрақты және уақытша препараттарды дайындау 10
Микроскоптың негізгі ерекшеліктері 12
Объектив ажыратымдылығы 16
Линзаның сандық апертурасы 17
Микроскоптың жалпы үлкейтуі 18
Кескіннің өріс тереңдігі 18
Өсімдіктер мен жануарлар жасушаларының құрылысының жалпы жоспары 21
Канадалық элодеяның дамушы жапырақтарының жасушаларының құрылымы ( Elodea canadensis Michx .) 24
Элодеяның түзілген жапырағы жасушаларының құрылысы 26
Валлиснерияның жапырақ терісінің жасушалары ( Vallisneria спираль L. ) 28
29 терісінің жасушаларында плазмолиз.
Эндоцитоз 31
Адамның ауыз қуысының жалпақ эпителий жасушалары 31
Жасушааралық байланыс 32
Құрма тұқымдарының сақтау ұлпасының жасушалық мембранасындағы плазмодесмата ( Diospyros Каки Түймешік .) 34
Эндоплазмалық ретикулум 35
Рибосомалар 36
Гольджи аппараты 38
Лизосомалар 39
Пероксисомалар 40
Элодея жапырақ жасушаларында ассимиляциялық крахмалды анықтау canadensis Майкл .) 44
Хромопласттың ультрақұрылымдық ұйымы 45
Сәбіздің піскен жемістері мен тамырларының перикарп жасушаларында хромопластар 46
Лейкопласттың ультрақұрылымдық ұйымдасуы 47
Tradescantia ) жапырақ терісінің жасушаларындағы лейкопластар Вирджиния L .) 48
Амилопластар 49
Интерфазалық ядролардың ультрақұрылымы 49
Ядролық мембрананың ультрақұрылымы 51
Өсімдік жасушаларының ядролары. Пияз тамыры 52
Пияз тамыр жасушаларындағы митоз 57
Жануарлар жасушасындағы митоз 59
Эпителий жасушаларының амитозы 60
Жасушаның өлу жолдары 62
Эпителий ұлпалары 62
Бүйрек өзекшелерінің призмалық эпителий жасушалары 64
Тіссіз мантияның кірпікшелі эпителий жасушалары 65
Псевдостратификацияланған қарапайым эпителий 66
Көп қабатты эпителий 67
Несепағардың өтпелі эпителийі 68
Асқазан түбі бездерінің париетальды жасушалары 69
Дәнекер тіндер 72
Егеуқұйрықтың борпылдақ дәнекер тіні 75
Төбешік терісінің пигмент жасушалары 77
Майлы тін 78
Тығыз дәнекер ұлпа 79
Қоян қабырғасының гиалинді шеміршегі. 80
Омыртқа аралық дискінің талшықты шеміршегі 81
Эластикалық байлам. Бойлық қима 81
Тығыз коллагенді дәнекер тін. Сіңір, көлденең қима. 82
Сүйек тіні. Жабық жасушалары 84
85 қимадағы адамның жіліншік сүйегі
Дәнекер тіннен сүйектің дамуы. Ұрық шошқаның төменгі жақ сүйегі 86
Шеміршек орнында сүйектің дамуы. Шошқа эмбрионының түтік тәрізді сүйегі 87
Бақаның қызыл қан жасушалары 88
Адам қанының жағындысы 89
Бұлшық ет тіні. Жүйке ұлпасы 90
Жолақты бұлшықет тіні 93
Тегіс бұлшықет тіндері 94
Жүрек бұлшықетінің ұлпасы 95
Жылқының көз торының жүйке жасушалары 96
Қозғалтқыш нейрондар. Жұлын 97
Қозғалтқыш нейрондардағы тигроид 99
Мидың нейрондарындағы синапстар 100
Миелинді жүйке талшықтары 101
Библиографиялық тізім 103
105- қосымша
Қауіпсіздік ережелері 105
Жұмыстарды жобалау ережелері 107
Цитогенетикалық және цитембриологиялық терминдердің қысқаша сөздігі 108
Кіріспе
Биология мамандарын даярлауда жалпы биологиялық пәндердің ішінде жасушаның құрылысы мен қызметі туралы ғылым цитология маңызды орын алады. Цитология эксперименттік ғылым болып табылады, сондықтан дәріс уақытынан басқа, осы пән бойынша биологтарды дайындауға арналған оқу жоспарында зертханалық сабақтарға арналған уақыт бар.
Гистология негіздерімен цитология бойынша зертханалық практикалық курстың міндеттеріне мыналар жатады: лекциялық курстар мен оқулықтарда берілген теориялық принциптерді тексеру және бекіту; жануарлар мен өсімдіктердің жасушалары мен ұлпаларының құрылысымен таныстыру; қазіргі жарық микроскоптарымен танысу және жұмыс істеу; зерттеу дағдыларын меңгеру, алынған материалды сипаттау және жалпылай білу; уақытша және тұрақты дайындықтарды дайындау дағдыларын меңгеру, жалпы ғылыми, аспаптық және жалпы кәсіптік құзыреттерді қалыптастыру.
Зертханалық сабақтар жеке орындалады. Зертханалар заманауи жарық микроскоптарымен жабдықталуы керек: флуоресцентті AxioImager . D 1, жіберілетін және шағылысқан жарық AxioImager D 1; Аксиостарлы микроскоптар плюс өндірісі ZEIZZ ; шана микротомдары HM 430; Аналитикалық спектрофотометрлер Йена UniTest 3.0.0 нұсқасын тестілеу арқылы әртүрлі жасушалармен, ұлпалармен, жасушаның бөліну процестерімен, интерактивті техникалық оқыту құралдарымен, білімді тексеруге арналған компьютерлік технологиялармен танысу үшін SPEKOL 1300 .
Студент зертханалық практикалық сабақтарға қатысуға қауіпсіздік техникасы бойынша нұсқаулықты алғаннан кейін ғана жіберіледі. Негізгі қауіпсіздік шаралары зертханада көрінетін жерде көрсетілуі тиіс нұсқаулықтарда көрсетілген.
Микроскоппен жұмыс істеу ережелері
Микроскоп таза және зақымданудан қорғалған болуы керек. Қолданбаған кезде микроскопты қораппен жабу керек. Линзалар мен басқа оптикалық бөліктердің тазалығына ерекше назар аудару керек.
НАЗАР АУДАРЫҢЫЗ! Линзаның беттерін саусақтарыңызбен ұстамаңыз. Көрнекі қондырманың оптикалық бөліктерін шаңнан қорғау үшін окулярларды түтіктерде қалдыру немесе оларға қақпақтарды кию керек.
Окулярлардың, объективтердің және конденсатордың оптикалық беттерін ағаш таяқшаға оралған және оптикалық бөліктерді тазалауға арналған арнайы сұйықтықпен суланған таза мақтамен мұқият сүртуге болады. Объективті линзалардың ішкі беттері ластанса, линзаны тазалау үшін оптикалық шеберханаға жіберу керек.
НАЗАР АУДАРЫҢЫЗ! Линзаларды, окулярларды және конденсаторды өз бетіңізше бөлшектеуге тыйым салынады.
Микроскоппен жұмыс істеу кезіндегі ең маңызды қателерді қарастырайық, сонда жаңадан бастаған зерттеушілер оларды алғашқы қадамдардан бастап жасамауы үшін, осылайша микроскоптың мүмкіндіктерін барынша пайдалануға қол жеткізуге болады. Келесі әрекеттерді қате әрекеттер ретінде қарастырған жөн:
препараттың жарықтандыру принципін бұзатын ойыс айна мен конденсаторды бір мезгілде қолдану;
кескін сапасын нашарлататын NA = 0,2 - 0,4 төмен апертуралы NA = 1,2 - 1,4 жоғары апертуралы конденсаторларды пайдалану. Бұл қатені жою үшін алдымен конденсатордың жоғарғы линзасын алу (бұрау) арқылы оның сандық апертурасын азайту керек;
сырғытпаның қалыңдығын есепке алмай конденсаторды ерікті түрде түсіру артефактілердің пайда болуына әкелуі мүмкін;
микроскоптың көру аймағының жарықтандыруын конденсаторды төмендету және көтеру арқылы реттеу, себебі бұл кескін сапасына әсер етеді;
микроскоптың көру аймағын жарықтандыруды реттеу мақсатында конденсатор саңылауының диафрагмасының саңылауының өлшемін ерікті өзгерту;
микроскоптың көру аймағын жарықтандыруды реттеу үшін бейтарап жарық сүзгілері мен ұнтақталған шыныларды елемеу, бұл үлгіні қабылдауды нашарлатады және зерттеушінің көру қабілетіне теріс әсер етуі мүмкін;
конденсаторды объектіге фокустау мүмкін болмағандықтан , жоғары апертуралы объектілермен жарықтандыруды дұрыс орнатуға кедергі келтіретін қалың микроскоптың (қалыңдығы 1,2 мм-ден астам) слайдтарын пайдалану ;
сәйкес келмейтін қалыңдықтағы қақпақ шыныларын пайдалану (қалыңырақ немесе жіңішке 0,17 мм);
сандық саңылауы 1,2-ден асатын объектілермен жұмыс істегенде толық батыруды жасауды елемеу, бұл объективтің сандық саңылауын толық пайдалануға мүмкіндік бермейді.
Микроскоппен жұмыс істеу кезіндегі қауіпсіздік шаралары
Сəулелендіру құралы бар микроскоппен жұмыс істеу кезінде кернеуі 1000 В дейінгі электр қондырғыларын пайдалану кезінде қолданылатын шараларға сəйкес келетін қауіпсіздік шараларын сақтау қажет.
НАЗАР АУДАРЫҢЫЗ! Микроскоптың жарықтандырғышындағы шамды электр желісінен ажыратылған кезде ғана ауыстырыңыз. Шамның шамына немесе розетканың жанасу тақталарына теріңізді күйдірмеу үшін шам жанып кеткеннен кейін 15-20 минуттан кейін ауыстырылуы керек.
Микроскоптағы сақтандырғышты ауыстыру микроскопты қуат көзінен ажыратылған күйде орындау керек.
Сәулелендіру құралы бар микроскоппен жұмыс істегеннен кейін оны ток көзінен ажырату қажет.
Микроскопты розеткаға қосулы қараусыз қалдыру ұсынылмайды.
Микроскоптың құрылымы
Микроскоп - бұл кішкентай заттардың және олардың бөлшектерінің үлкейтілген кескінін қамтамасыз ететін оптикалық аспап. Әр түрлі маркалы жарық микроскоптарының конструкциялық айырмашылықтары болса да, олардың әрқайсысында оптикалық және механикалық компоненттер бар.
Микроскоптың құрылымы суретте анық көрсетілген. 1.
Күріш. 1. Primo Star микроскопының құрылымы: 1 - окуляр; 2 - бинокулярлы тіркеме; 3 - револьвер құрылғысы; 4 - линза; 5 - объектілер кестесі; 6 - конденсатор; 7 - жарық қарқындылығының индикаторы; 8 - микроскопты қосу және өшіру; 9 - қолдар
дөрекі фокус; 10 - жақсы фокустау тұтқасы; 11- объект сатысын жылжытуға арналған тұтқа
Оптикалық блок жарықтандыру жүйесінен тұрады (конденсатор және айна), объектілер мен окулярлар түтікпен бірге қатаң түрде бір-біріне қатысты орналасқан;
Микроскоптың механикалық блогы оптикалық бөліктер орнатылған стендтен, сахнадан және микроскопты фокустау механизмдерінен тұрады.
Микроскопты жарықтандыруды орнату қашықтан жарықтандырғышпен
Колер принципіне сәйкес, MBI-3 типті микроскопқа, сондай-ақ сыртқы сәулелендіргіші бар Mikmed сериясының микроскоптарына арналған жарықтандыруды орнату кезінде келесі ережелерді сақтау қажет :
микроскоп пен сəулелендіру құралы арасындағы қалыпты қашықтықты қамтамасыз ететін байланыстырушы жолақты пайдаланып микроскоптың алдына орнатыңыз . Олар оны трансформатор арқылы желіге қосады және корпусты айналдыра отырып, жарық ағынын тегіс бетке бағыттайды . микроскоптың айнасы.
2. Микроскоптың конденсаторын жоғарғы орынға көтеріп, оның диафрагмасын толығымен жабыңыз.
3. Сәулелендіру құралының ирис диафрагмасының саңылауының диаметрін 1 - 2 мм дейін азайтыңыз.
4. Шам ұстағышын ось бойымен жылжыту және микроскоптың айнасы мен шам корпусын бір мезгілде айналдыру арқылы жабық конденсатор диафрагмасында шам жіпінің суреті алынады . Бұл жағдайда бүршік шамдарының жіп кескінінің орталығы ирис диафрагмасының орталық бөлігінде болуы керек .
5. Конденсатор мен сəулелендіру құралының диафрагмасының саңылауын ашыңыз.
Реостат көмегімен шамның жіпінің жарықтығын азайтыңыз .
7. Зерттелетін үлгіні микроскоптың сатысына қойып, қажетті объективті жұмыс жағдайына қойыңыз және микроскоптың бинокулярлы қондырмасының окулярларына қарап, түтікшені жылжыту арқылы микроскоптың оптикасын объектіге бағыттаңыз.
8. Сәулелендіру құралының диафрагмасын толығымен дерлік жабыңыз және конденсаторды жылжыту арқылы микроскоптың көру аймағында сәулелендіруші диафрагманың анық кескінін алыңыз .
9. Айнаны айналдыра отырып, жарықтандырғыш диафрагмасының кескіні центрленеді , содан кейін диафрагманың кескіні микроскоптың көру өрісіне тең (немесе одан сәл үлкенірек) болатындай етіп ашылады.
10. Бір окулярды алып, микроскоп түтігіне қарап, конденсатор диафрагмасын оның шеттері объективтің артқы линзасының жарық шеңберінің фонында әрең байқалғанша кішірейтіңіз.
11. Окулярды орнына қойыңыз. Сәулелендіру құралының саңылауларына көк және аязды әйнек салынған . Содан кейін микроскоппен қарап, сəулелендіру құралының реостаты арқылы препараттың қажетті жарықтандыруы орнатылады.
12. Препарат зерттеледі.
Ескертулер:
1. Төмен диафрагмасы, үлкейткіші төмен объектілермен (10x және одан аз) жұмыс істегенде, жарықтандыруды реттемес бұрын ауыстырылатын төмен диафрагмасы бар конденсаторды орнатыңыз немесе конденсатор дизайны рұқсат етсе, оның жоғарғы объективін бөліңіз (бұраңыз).
2. 7-тармақты ең басында ерікті жарықтандыру арқылы жасауға болады, содан кейін Колер принципіне сәйкес түзетулер енгізуге болады.
Негізінде орнатылған сəулелендіру құралы бар микроскоптың жарықтандыруын орнату
Кірістірілген сәулелендіргіші бар микроскопты орнату тәртібі:
1. Мұздатылған әйнекті конденсатордың топсалы жақтауына орнатыңыз.
2. Төменірек үлкейту объектісі (10x немесе одан аз) сәуле жолына енгізіледі.
3. Ұнтақталған шыны мен жиналмалы конденсатор линзасын сәуле жолына салыңыз.
4. Тұтқаны пайдаланып конденсатормен кронштейнді тоқтағанша көтеріп, конденсатордың диафрагмасын толығымен ашыңыз.
5. Шамы бар розетканы топсаға тоқтағанша орнатыңыз.
6. Шамды оның жіпі көлденең болатындай етіп орнатыңыз.
7. Қуат көзін желіге қосып, шамды қосыңыз.
8. Сахнаға қойылған үлгінің анық бейнесін алу үшін микроскопты фокустаңыз.
9. Шам ұстағышын тұтқасынан ось бойымен жылжыту және оны топсамен бірге көлденең жазықтықта айналдыру арқылы микроскоптың көру аймағының ең жарқын және біркелкі жарықтандыруына қол жеткізіледі.
10. Басқа объективпен жұмыс істегенде, жарықтандыру параметрлерін қайталаңыз.
11. НАЗАР АУДАРЫҢЫЗ! 10x астам үлкейтетін объектілермен жұмыс істегенде, конденсатордың топсалы линзасын сәуле жолынан жылжыту керек.
Тұрақты және уақытша препараттарды дайындау
Тұрақты препараттар тамаша демонстрациялық материал болып табылады және көптеген жылдар бойы сақталуы мүмкін. Қалыңдығы 10-22 мкм жіңішке кесінділерде тозаң түтіктерінің енуін байқауға, хромосомалардың санын санауға, митоз бен мейозды, эмбрионның дамуын және т.б.
Боялған микроскопиялық препараттарды дайындау техникасы бірнеше кезеңді қамтиды. Объектілер күрделі өңдеуден өтеді.
1. Материалды бекітуге дайындау.
2. Материалды сумен немесе спиртпен фиксатормен бекіту (тиісінше 24 сағат және 12 сағатқа дейін).
3. Бекітілген материалды жуу.
4. Жуылған материалды толық сусыздандыру.
5. Материалды парафинді еріткіштермен (хлороформ, ксилол немесе бензол) сіңдіру.
6. Хлороформ (немесе ксилол) толығымен буланғанша материалды парафинмен сіңдіру.
7. Материалды парафинге құю (парафинге құйылған материалды өте ұзақ сақтауға болады).
8. Парафинмен сіңдірілген материалдан блоктарды өндіру.
9.Микротом көмегімен кесінділерді алу.
10. Бөлшектерді шыны сырғаларға жабыстыру.
o С температурада кептіру , кесінділері бар сырықтарды шаңнан және жоғары температурадан сақтай отырып, ұзақ уақыт сақтауға болады.
12. Ксилолмен кесінділерден парафинді алу.
13. Спиртпен кесінділерден ксилолды алу.
14. Секциялардан спиртті тазартылған сумен тазарту.
15.Препараттарды бояу (кейде ою және бояу) және дифференциациялау.
16. Боялған кесінділерді 96% және 100% спиртпен сусыздандыру.
17. Секциялардағы спиртті ксилолмен ауыстыру (бір уақытта кесінділер ксилолмен тазартылады).
18. Канадалық бальзамда кесінділерді орналастыру.
19. Дайындықтарды кептіру және тазалау, таңбалау.
20. Микроскоппен препараттарды зерттеу.
Сондай-ақ микроскопиялық технологияда өндірісі сусыздандырудың , аралық сұйықтыққа, парафинге салудың және микротомдық кесінділерді алудың күрделі процедурасын қажет етпейтін престелген препараттар кеңінен қолданылады. Сығылған препараттар митозды, кариотиптерді зерттеуде және жануарлар объектілерімен жұмыс істегенде қолданылады.
Көбінесе престелген препараттарды дайындау үшін әртүрлі бекіткіштер қолданылады. Бекітілген материал 70% спиртте жуылады. Ол материалды ұзақ уақыт сақтау үшін пайдаланылуы мүмкін, бірақ оны тоңазытқышта сақтау жақсы. Престелген препараттар өндірісінде тіндерді мацерациялау әдістері ерекше маңызға ие. Әдетте бұл үшін 45% сірке қышқылы, 40-45% пропион қышқылы, 1 Н қолданылады. тұз қышқылы, ферменттер.
Препараттар ацетокарминмен, Шифф реагентімен, нигрозинмен және басқа бояғыштармен боялады.
Микроскоптың ең маңызды сипаттамалары
Цитологиялық зерттеулерге арналған микроскопта 4-7 жоғары апертуралы апохроматикалық объективтердің жиынтығы болуы керек, оның ішінде сандық саңылауы бар 90x объективтері ( A ) 1,3 - 1,4; компенсациялық окулярлар жиынтығы; А- мен тікелей және қиғаш жарықтандыруға арналған апланатикалық конденсатор кемінде 1,4; штатив; линзалар мен қозғалатын препараттарды фокустау механизмдері; екі көзімен микроскоп арқылы бақылауға арналған бинокулярлық қондырма; жарық сүзгілерінің жиынтығы, сонымен қатар микроскоптың барлық оптикалық және механикалық бөліктерін дәл орталықтандыру. Сонымен қатар, микроскоп сыртқы (MBR-3 үшін OI-9m) немесе кірістірілген ( MBI-6 үшін; MBI-11; Mikmed-1 микроскоптары, 2-нұсқа) болуы мүмкін жарықтандырғышпен жабдықталуы керек. Жарықтандыру Кёлер принципіне сәйкес орнатылады , ол микроскоптың оптикалық құрамдас бөліктерінің саңылауларын барынша пайдалану үшін жағдайларды қамтамасыз етуден тұрады, яғни конденсатор мен объективтің сандық саңылаулары сәйкес келетін бақылау жағдайларын жасау.
Конденсатор екі немесе үш линзадан тұрады және 3,5-тен 100x дейін үлкейтетін линзалармен жұмыс істегенде объектідегі өрістерді жарықтандыруды қамтамасыз етеді . Микроскоптағы бақылау әдісіне байланысты конденсаторлардың бірнеше түрлері бар : ашық өріс конденсаторы, қараңғы өріс конденсаторы, фазалық контрастты бақылауға арналған конденсатор , қиғаш жарықтандыруға арналған саңылау диафрагмасы бар конденсатор және т.б .
Микроскоп айнасының екі беті бар - тегіс және қисық, ол конденсатордың астында орналасады және оған жарықты бағыттайды. Конденсатордан микроскоп сатысындағы үлгіге жарық шоғы түседі, содан кейін окулярға түседі.
Микроскоптың (түтіктің) визуалды бекітпесі әдетте бинокулярлы. Ол окуляр түтіктерінің осьтері арасындағы қашықтықты бақылаушының көзінің негізіне сәйкес 54-тен 54-ке дейінгі диапазонда орнатуға мүмкіндік береді.72 мм (2-суретте бұл қашықтықты өзгерту мүмкіндігі көрсеткілер арқылы көрсетілген). Сол жақ окуляр түтігінде 2 айналмалы сақина арқылы бақылаушының қателігін плюс 5-тен минус 5 диоптрге дейін өтеуге мүмкіндік беретін диоптиялық механизм бар . Окуляр түтіктері 45° көлбеу. Дүрбі қондырмасының үлкейтуі 1,5 есе.
Микроскоп жинағы монокулярды қамтуы мүмкін объектілерді бір көзбен қарауға мүмкіндік беретін қосымша . Бинокулярлы қондырмаға қарағанда оның 1x үлкейтуі бар . Мұндай қондырманы пайдаланған кезде полярлық сүзгілерді поляризацияланған жарықта зерттеу үшін пайдалануға болады. Линзалармен жұмыс істегенде, стандартты , вертикальдан өзгеше 160 ммтүтік ұзындығына арналған түзу тартылатын түтігі бар саптама. Тартылатын түтіктегі шкала көмегімен линза жобаланған түтіктің механикалық ұзындығы орнатылады.
Окулярлар көбінесе екі линзадан тұрады. Олар әртүрлі үлкейтуге ие болуы мүмкін және әртүрлі диаметрлердің көру өрістерінде бақылаулар жүргізуге мүмкіндік береді (1-кесте).
1-кесте
Кейбір окулярлардың сипаттамалары
Окуляр белгілері
Арттыру
Көру өрісінің диаметрі , мм
K5x
5
22
K7x
7
18
K10x
10
13
K 10x18
10
18
K15x
15
11
K20x
20
9
Окулярлар виртуалды бейнені жасайды және құрылымның бөлшектерін ашпай-ақ линзалар жасаған кескінді үлкейтеді. Окулярдағы белгілер оның үлкейтуін және кейбір жағдайларда көру өрісінің диаметрін анықтауға мүмкіндік береді.
Револьвер Құрылғы төрт линзаны орнатуды қамтамасыз етеді. Линзаларды ауыстыру револьвер құрылғысын конустық бетпен бекітілген орынға айналдыру арқылы жүзеге асырылады .
Линзалар негізгі функцияны орындайды: олардың линзалар жүйесі окулярға берілетін бастапқы кескінді құрайды . Мақсаттар түтіктің механикалық ұзындығына 160 мм, кескін жазықтығындағы сызықтық өріске 18 ммжәне жабын шынысының қалыңдығына арналған 0,17 мм.
Объективтегі оптикалық аберрациялардың толық немесе ішінара болмауы үлкен маңызға ие, бұл объектінің кескінінің бұлыңғырлығына, қисықтығына немесе бояуына байланысты бұрмалануына әкелуі мүмкін .
Микроскоп оптикасының аберрациялары әртүрлі болуы мүмкін . Сфералық аберрация - нүктенің кескіні шатасу шеңбері ретінде беріледі. Астигматизм - нүктенің бейнесі дисперсияның эллипсоидты шеңбері түрінде беріледі. Кома - кескіннің анықтығы ортасынан көру өрісінің шетіне дейін төмендейді. Көру аймағының қисаюы бір мезгілде көру аймағының ортасы мен шеттерін күрт көруге мүмкіндік бермейді . Бұрмалау - көру аймағының шеттерінде және ортасында әртүрлі сызықтық үлкейтуге байланысты объект пен оның кескіні арасындағы ұқсастықтың бұзылуы . Хроматикалық аберрациялар - үлкейту хроматизмі және позиция хроматизмі. Позиция хроматизмі - әртүрлі түстермен жасалған кескіндер оптикалық жүйеден әртүрлі қашықтықта орналасады . Үлкейту хроматизмі - кескіндер бір жазықтықта , бірақ өлшемдері әртүрлі . Жоғары сапалы апохроматикалық мақсаттар жоғары сандық апертурамен жасалады . Олар сфералық және хроматикалық аберрацияларды жояды . Апохроматикалық мақсаттар компенсациялық окулярлармен бірге қолданылады .
Кейбір линзалардың сипаттамалары кестеде келтірілген. 2.
Әрбір линза миллиметрде белгілі бір жұмыс қашықтығымен сипатталады. Линзаларды ұстаған кезде линзаларды зақымдамау үшін абай болу керек . Бұл жұмыс қашықтығы жоғары үлкейтетін линзалармен жұмыс істегенде өте маңызды (жабық әйнектің беті мен объективті линзаның арасындағы қашықтық) 0,10 - 0,12 мм.
Объектіге назар аудару түтік ұстағышын жылжыту арқылы жүзеге асырылады. Дөрекі фокустау түтік ұстағышының екі жағында орналасқан макро бұрандалы тұтқаларды айналдыру арқылы қол жеткізіледі. Микроскоптың дөрекі фокустау диапазоны 40 мм. Нәзік фокустау бұралған диск түрінде жасалған микробұранданың көмегімен жүзеге асырылады . Дискінің бір айналымы түтік ұстағышының қозғалысына сәйкес келеді 0,5 мм, ал дискінің тоқтаудан тоқтауға дейін айналуы кем емес 2 мм. Жұмысты бастамас бұрын, дәл фокустау тұтқасын шамамен ортаңғы күйге қою керек .
2-кесте
Линзаның кейбір сипаттамалары
Линзалар
Үлкейту, сандық апертура, батырудың болуы
Жұмыс қашықтығы, мм
Планахроматтар
9 x 0,20
13,13
10 x 0,20
13,13
Ахроматтар
8 x 0,20
8.53
20 x 0,40
1,70
40 x 0,65
0,41
85 x 1,00 (VI)*
0,18
90 x 1,25 (MI)**
0,10
Апохроматтар
10 x 0,30
4.80
20 x 0,65
0,67
90 x 1,3
0,12
Ескерту. * Суға батыру. ** Майға батыру
Препарат сахнаға қысқыштар арқылы бекітіледі немесе инемен ұсталады. Объектінің сатылары әртүрлі пішінді, айналмалы болуы мүмкін, объектінің координаталық қозғалысы бар үлгі ұстағыштармен жабдықталған, онда ұстағыштарды бұрандалардың көмегімен бір-біріне ( объектінің шынысының өлшеміне байланысты) қатысты жылжытуға болады (1-сурет).
Жарықтандыру құрылғылары сыртқы , үстіңгі немесе кіріктірілген болуы мүмкін . Сыртқы жарықтандырғыш болған жағдайда айна қолданылады. Оның екі шағылыстыратын беті бар: тегіс және ойыс. Ойыс беті табиғи жарықта қолданылады, кейбір жағдайларда ол объектінің жарықтандыруын арттыруға қызмет етуі мүмкін . OI-32M немесе OI-35 үстіңгі жарықтандырғыштары микроскоптың түбіндегі орнату розеткасына салынған. Микроскоптың негізіне орнатылған сəулелендіру құралына галогендік шам жəне фокусының жанында шам жіпі орналасқан коллекторлық линза кіреді.
Линзаның шешуші күші
Әрбір линза белгілі бір рұқсатпен, фокустық ұзындығымен (өріс тереңдігі) және үлкейтумен сипатталады.
Микроскоп объективінің ажырату қабілеті ( d ) - берілген объективпен көруге болатын бөлшектің ең кіші диаметрі немесе олар бөлек көрінетін екі сызық арасындағы ең аз қашықтық . Микроскоп объективінің ажырату қабілеті объектив пен конденсатордың сандық апертурасының ( A ) мәндеріне және жарық көзінің толқын ұзындығына (λ) байланысты. ). Микроскоптың оптикалық осіне параллель сәулелер шоғы үшін микроскоп объективінің ажырату қабілеті формуламен анықталады.
d = λ A
Қиғаш сәулелер үшін ажыратымдылық 2 есе жоғары:
d = λ 2 А ,
мұндағы λ - толқын ұзындығы, нм; A - линзаның сандық апертурасы.
Спектрдің көрінетін бөлігіндегі жарық көзінің сәулелерінің толқын ұзындығы күлгін сәулелер үшін 0,4 мкм (400 нм) қызыл сәулелер үшін 0,7 мкм (700 нм) дейін өзгеруі мүмкін. Демек, жарық көзінің сәулелерінің толқын ұзындығы неғұрлым қысқа болса және объективтің саңылауы неғұрлым үлкен болса , микроскоп объективінің ажырату қабілеті соғұрлым жоғары болады, яғни микроскоп арқылы біз неғұрлым нәзік құрылымдарды көре аламыз. Объектіні қиғаш сәулелермен жарықтандырғанда микроскоп объективінің ажырату қабілеті тікелей түскен сәулелермен жарықтандырылғанға қарағанда 2 есе жоғары болады. Препаратты көгілдір сәулелермен (λ = 0,47 мкм) жарықтандыру арқылы, яғни сәулелендіргіштегі көк сүзгіні пайдалану арқылы қарапайым ақ жарықпен жарықтандырылғанға қарағанда, майда құрылымдарды зерттеуге болады .
Мысалы: A бар линзалар үшін =1,4 ақ жарықпен жарықтандырылғанда (λ = 0,55 мкм), тікелей түсетін жарықпен көрінетін ең кішкентай бөлшектің диаметрі 0,39 мкм, қиғаш жарықпен - 0,20 мкм, көк жарықпен жарықтандыруда - сәйкесінше 0,34 және 0,17 мкм . Жарық микроскопының көмегімен алуға болатын максималды ажыратымдылық 0,20 - 0,35 мкм құрайды. Ажыратымдылықты ультракүлгін сәулені (толқын ұзындығы 0,26 - 0,28 мкм) пайдалану арқылы арттыруға болады , бұл 0,13 - 0,14 мкм ажыратымдылықты алуға мүмкіндік береді.
Линзаның сандық апертурасы
Линзаның сандық немесе сандық апертурасы (A) жарықты жинау қабілетін сипаттайды және формуламен анықталады.
A = n ∙ sinα ,
мұндағы n - объективтің алдыңғы линзасы мен жабын әйнегі арасындағы ортаның сыну көрсеткіші; α - линзаның кіру саңылауының жарты бұрышы (бір жағы оптикалық оське сәйкес келетін бұрыш, екіншісі линзаның белсенді саңылауының шекарасымен сәулелердің линзадан шығатын нүктесін қосатын сызық арқылы жасалады) (2-сурет).
Күріш. 2. Микроскоптың объективті саңылауының бұрышы: Ob - объективті; Kn - конденсатор; P - дайындық жазықтығы; F - фронтальды жазықтық; α - линзаның апертура бұрышы
Микроскоптың толық үлкейтуі
Объективтің үлкейтуі жақтауда көрсетілген, ал сандық апертура да сол жерде көрсетілген. Конденсаторларда да белгілі бір сандық апертура болады. Егер конденсатор апертурасы объективті саңылаудан кіші болса, онда объективтің мүмкіндіктері жұмыста толық пайдаланылмайды.
Микроскоптың жалпы үлкейтуі объективті үлкейтудің көбейтіндісі ретінде анықталады ( V туралы ) окулярды үлкейту бойынша ( V) Жарайды ):
V = V рев · V жарайды .
Егер объектив 90 есе, ал окуляр 15 есе үлкейтсе, онда жалпы үлкейту 1350 болады. Бұл мәннен жоғары үлкейтулер маңызды емес және пайдасыз деп аталады және бұл окуляр препараттың құрылымын ұлғайта алатындығы соншалықты, ол объективтегідей көру бұрышында көрінеді. Бұл өсу пайдалы деп аталады және ол 1000 А-ға тең. Есептеулер пайдалы өсу 1300-1450 еседен аспайтынын көрсетеді. Жоғары ұлғайту кескіндегі жаңа бөлшектерді ашпайды және оның жарықтандыруы азаяды.
Кескін өрісінің тереңдігі
Кескін өрісінің тереңдігі (фокус тереңдігі) - линзаның бір уақытта өзінен әр түрлі қашықтықта орналасқан нүктелердің анық кескіндерін шығару мүмкіндігі немесе препараттың бір уақытта күрт көрінетін тереңдігі. Бұл микроскоптың үлкейтуіне және объективті апертураға байланысты. Әрбір линза бір жазықтықта белгілі бір тереңдікте дайындықты көруге мүмкіндік береді . Жоғары ұлғайту кезінде линзаны әртүрлі жазықтықта кезекпен фокустау қажет . Төмен үлкейтулерде және кіші саңылауларда өріс тереңдігі жоғары үлкейтуге қарағанда үлкенірек болады. Бір көру жазықтығында объектінің бейнесін анық көру қажет болғанда, өрістің тереңдігі индикаторын фотомикрографияда ерекше ескеру керек . Ол формула бойынша анықталады:
T = (10007 A ∙ V )+(λ2 A 2 ) , мұндағы
А - апертура, V - микроскоптың үлкейтуі, λ - толқын ұзындығы.
Төмен үлкейтулерде және кіші саңылауларда өріс тереңдігі жоғары үлкейтулер мен үлкен саңылауларға қарағанда көбірек болады.
Микроскоптың сапасы оның үлкейтуімен емес, оның оптикалық құрылғыларының ажырату қабілетімен анықталады.
Құрғақ нысаналар жағдайында ( сұйық ортаны пайдаланбай - батыру) сыну көрсеткіші бірлікке тең (n = 1) және A 0,95.
Иммерсиондық жүйеде алдыңғы линза мен қаралатын объект арасындағы кеңістік ауадан жоғары сыну көрсеткіші бар сұйықтықпен толтырылады . Суға батыру мақсаттары үшін сандық саңылау үлгі мен объектив арасында орналасқан сұйықтықтың сыну көрсеткішіне байланысты болады . Сондықтан суға батыру мақсаттары үшін A 1,25-тен аз немесе оған тең (суда n = 1,33), ал майға батыру мақсаттары үшін A 1,4- тен аз немесе оған тең (балқарағай майында n = 1,515). 3-суретте майға батыру және құрғақ объектив пайдаланатын сәуле жолы көрсетілген .
Күріш. 3. Құрғақ (сол жақта) және майлы (оң жақта) заттарды пайдалану кезіндегі сәуле жолын салыстыру.
Бұл суреттен көрініп тұрғандай, құрғақ жүйеде сәулелердің бір бөлігі объективке жетпейді, өйткені олар қақпақ шынысынан шыққан кезде ауытқиды. Шыны бетіне шыққан жерінде 41 ° -тан (шектеу бұрышы) үлкен бұрыш құрайтын сәулелер толығымен шағылысады. Шыны мен су үшін шектеу бұрышы 41°, балқарағай майы мен шыны үшін олардың сыну көрсеткіштерінің теңдігіне байланысты ол жоқ . Кескін сапасын жақсарту үшін толық батыру жиі пайдаланылады, онда батыру сұйықтығы конденсаторға да қолданылады.
Суға батыру объектілерімен жұмыс істегенде, түтікті түсірген кезде объективке зақым келтірмеу үшін абай болу керек.
препараттың жабын шынысының бетіне тамшы түрінде жағылады және түтікшені түсіру арқылы линзаны батыру тамшысына батырады. Батыру сұйықтығын объектив линзасының бетіне немесе тамшылатып үлгіге де, объективке де қолдануға болады. Негізгі талап - ауа көпіршіктері жоқ батыру жасау.
Сәулелендіру құралының коллекторының, конденсатордың және объективтің саңылаулары сәйкес болғанда ғана микроскоп оптикасының ажырату қабілеті толығымен пайдаланылады.
Жаттығу. Т және d толқын ұзындығына тәуелділігін анықтаңыз
Биологиялық микроскоптың мақсаттарымен, окулярларымен және конденсаторымен танысу. Пияз қабығының уақытша препаратын дайындаңыз және оны түрлі-түсті сүзгілердің көмегімен әртүрлі толқын ұзындығында тексеріңіз: қызыл, көк және жасыл. Дайындаманы үш толқын ұзындығында сызыңыз. Қандай толқын ұзындығында кішірек бөлшектер көрінетінін анықтаңыз. Ажыратымдылық пен өріс тереңдігін есептеңіз. Нәтижелер 3-кестеге енгізілген.
3-кесте
Ажыратымдылық пен өріс тереңдігінің жарықтың толқын ұзындығына тәуелділігі
Көрсеткіш
Арттыру
λ=440 нм
λ=570 нм
λ= 68 0 нм
d
8x
d
40x
Т
8x
Т
40x
d және T толқын ұзындығына ( λ ) тәуелділігі туралы қорытынды жасаңыз .
Өсімдіктер мен жануарлар жасушаларының құрылысының жалпы жоспары
Жасуша - Жер планетасында кездесетін барлық тірі тіршілік иелерінің құрылымы мен қызметінің негізгі өздігінен көбейетін бірлігі. Тірі организмдердің арасында жасуша ұйымының екі түрі бар. Құрылымның қарапайым түріне бактериялар мен көк-жасыл балдырлардың жасушалары жатады, олар әдетте прокариот деп аталады, ал ұйымдасқан түріне төменгі сатыдағы өсімдіктерден адамға дейін эукариоттардың барлық басқа тірі ағзалардың жасушалары жатады. Суретте. 4, 5 про- және эукариоттық жасушалардың құрылымының диаграммасын көрсетеді.
Күріш. 4. Прокариоттық жасушаның құрама диаграммасы: 1 - жасуша қабырғасы; 2 - плазмалық мембрана; 3 - ДНҚ нуклеоиды; 4 - цитоплазмалық полирибосомалар; 5 - мезосома; 6 - пластинкалы құрылымдар; 7 - плазмалық мембраналық инвагинациялар; 8 - хроматофорлардың шоғырлары; 9 - қосындылары бар вакуольдер; 10 - бактериялық жгутика; 11 - пластинкалы тилакоидтар
Прокариот жасушаларының эукариоттық жасушалардан айырмашылығы қарапайым (қарапайым) құрылымы. Прокариоттық жасушаның түзілген ядросы жоқ, оның функцияларын нуклеоид атқарады . Прокариот жасушасында центриолдар , сондай-ақ бір мембраналық және қос мембраналық органеллалар болмайды - олардың функцияларын мезосомалар атқарады . Рибосомалар, қозғалыс органеллалары және прокариот жасушаларының мембраналары белгілі бір құрылымға ие.
Өсімдіктердің органикалық заттардың көзі ретіндегі ерекше рөлін ескере отырып, эукариоттық жасушаларды зерттеуді жасыл өсімдіктің жасушасына қараудан бастаған жөн. Бұл жағдайда негізгі назарды тірі жасушаның құрылымына аудару керек , оны зерттеу үшін жарық микроскопы қолданылады.
жасушаның тірі бөлігін (протопласт) қоршап тұрған тығыз , әдетте көмірсутекті мембрана, пластидтер, олардың ішінде ең маңыздылары фотосинтез процесін жүзеге асыратын хлоропласттар және жоғары гидратталған жасуша шырынымен толтырылған үлкен вакуольдер болады. Дегенмен, аталған белгілер әмбебап емес. Сонымен, кейбір өсімдік жасушаларында, мысалы, балдырлардың гаметалары мен зооспораларында , олар сыртқы ортадан жануарлар ағзаларының жасушасын қоршап тұрған мембранамен бірдей плазмалық мембранамен бөлінген ; Жасыл пластидтер органикалық заттарды синтездеу үшін күн сәулесінің энергиясын пайдаланатын өсімдіктерге ғана тән . Дайын органикалық заттарды (саңырауқұлақтар) пайдаланатын гетеротрофты организмдерде олар болмайды .
Вакуольдер өсуді аяқтаған ересек жасушаларға тән. Тамырдың ұшында және өркеннің жоғарғы жағында орналасқан білім беру ұлпаларының (меристемалардың) жасушаларында , сондай-ақ тұқым жасушаларында әдетте вакуольдер болмайды немесе олар өте кішкентай.
Сонымен, өсімдік жасушасының құрылымының ерекшелігі оның тіршілік әрекетінің сипатымен, жастық жағдайымен және таксономиялық ерекшеліктерімен анықталады .
Күріш. 5. Эукариоттық жасуша құрылымының құрама диаграммасы: а - жануар текті; b - өсімдік текті : 1 - хроматинді ядро, 2 - плазмалық мембрана, 3 - жасуша мембранасы, 4 - плазмодесма, 5 - түйіршікті эндоплазмалық тор, 6 - агранулярлы эндоплазмалық ретикулум, 7 - пиноцитоздық вакуоль түзетін, 8 - 9 - 1-10 майлы кешен, центриоль және микротүтікшелер, 12 - митохондриялар, 13 - полирибосомалар, 14 - вакуольдер, 15 - хлоропласттар
Төменгі сатыдағы өсімдіктерде жасуша көбінесе біртұтас, тәуелсіз тірі ағзаны білдіреді. Мұндай біржасушалы өсімдіктерге жасыл балдырлар (хлорелла, хламидомонас ) және кейбір саңырауқұлақтар (ашытқы) жатады. Көпжасушалы өсімдіктердің денесі әртүрлі мөлшердегі, пішіндегі, ішкі құрылымы әртүрлі және әртүрлі қызметтерді атқаратын көптеген жасушалар кешенінен тұрады . Даму процесінде өзінің тірі мазмұнын жоғалтқан жасушалар суды өткізуге қатыса алады, олардың кейбіреулері өсімдікті механикалық әсерлерден, температураның ауытқуынан және т.б.
Сондықтан ботаникада жасуша термині цитоплазмаға, ядроға, пластидтерге, митохондрияларға және басқа органоидтарға дифференциацияланған протопласты бар құрылымдық бірліктерге ғана емес, сонымен қатар протопластар өлгеннен кейін қалған мембраналар үшін де қолданылады.
Плазмалық мембрана немесе плазмалемма - жасушаны сыртынан шектейтін беткей перифериялық құрылым. Ол мембрана арқылы екі бағытта төмен және жоғары молекулалы заттардың еркін ағынын шектейтін тосқауыл қызметін атқарады. Ол сондай-ақ әртүрлі химиялық заттарды қабылдайтын және осы заттардың жасушаға тасымалдануын таңдамалы түрде реттейтін құрылым қызметін атқарады.
Канадалық элодеяның дамушы жапырақтарының жасушаларының құрылымы ( Elodea canadensis Michx .)
Элодея - жіңішке сабағында ұзын сопақша жапырақтары бар тұщы су өсімдігі. Құрылымы әлі қалыптаспаған ең жас жасушалар өсу конусының астындағы өркеннің жоғарғы жағында орналасқан кішкентай жапырақ рудименттерін құрайды . Препаратты дайындау үшін өсіндінің үстіңгі жағын ( ұзындығынан ұзағырақ емес 1 см) үлкен су тамшысындағы шыны слайдқа салады және үлкен жапырақтарды микроскоптың немесе үлкейткіш әйнек астында екі кескіш инелермен мұқият алып тастайды. Ең кішкентай қабыршақ тәрізді жапырақтары, өркеннің жоғарғы жағында жиналып, сабағынан үзіліп, түзетіліп, әйнекпен жабылып, микроскоптың төмен, содан кейін жоғары үлкейтуімен зерттеледі. Жасушалардың мөлшері мен пішіні дамып келе жатқан жапырақ тақтасының мөлшеріне байланысты . Сабақтан бөлінетін ең жас жапырақ примордиялары контурлары айтарлықтай өзгеретін жасушалардан тұрады. Көптеген жасушалар көпбұрышты, кейбіреулері тар және ұзартылған. Көбінесе біз бөліну нәтижесінде жаңадан пайда болған жасушаларды кездестіреміз . Жасуша мембраналары өте жұқа және тығыз жабылған. Жасушалар үлкен, айқын көрінетін ядроны қоршап тұрған тығыз цитоплазмаға толы . Цитоплазмада да орналасқан ұсақ денелер хлоропластар болып табылады (6 а, б- сурет ).
Күріш. 6. Элодея жапырағы жасушаларының құрылысы: а, б - жасуша дамуының кезекті кезеңдері; 1 - ядролар; 2 - пластидтер; 3 - вакуольдер
Төменгі жапырақтарда жасушалардың мөлшері ұлғайған сайын пластидтердің саны және олардың мөлшері ұлғаяды, сулы жасуша шырыны бар вакуольдердің пайда болуына байланысты жасушалардың мазмұны жеңіл және мөлдір болады ; ядролар барлық жасушаларда көрінбейді. Жас жасушаларда бірнеше ұсақ вакуольдар болуы мүмкін, олар жасуша өсіп, дифференциацияланғанда бір-бірімен қосылып, бір немесе бірнеше ірі вакуольдер түзіп, жалпы жасуша көлемінің 90%-ын алады. Орталық вакуоль цитоплазмадан қалыңдығы бойынша плазмалық мембранаға ұқсас жалғыз мембранамен бөлінген. Бұл мембрана тонопласт деп аталады. Вакуольдер әртүрлі қызмет атқарады. Негізгі функциялардың бірі - жасушалардың тургорлық қысымын сақтау. Вакуоль шырынында еріген молекулалар оның осмостық концентрациясын анықтайды. Вакуольдерді клеткалар қойма резервуары ретінде де пайдалана алады, мұнда тек резервтік заттар ғана емес, сонымен бірге экскрецияға арналған метаболиттер де жиналады. Ядроларды көру үшін жапырақтарды калий йодидінің сулы ерітіндісіндегі йод ерітіндісімен өңдеуге болады (бұл реагент ядроларды қоңырға айналдырады );
Жаттығу. Жапырақ рудиментінің уақытша препаратын дайындаңыз. Жас және дамып келе жатқан жасушаны қарап шығыңыз және сызыңыз. Сызбаларға тақырыпшалар жасаңыз. Жас және дамып келе жатқан жасушаның айырмашылығын сипаттаңыз.
Түзілген элодея жапырағы жасушаларының құрылысы
Сабағынан үзілген жапырақты астыңғы жағымен су тамшысына салып шыны әйнекпен жауып, микроскоптың төмен және жоғары үлкейтуінде зерттейді. Элодея жапырағы микроскоптың көру аймағынан едәуір үлкен, сондықтан аз ұлғайту кезінде жұмыс істегенде де препаратты жылжыту керек. Жапырақ екі қабат жасушалардан тұрады, жоғарғы қабаттың жасушалары бақылаушыға қараған, төменгі қабаттың жасушаларынан үлкенірек. Төмен үлкейту кезінде де жапырақ тақтасының біркелкі емес түсі байқалады, жапырақтың ортасында орналасқан, жеңілірек жасушалардан тұратын ортаңғы тамыр бар. Жапырақтың шеткі жасушалары дерлік мөлдір. Кейбір жасушалар ұштары жапырақтың ұшына қараған үшкір тістер түрінде сыртқа шығады (7а-сурет). Жапырақ тақтасының түбіндегі жасушаларда тістер болмайды (7б-сурет). Тістердің сыртқы қабырғалары өте қалың, қызыл-қоңыр түсті.
Жапырақтың бойында ортаңғы тамырға параллель әртүрлі ұзындықтағы тар қара жолақтар бар. Олар жасушааралық кеңістіктер жүйесін білдіреді - ауамен толтырылған жапырақтың жоғарғы және төменгі жақтарының жасушалары арасындағы кеңістіктер. Микроскоппен қарағанда, ауа (n=1) мен жасуша мембраналары (n=1,5) арасындағы жарықтың сыну көрсеткіштерінің үлкен айырмашылығына байланысты жасушааралық кеңістіктер қараңғы болып көрінеді. Сыну көрсеткіші мембраналардың сыну көрсеткішіне жақын су (n=1,33) зақымдалған аймақтар арқылы жасушааралық кеңістіктерге еніп, олардан ауаны ығыстырса, жасушааралық кеңістіктер көрінбейтін болады.
Күріш. 7. Түзілген элодея жапырағының жасушалары: 1 - ядро; 2 - хлоропласттар; 3 - вакуоль; 4, 8 - цитоплазма; 5 - жапырақ тіс; 6 - жасуша мембранасы; 7 - жасушааралық кеңістік; 9 - ортаңғы тамырдың жасушалары
Жасушалардың бір-бірімен тығыз байланысқан жұқа мөлдір қабырғалары бар. Жасушалардың мөлшері, пішіні және олардың құрамындағы жасыл пластидтердің (хлоропластар) саны әртүрлі.
Ортаңғы тамырдың жасушалары тар, жапырақтың ұзындығы бойынша қатты созылған, оларда пластидтер аз, олардың көпшілігі бүйір қабырғаларында орналасқан бұл пластидтердің контурлары.
Орта жолға іргелес ұяшықтар кеңірек, төртбұрышты, көпбұрышты немесе ұзынша. Жасушаларда көптеген пластидтер болады, олар дөңгелек, бүйір проекциясында олар сопақ немесе эллипс тәрізді. Жасушадағы ядро, цитоплазма және вакуоль көрінбейді, өйткені бұл құрылымдардың барлығының жарықтың сыну көрсеткіштері шамамен бірдей. Жапырақ калий йодидінің сулы ерітіндісіндегі йод ерітіндісімен өңделсе, ядро көрінетін болады, бірақ бұл реагент жасушаны өлтіретінін есте ұстаған жөн.
Цитоплазманың болуын және жасуша вакуолының шартты шекараларын тек қана пластидтердің қозғалуы арқылы бағалауға болады, ол жасуша қабырғалары бойымен сағат тілімен немесе сағат тіліне қарсы бағытта жүреді, бұл айналмалы немесе айналмалы қозғалысқа тән. Мұндай жасушаларда үлкен орталық вакуольді қоршап тұрған цитоплазма париетальды позицияны алады. Жаңа ғана үзілген жапырақтың жасушаларында цитоплазма әдетте қозғалмайды немесе өте баяу қозғалады, бірақ бірнеше минуттан кейін қозғалыс алдымен ортаңғы тамырдың жасушаларында, содан кейін оған жақын орналасқан жасушаларда анық көрінеді.
Жапырақ тақтасының шетінде орналасқан жасушалар ұзартылған, бірақ ортаңғы тамырдың жасушаларынан айтарлықтай қысқа. Олардың сыртқы қабырғалары ішкі қабырғаларына қарағанда қалыңырақ. Жасушалар құрамындағы аздаған пластидтер басқа жасушаларға қарағанда әлдеқайда аз; Жақынырақ тексергенде, шеткі жасушаларда, соның ішінде жеңіл, ұсақ түйіршікті денелер болып табылатын тістерде ядроларды көруге болады.
Жапырақтың жалпы құрылымымен танысу үшін жоғары үлкейту кезінде оны құрайтын жасушалардың ерекшеліктерін толығырақ қарастыру керек.
Жаттығу. Қалыптасқан элодея жапырағының уақытша препаратын дайындаңыз. Дайындықты қарап шығыңыз, сызбасын сызыңыз және сипаттаңыз. Сызбаларға тақырыпшалар жасаңыз.
Валлиснерияның жапырақ терісінің жасушалары ( Vallisneria спираль L. )
Препаратты дайындау үшін скальпель немесе кескіш инемен валлиснерияның сызықты жапырағының кез келген жағындағы теріні кесіп алады , оның бір бөлігін жапырақ тақтасынан жұлып алып, шыны слайдқа су тамшысына салып , жабын шынымен мұқият жауып, микроскоптың төмен және жоғары үлкейтуінде зерттейді (8-сурет).
Терінің жасушалары жапырақтың ұзындығы бойынша ұзартылған немесе төртбұрышты немесе көпбұрышты контурлары бар. Жасуша қабықшалары жұқа, мөлдір және бір-бірімен тығыз орналасқан. Жасушаларда көптеген жасыл денелер , хлоропластар немесе хлорофилл түйіршіктері көрінеді. Хлоропласт екі беті дөңес линза тәрізді , оның алдыңғы жағы әрқашан жасуша қабырғасына қараған.
Күріш. 8. Валлиснерия жапырағының қабығы: 1 - жасуша қабығы; 2 - хлоропласттар; 3 - өзек; 4 - цитоплазманың қозғалыс бағыттары; 5 - цитоплазма
жасуша қабырғалары бойымен қозғалатынын көруге болады . Бұл цитоплазманың орталық вакуоль айналасында қозғалуы нәтижесінде пайда ... жалғасы
Сіз бұл жұмысты біздің қосымшамыз арқылы толығымен тегін көре аласыз.
Федералдық мемлекеттік білім беру мекемесі
жоғары кәсіби білім
Сібір федералды университеті
Авторлар
Г олаванова Тамара Ивановна
Иванова Анна Николаевна
Горбанева Тамара Борисовна
Гистология негіздерімен цитология
Зертханалық тәжірибелік сабақ
Красноярск
2013
Аннотация
Мақалада биологиялық саланың барлық мамандықтарының студенттеріне оқытылатын Гистология негіздерімен цитология жалпы курсы бойынша зертханалық тәжірибелік сабақтарға арналған әдістемелік нұсқаулар берілген. Әдістемелік нұсқаулар Гистология негіздерімен цитология курсының бағдарламасына сәйкес құрастырылған және оның зертханалық практикалық сабақтарын өткізуге арналған негізгі оқу-әдістемелік құрал болып табылады. Практикалық курстың міндеттеріне дәрістерде алған теориялық білімдерін бекіту, микроскоппен зерттеу және жануарлар мен өсімдік тектес жасушалар мен ұлпалардың суретін салу, микроскопиялық препараттарды өз бетінше жасау дағдыларын меңгеру кіреді.
Кіріспе 5
Микроскоппен жұмыс істеу ережелері 5
Микроскоппен жұмыс істеу кезіндегі қауіпсіздік шаралары 7
Микроскоп құрылғысы 7
Сыртқы сәулелендіру құралымен микроскоптың жарықтандыруын орнату 8
Негізінде орнатылған сəулелендіру құралы бар микроскоптың жарықтандыруын орнату 10
Тұрақты және уақытша препараттарды дайындау 10
Микроскоптың негізгі ерекшеліктері 12
Объектив ажыратымдылығы 16
Линзаның сандық апертурасы 17
Микроскоптың жалпы үлкейтуі 18
Кескіннің өріс тереңдігі 18
Өсімдіктер мен жануарлар жасушаларының құрылысының жалпы жоспары 21
Канадалық элодеяның дамушы жапырақтарының жасушаларының құрылымы ( Elodea canadensis Michx .) 24
Элодеяның түзілген жапырағы жасушаларының құрылысы 26
Валлиснерияның жапырақ терісінің жасушалары ( Vallisneria спираль L. ) 28
29 терісінің жасушаларында плазмолиз.
Эндоцитоз 31
Адамның ауыз қуысының жалпақ эпителий жасушалары 31
Жасушааралық байланыс 32
Құрма тұқымдарының сақтау ұлпасының жасушалық мембранасындағы плазмодесмата ( Diospyros Каки Түймешік .) 34
Эндоплазмалық ретикулум 35
Рибосомалар 36
Гольджи аппараты 38
Лизосомалар 39
Пероксисомалар 40
Элодея жапырақ жасушаларында ассимиляциялық крахмалды анықтау canadensis Майкл .) 44
Хромопласттың ультрақұрылымдық ұйымы 45
Сәбіздің піскен жемістері мен тамырларының перикарп жасушаларында хромопластар 46
Лейкопласттың ультрақұрылымдық ұйымдасуы 47
Tradescantia ) жапырақ терісінің жасушаларындағы лейкопластар Вирджиния L .) 48
Амилопластар 49
Интерфазалық ядролардың ультрақұрылымы 49
Ядролық мембрананың ультрақұрылымы 51
Өсімдік жасушаларының ядролары. Пияз тамыры 52
Пияз тамыр жасушаларындағы митоз 57
Жануарлар жасушасындағы митоз 59
Эпителий жасушаларының амитозы 60
Жасушаның өлу жолдары 62
Эпителий ұлпалары 62
Бүйрек өзекшелерінің призмалық эпителий жасушалары 64
Тіссіз мантияның кірпікшелі эпителий жасушалары 65
Псевдостратификацияланған қарапайым эпителий 66
Көп қабатты эпителий 67
Несепағардың өтпелі эпителийі 68
Асқазан түбі бездерінің париетальды жасушалары 69
Дәнекер тіндер 72
Егеуқұйрықтың борпылдақ дәнекер тіні 75
Төбешік терісінің пигмент жасушалары 77
Майлы тін 78
Тығыз дәнекер ұлпа 79
Қоян қабырғасының гиалинді шеміршегі. 80
Омыртқа аралық дискінің талшықты шеміршегі 81
Эластикалық байлам. Бойлық қима 81
Тығыз коллагенді дәнекер тін. Сіңір, көлденең қима. 82
Сүйек тіні. Жабық жасушалары 84
85 қимадағы адамның жіліншік сүйегі
Дәнекер тіннен сүйектің дамуы. Ұрық шошқаның төменгі жақ сүйегі 86
Шеміршек орнында сүйектің дамуы. Шошқа эмбрионының түтік тәрізді сүйегі 87
Бақаның қызыл қан жасушалары 88
Адам қанының жағындысы 89
Бұлшық ет тіні. Жүйке ұлпасы 90
Жолақты бұлшықет тіні 93
Тегіс бұлшықет тіндері 94
Жүрек бұлшықетінің ұлпасы 95
Жылқының көз торының жүйке жасушалары 96
Қозғалтқыш нейрондар. Жұлын 97
Қозғалтқыш нейрондардағы тигроид 99
Мидың нейрондарындағы синапстар 100
Миелинді жүйке талшықтары 101
Библиографиялық тізім 103
105- қосымша
Қауіпсіздік ережелері 105
Жұмыстарды жобалау ережелері 107
Цитогенетикалық және цитембриологиялық терминдердің қысқаша сөздігі 108
Кіріспе
Биология мамандарын даярлауда жалпы биологиялық пәндердің ішінде жасушаның құрылысы мен қызметі туралы ғылым цитология маңызды орын алады. Цитология эксперименттік ғылым болып табылады, сондықтан дәріс уақытынан басқа, осы пән бойынша биологтарды дайындауға арналған оқу жоспарында зертханалық сабақтарға арналған уақыт бар.
Гистология негіздерімен цитология бойынша зертханалық практикалық курстың міндеттеріне мыналар жатады: лекциялық курстар мен оқулықтарда берілген теориялық принциптерді тексеру және бекіту; жануарлар мен өсімдіктердің жасушалары мен ұлпаларының құрылысымен таныстыру; қазіргі жарық микроскоптарымен танысу және жұмыс істеу; зерттеу дағдыларын меңгеру, алынған материалды сипаттау және жалпылай білу; уақытша және тұрақты дайындықтарды дайындау дағдыларын меңгеру, жалпы ғылыми, аспаптық және жалпы кәсіптік құзыреттерді қалыптастыру.
Зертханалық сабақтар жеке орындалады. Зертханалар заманауи жарық микроскоптарымен жабдықталуы керек: флуоресцентті AxioImager . D 1, жіберілетін және шағылысқан жарық AxioImager D 1; Аксиостарлы микроскоптар плюс өндірісі ZEIZZ ; шана микротомдары HM 430; Аналитикалық спектрофотометрлер Йена UniTest 3.0.0 нұсқасын тестілеу арқылы әртүрлі жасушалармен, ұлпалармен, жасушаның бөліну процестерімен, интерактивті техникалық оқыту құралдарымен, білімді тексеруге арналған компьютерлік технологиялармен танысу үшін SPEKOL 1300 .
Студент зертханалық практикалық сабақтарға қатысуға қауіпсіздік техникасы бойынша нұсқаулықты алғаннан кейін ғана жіберіледі. Негізгі қауіпсіздік шаралары зертханада көрінетін жерде көрсетілуі тиіс нұсқаулықтарда көрсетілген.
Микроскоппен жұмыс істеу ережелері
Микроскоп таза және зақымданудан қорғалған болуы керек. Қолданбаған кезде микроскопты қораппен жабу керек. Линзалар мен басқа оптикалық бөліктердің тазалығына ерекше назар аудару керек.
НАЗАР АУДАРЫҢЫЗ! Линзаның беттерін саусақтарыңызбен ұстамаңыз. Көрнекі қондырманың оптикалық бөліктерін шаңнан қорғау үшін окулярларды түтіктерде қалдыру немесе оларға қақпақтарды кию керек.
Окулярлардың, объективтердің және конденсатордың оптикалық беттерін ағаш таяқшаға оралған және оптикалық бөліктерді тазалауға арналған арнайы сұйықтықпен суланған таза мақтамен мұқият сүртуге болады. Объективті линзалардың ішкі беттері ластанса, линзаны тазалау үшін оптикалық шеберханаға жіберу керек.
НАЗАР АУДАРЫҢЫЗ! Линзаларды, окулярларды және конденсаторды өз бетіңізше бөлшектеуге тыйым салынады.
Микроскоппен жұмыс істеу кезіндегі ең маңызды қателерді қарастырайық, сонда жаңадан бастаған зерттеушілер оларды алғашқы қадамдардан бастап жасамауы үшін, осылайша микроскоптың мүмкіндіктерін барынша пайдалануға қол жеткізуге болады. Келесі әрекеттерді қате әрекеттер ретінде қарастырған жөн:
препараттың жарықтандыру принципін бұзатын ойыс айна мен конденсаторды бір мезгілде қолдану;
кескін сапасын нашарлататын NA = 0,2 - 0,4 төмен апертуралы NA = 1,2 - 1,4 жоғары апертуралы конденсаторларды пайдалану. Бұл қатені жою үшін алдымен конденсатордың жоғарғы линзасын алу (бұрау) арқылы оның сандық апертурасын азайту керек;
сырғытпаның қалыңдығын есепке алмай конденсаторды ерікті түрде түсіру артефактілердің пайда болуына әкелуі мүмкін;
микроскоптың көру аймағының жарықтандыруын конденсаторды төмендету және көтеру арқылы реттеу, себебі бұл кескін сапасына әсер етеді;
микроскоптың көру аймағын жарықтандыруды реттеу мақсатында конденсатор саңылауының диафрагмасының саңылауының өлшемін ерікті өзгерту;
микроскоптың көру аймағын жарықтандыруды реттеу үшін бейтарап жарық сүзгілері мен ұнтақталған шыныларды елемеу, бұл үлгіні қабылдауды нашарлатады және зерттеушінің көру қабілетіне теріс әсер етуі мүмкін;
конденсаторды объектіге фокустау мүмкін болмағандықтан , жоғары апертуралы объектілермен жарықтандыруды дұрыс орнатуға кедергі келтіретін қалың микроскоптың (қалыңдығы 1,2 мм-ден астам) слайдтарын пайдалану ;
сәйкес келмейтін қалыңдықтағы қақпақ шыныларын пайдалану (қалыңырақ немесе жіңішке 0,17 мм);
сандық саңылауы 1,2-ден асатын объектілермен жұмыс істегенде толық батыруды жасауды елемеу, бұл объективтің сандық саңылауын толық пайдалануға мүмкіндік бермейді.
Микроскоппен жұмыс істеу кезіндегі қауіпсіздік шаралары
Сəулелендіру құралы бар микроскоппен жұмыс істеу кезінде кернеуі 1000 В дейінгі электр қондырғыларын пайдалану кезінде қолданылатын шараларға сəйкес келетін қауіпсіздік шараларын сақтау қажет.
НАЗАР АУДАРЫҢЫЗ! Микроскоптың жарықтандырғышындағы шамды электр желісінен ажыратылған кезде ғана ауыстырыңыз. Шамның шамына немесе розетканың жанасу тақталарына теріңізді күйдірмеу үшін шам жанып кеткеннен кейін 15-20 минуттан кейін ауыстырылуы керек.
Микроскоптағы сақтандырғышты ауыстыру микроскопты қуат көзінен ажыратылған күйде орындау керек.
Сәулелендіру құралы бар микроскоппен жұмыс істегеннен кейін оны ток көзінен ажырату қажет.
Микроскопты розеткаға қосулы қараусыз қалдыру ұсынылмайды.
Микроскоптың құрылымы
Микроскоп - бұл кішкентай заттардың және олардың бөлшектерінің үлкейтілген кескінін қамтамасыз ететін оптикалық аспап. Әр түрлі маркалы жарық микроскоптарының конструкциялық айырмашылықтары болса да, олардың әрқайсысында оптикалық және механикалық компоненттер бар.
Микроскоптың құрылымы суретте анық көрсетілген. 1.
Күріш. 1. Primo Star микроскопының құрылымы: 1 - окуляр; 2 - бинокулярлы тіркеме; 3 - револьвер құрылғысы; 4 - линза; 5 - объектілер кестесі; 6 - конденсатор; 7 - жарық қарқындылығының индикаторы; 8 - микроскопты қосу және өшіру; 9 - қолдар
дөрекі фокус; 10 - жақсы фокустау тұтқасы; 11- объект сатысын жылжытуға арналған тұтқа
Оптикалық блок жарықтандыру жүйесінен тұрады (конденсатор және айна), объектілер мен окулярлар түтікпен бірге қатаң түрде бір-біріне қатысты орналасқан;
Микроскоптың механикалық блогы оптикалық бөліктер орнатылған стендтен, сахнадан және микроскопты фокустау механизмдерінен тұрады.
Микроскопты жарықтандыруды орнату қашықтан жарықтандырғышпен
Колер принципіне сәйкес, MBI-3 типті микроскопқа, сондай-ақ сыртқы сәулелендіргіші бар Mikmed сериясының микроскоптарына арналған жарықтандыруды орнату кезінде келесі ережелерді сақтау қажет :
микроскоп пен сəулелендіру құралы арасындағы қалыпты қашықтықты қамтамасыз ететін байланыстырушы жолақты пайдаланып микроскоптың алдына орнатыңыз . Олар оны трансформатор арқылы желіге қосады және корпусты айналдыра отырып, жарық ағынын тегіс бетке бағыттайды . микроскоптың айнасы.
2. Микроскоптың конденсаторын жоғарғы орынға көтеріп, оның диафрагмасын толығымен жабыңыз.
3. Сәулелендіру құралының ирис диафрагмасының саңылауының диаметрін 1 - 2 мм дейін азайтыңыз.
4. Шам ұстағышын ось бойымен жылжыту және микроскоптың айнасы мен шам корпусын бір мезгілде айналдыру арқылы жабық конденсатор диафрагмасында шам жіпінің суреті алынады . Бұл жағдайда бүршік шамдарының жіп кескінінің орталығы ирис диафрагмасының орталық бөлігінде болуы керек .
5. Конденсатор мен сəулелендіру құралының диафрагмасының саңылауын ашыңыз.
Реостат көмегімен шамның жіпінің жарықтығын азайтыңыз .
7. Зерттелетін үлгіні микроскоптың сатысына қойып, қажетті объективті жұмыс жағдайына қойыңыз және микроскоптың бинокулярлы қондырмасының окулярларына қарап, түтікшені жылжыту арқылы микроскоптың оптикасын объектіге бағыттаңыз.
8. Сәулелендіру құралының диафрагмасын толығымен дерлік жабыңыз және конденсаторды жылжыту арқылы микроскоптың көру аймағында сәулелендіруші диафрагманың анық кескінін алыңыз .
9. Айнаны айналдыра отырып, жарықтандырғыш диафрагмасының кескіні центрленеді , содан кейін диафрагманың кескіні микроскоптың көру өрісіне тең (немесе одан сәл үлкенірек) болатындай етіп ашылады.
10. Бір окулярды алып, микроскоп түтігіне қарап, конденсатор диафрагмасын оның шеттері объективтің артқы линзасының жарық шеңберінің фонында әрең байқалғанша кішірейтіңіз.
11. Окулярды орнына қойыңыз. Сәулелендіру құралының саңылауларына көк және аязды әйнек салынған . Содан кейін микроскоппен қарап, сəулелендіру құралының реостаты арқылы препараттың қажетті жарықтандыруы орнатылады.
12. Препарат зерттеледі.
Ескертулер:
1. Төмен диафрагмасы, үлкейткіші төмен объектілермен (10x және одан аз) жұмыс істегенде, жарықтандыруды реттемес бұрын ауыстырылатын төмен диафрагмасы бар конденсаторды орнатыңыз немесе конденсатор дизайны рұқсат етсе, оның жоғарғы объективін бөліңіз (бұраңыз).
2. 7-тармақты ең басында ерікті жарықтандыру арқылы жасауға болады, содан кейін Колер принципіне сәйкес түзетулер енгізуге болады.
Негізінде орнатылған сəулелендіру құралы бар микроскоптың жарықтандыруын орнату
Кірістірілген сәулелендіргіші бар микроскопты орнату тәртібі:
1. Мұздатылған әйнекті конденсатордың топсалы жақтауына орнатыңыз.
2. Төменірек үлкейту объектісі (10x немесе одан аз) сәуле жолына енгізіледі.
3. Ұнтақталған шыны мен жиналмалы конденсатор линзасын сәуле жолына салыңыз.
4. Тұтқаны пайдаланып конденсатормен кронштейнді тоқтағанша көтеріп, конденсатордың диафрагмасын толығымен ашыңыз.
5. Шамы бар розетканы топсаға тоқтағанша орнатыңыз.
6. Шамды оның жіпі көлденең болатындай етіп орнатыңыз.
7. Қуат көзін желіге қосып, шамды қосыңыз.
8. Сахнаға қойылған үлгінің анық бейнесін алу үшін микроскопты фокустаңыз.
9. Шам ұстағышын тұтқасынан ось бойымен жылжыту және оны топсамен бірге көлденең жазықтықта айналдыру арқылы микроскоптың көру аймағының ең жарқын және біркелкі жарықтандыруына қол жеткізіледі.
10. Басқа объективпен жұмыс істегенде, жарықтандыру параметрлерін қайталаңыз.
11. НАЗАР АУДАРЫҢЫЗ! 10x астам үлкейтетін объектілермен жұмыс істегенде, конденсатордың топсалы линзасын сәуле жолынан жылжыту керек.
Тұрақты және уақытша препараттарды дайындау
Тұрақты препараттар тамаша демонстрациялық материал болып табылады және көптеген жылдар бойы сақталуы мүмкін. Қалыңдығы 10-22 мкм жіңішке кесінділерде тозаң түтіктерінің енуін байқауға, хромосомалардың санын санауға, митоз бен мейозды, эмбрионның дамуын және т.б.
Боялған микроскопиялық препараттарды дайындау техникасы бірнеше кезеңді қамтиды. Объектілер күрделі өңдеуден өтеді.
1. Материалды бекітуге дайындау.
2. Материалды сумен немесе спиртпен фиксатормен бекіту (тиісінше 24 сағат және 12 сағатқа дейін).
3. Бекітілген материалды жуу.
4. Жуылған материалды толық сусыздандыру.
5. Материалды парафинді еріткіштермен (хлороформ, ксилол немесе бензол) сіңдіру.
6. Хлороформ (немесе ксилол) толығымен буланғанша материалды парафинмен сіңдіру.
7. Материалды парафинге құю (парафинге құйылған материалды өте ұзақ сақтауға болады).
8. Парафинмен сіңдірілген материалдан блоктарды өндіру.
9.Микротом көмегімен кесінділерді алу.
10. Бөлшектерді шыны сырғаларға жабыстыру.
o С температурада кептіру , кесінділері бар сырықтарды шаңнан және жоғары температурадан сақтай отырып, ұзақ уақыт сақтауға болады.
12. Ксилолмен кесінділерден парафинді алу.
13. Спиртпен кесінділерден ксилолды алу.
14. Секциялардан спиртті тазартылған сумен тазарту.
15.Препараттарды бояу (кейде ою және бояу) және дифференциациялау.
16. Боялған кесінділерді 96% және 100% спиртпен сусыздандыру.
17. Секциялардағы спиртті ксилолмен ауыстыру (бір уақытта кесінділер ксилолмен тазартылады).
18. Канадалық бальзамда кесінділерді орналастыру.
19. Дайындықтарды кептіру және тазалау, таңбалау.
20. Микроскоппен препараттарды зерттеу.
Сондай-ақ микроскопиялық технологияда өндірісі сусыздандырудың , аралық сұйықтыққа, парафинге салудың және микротомдық кесінділерді алудың күрделі процедурасын қажет етпейтін престелген препараттар кеңінен қолданылады. Сығылған препараттар митозды, кариотиптерді зерттеуде және жануарлар объектілерімен жұмыс істегенде қолданылады.
Көбінесе престелген препараттарды дайындау үшін әртүрлі бекіткіштер қолданылады. Бекітілген материал 70% спиртте жуылады. Ол материалды ұзақ уақыт сақтау үшін пайдаланылуы мүмкін, бірақ оны тоңазытқышта сақтау жақсы. Престелген препараттар өндірісінде тіндерді мацерациялау әдістері ерекше маңызға ие. Әдетте бұл үшін 45% сірке қышқылы, 40-45% пропион қышқылы, 1 Н қолданылады. тұз қышқылы, ферменттер.
Препараттар ацетокарминмен, Шифф реагентімен, нигрозинмен және басқа бояғыштармен боялады.
Микроскоптың ең маңызды сипаттамалары
Цитологиялық зерттеулерге арналған микроскопта 4-7 жоғары апертуралы апохроматикалық объективтердің жиынтығы болуы керек, оның ішінде сандық саңылауы бар 90x объективтері ( A ) 1,3 - 1,4; компенсациялық окулярлар жиынтығы; А- мен тікелей және қиғаш жарықтандыруға арналған апланатикалық конденсатор кемінде 1,4; штатив; линзалар мен қозғалатын препараттарды фокустау механизмдері; екі көзімен микроскоп арқылы бақылауға арналған бинокулярлық қондырма; жарық сүзгілерінің жиынтығы, сонымен қатар микроскоптың барлық оптикалық және механикалық бөліктерін дәл орталықтандыру. Сонымен қатар, микроскоп сыртқы (MBR-3 үшін OI-9m) немесе кірістірілген ( MBI-6 үшін; MBI-11; Mikmed-1 микроскоптары, 2-нұсқа) болуы мүмкін жарықтандырғышпен жабдықталуы керек. Жарықтандыру Кёлер принципіне сәйкес орнатылады , ол микроскоптың оптикалық құрамдас бөліктерінің саңылауларын барынша пайдалану үшін жағдайларды қамтамасыз етуден тұрады, яғни конденсатор мен объективтің сандық саңылаулары сәйкес келетін бақылау жағдайларын жасау.
Конденсатор екі немесе үш линзадан тұрады және 3,5-тен 100x дейін үлкейтетін линзалармен жұмыс істегенде объектідегі өрістерді жарықтандыруды қамтамасыз етеді . Микроскоптағы бақылау әдісіне байланысты конденсаторлардың бірнеше түрлері бар : ашық өріс конденсаторы, қараңғы өріс конденсаторы, фазалық контрастты бақылауға арналған конденсатор , қиғаш жарықтандыруға арналған саңылау диафрагмасы бар конденсатор және т.б .
Микроскоп айнасының екі беті бар - тегіс және қисық, ол конденсатордың астында орналасады және оған жарықты бағыттайды. Конденсатордан микроскоп сатысындағы үлгіге жарық шоғы түседі, содан кейін окулярға түседі.
Микроскоптың (түтіктің) визуалды бекітпесі әдетте бинокулярлы. Ол окуляр түтіктерінің осьтері арасындағы қашықтықты бақылаушының көзінің негізіне сәйкес 54-тен 54-ке дейінгі диапазонда орнатуға мүмкіндік береді.72 мм (2-суретте бұл қашықтықты өзгерту мүмкіндігі көрсеткілер арқылы көрсетілген). Сол жақ окуляр түтігінде 2 айналмалы сақина арқылы бақылаушының қателігін плюс 5-тен минус 5 диоптрге дейін өтеуге мүмкіндік беретін диоптиялық механизм бар . Окуляр түтіктері 45° көлбеу. Дүрбі қондырмасының үлкейтуі 1,5 есе.
Микроскоп жинағы монокулярды қамтуы мүмкін объектілерді бір көзбен қарауға мүмкіндік беретін қосымша . Бинокулярлы қондырмаға қарағанда оның 1x үлкейтуі бар . Мұндай қондырманы пайдаланған кезде полярлық сүзгілерді поляризацияланған жарықта зерттеу үшін пайдалануға болады. Линзалармен жұмыс істегенде, стандартты , вертикальдан өзгеше 160 ммтүтік ұзындығына арналған түзу тартылатын түтігі бар саптама. Тартылатын түтіктегі шкала көмегімен линза жобаланған түтіктің механикалық ұзындығы орнатылады.
Окулярлар көбінесе екі линзадан тұрады. Олар әртүрлі үлкейтуге ие болуы мүмкін және әртүрлі диаметрлердің көру өрістерінде бақылаулар жүргізуге мүмкіндік береді (1-кесте).
1-кесте
Кейбір окулярлардың сипаттамалары
Окуляр белгілері
Арттыру
Көру өрісінің диаметрі , мм
K5x
5
22
K7x
7
18
K10x
10
13
K 10x18
10
18
K15x
15
11
K20x
20
9
Окулярлар виртуалды бейнені жасайды және құрылымның бөлшектерін ашпай-ақ линзалар жасаған кескінді үлкейтеді. Окулярдағы белгілер оның үлкейтуін және кейбір жағдайларда көру өрісінің диаметрін анықтауға мүмкіндік береді.
Револьвер Құрылғы төрт линзаны орнатуды қамтамасыз етеді. Линзаларды ауыстыру револьвер құрылғысын конустық бетпен бекітілген орынға айналдыру арқылы жүзеге асырылады .
Линзалар негізгі функцияны орындайды: олардың линзалар жүйесі окулярға берілетін бастапқы кескінді құрайды . Мақсаттар түтіктің механикалық ұзындығына 160 мм, кескін жазықтығындағы сызықтық өріске 18 ммжәне жабын шынысының қалыңдығына арналған 0,17 мм.
Объективтегі оптикалық аберрациялардың толық немесе ішінара болмауы үлкен маңызға ие, бұл объектінің кескінінің бұлыңғырлығына, қисықтығына немесе бояуына байланысты бұрмалануына әкелуі мүмкін .
Микроскоп оптикасының аберрациялары әртүрлі болуы мүмкін . Сфералық аберрация - нүктенің кескіні шатасу шеңбері ретінде беріледі. Астигматизм - нүктенің бейнесі дисперсияның эллипсоидты шеңбері түрінде беріледі. Кома - кескіннің анықтығы ортасынан көру өрісінің шетіне дейін төмендейді. Көру аймағының қисаюы бір мезгілде көру аймағының ортасы мен шеттерін күрт көруге мүмкіндік бермейді . Бұрмалау - көру аймағының шеттерінде және ортасында әртүрлі сызықтық үлкейтуге байланысты объект пен оның кескіні арасындағы ұқсастықтың бұзылуы . Хроматикалық аберрациялар - үлкейту хроматизмі және позиция хроматизмі. Позиция хроматизмі - әртүрлі түстермен жасалған кескіндер оптикалық жүйеден әртүрлі қашықтықта орналасады . Үлкейту хроматизмі - кескіндер бір жазықтықта , бірақ өлшемдері әртүрлі . Жоғары сапалы апохроматикалық мақсаттар жоғары сандық апертурамен жасалады . Олар сфералық және хроматикалық аберрацияларды жояды . Апохроматикалық мақсаттар компенсациялық окулярлармен бірге қолданылады .
Кейбір линзалардың сипаттамалары кестеде келтірілген. 2.
Әрбір линза миллиметрде белгілі бір жұмыс қашықтығымен сипатталады. Линзаларды ұстаған кезде линзаларды зақымдамау үшін абай болу керек . Бұл жұмыс қашықтығы жоғары үлкейтетін линзалармен жұмыс істегенде өте маңызды (жабық әйнектің беті мен объективті линзаның арасындағы қашықтық) 0,10 - 0,12 мм.
Объектіге назар аудару түтік ұстағышын жылжыту арқылы жүзеге асырылады. Дөрекі фокустау түтік ұстағышының екі жағында орналасқан макро бұрандалы тұтқаларды айналдыру арқылы қол жеткізіледі. Микроскоптың дөрекі фокустау диапазоны 40 мм. Нәзік фокустау бұралған диск түрінде жасалған микробұранданың көмегімен жүзеге асырылады . Дискінің бір айналымы түтік ұстағышының қозғалысына сәйкес келеді 0,5 мм, ал дискінің тоқтаудан тоқтауға дейін айналуы кем емес 2 мм. Жұмысты бастамас бұрын, дәл фокустау тұтқасын шамамен ортаңғы күйге қою керек .
2-кесте
Линзаның кейбір сипаттамалары
Линзалар
Үлкейту, сандық апертура, батырудың болуы
Жұмыс қашықтығы, мм
Планахроматтар
9 x 0,20
13,13
10 x 0,20
13,13
Ахроматтар
8 x 0,20
8.53
20 x 0,40
1,70
40 x 0,65
0,41
85 x 1,00 (VI)*
0,18
90 x 1,25 (MI)**
0,10
Апохроматтар
10 x 0,30
4.80
20 x 0,65
0,67
90 x 1,3
0,12
Ескерту. * Суға батыру. ** Майға батыру
Препарат сахнаға қысқыштар арқылы бекітіледі немесе инемен ұсталады. Объектінің сатылары әртүрлі пішінді, айналмалы болуы мүмкін, объектінің координаталық қозғалысы бар үлгі ұстағыштармен жабдықталған, онда ұстағыштарды бұрандалардың көмегімен бір-біріне ( объектінің шынысының өлшеміне байланысты) қатысты жылжытуға болады (1-сурет).
Жарықтандыру құрылғылары сыртқы , үстіңгі немесе кіріктірілген болуы мүмкін . Сыртқы жарықтандырғыш болған жағдайда айна қолданылады. Оның екі шағылыстыратын беті бар: тегіс және ойыс. Ойыс беті табиғи жарықта қолданылады, кейбір жағдайларда ол объектінің жарықтандыруын арттыруға қызмет етуі мүмкін . OI-32M немесе OI-35 үстіңгі жарықтандырғыштары микроскоптың түбіндегі орнату розеткасына салынған. Микроскоптың негізіне орнатылған сəулелендіру құралына галогендік шам жəне фокусының жанында шам жіпі орналасқан коллекторлық линза кіреді.
Линзаның шешуші күші
Әрбір линза белгілі бір рұқсатпен, фокустық ұзындығымен (өріс тереңдігі) және үлкейтумен сипатталады.
Микроскоп объективінің ажырату қабілеті ( d ) - берілген объективпен көруге болатын бөлшектің ең кіші диаметрі немесе олар бөлек көрінетін екі сызық арасындағы ең аз қашықтық . Микроскоп объективінің ажырату қабілеті объектив пен конденсатордың сандық апертурасының ( A ) мәндеріне және жарық көзінің толқын ұзындығына (λ) байланысты. ). Микроскоптың оптикалық осіне параллель сәулелер шоғы үшін микроскоп объективінің ажырату қабілеті формуламен анықталады.
d = λ A
Қиғаш сәулелер үшін ажыратымдылық 2 есе жоғары:
d = λ 2 А ,
мұндағы λ - толқын ұзындығы, нм; A - линзаның сандық апертурасы.
Спектрдің көрінетін бөлігіндегі жарық көзінің сәулелерінің толқын ұзындығы күлгін сәулелер үшін 0,4 мкм (400 нм) қызыл сәулелер үшін 0,7 мкм (700 нм) дейін өзгеруі мүмкін. Демек, жарық көзінің сәулелерінің толқын ұзындығы неғұрлым қысқа болса және объективтің саңылауы неғұрлым үлкен болса , микроскоп объективінің ажырату қабілеті соғұрлым жоғары болады, яғни микроскоп арқылы біз неғұрлым нәзік құрылымдарды көре аламыз. Объектіні қиғаш сәулелермен жарықтандырғанда микроскоп объективінің ажырату қабілеті тікелей түскен сәулелермен жарықтандырылғанға қарағанда 2 есе жоғары болады. Препаратты көгілдір сәулелермен (λ = 0,47 мкм) жарықтандыру арқылы, яғни сәулелендіргіштегі көк сүзгіні пайдалану арқылы қарапайым ақ жарықпен жарықтандырылғанға қарағанда, майда құрылымдарды зерттеуге болады .
Мысалы: A бар линзалар үшін =1,4 ақ жарықпен жарықтандырылғанда (λ = 0,55 мкм), тікелей түсетін жарықпен көрінетін ең кішкентай бөлшектің диаметрі 0,39 мкм, қиғаш жарықпен - 0,20 мкм, көк жарықпен жарықтандыруда - сәйкесінше 0,34 және 0,17 мкм . Жарық микроскопының көмегімен алуға болатын максималды ажыратымдылық 0,20 - 0,35 мкм құрайды. Ажыратымдылықты ультракүлгін сәулені (толқын ұзындығы 0,26 - 0,28 мкм) пайдалану арқылы арттыруға болады , бұл 0,13 - 0,14 мкм ажыратымдылықты алуға мүмкіндік береді.
Линзаның сандық апертурасы
Линзаның сандық немесе сандық апертурасы (A) жарықты жинау қабілетін сипаттайды және формуламен анықталады.
A = n ∙ sinα ,
мұндағы n - объективтің алдыңғы линзасы мен жабын әйнегі арасындағы ортаның сыну көрсеткіші; α - линзаның кіру саңылауының жарты бұрышы (бір жағы оптикалық оське сәйкес келетін бұрыш, екіншісі линзаның белсенді саңылауының шекарасымен сәулелердің линзадан шығатын нүктесін қосатын сызық арқылы жасалады) (2-сурет).
Күріш. 2. Микроскоптың объективті саңылауының бұрышы: Ob - объективті; Kn - конденсатор; P - дайындық жазықтығы; F - фронтальды жазықтық; α - линзаның апертура бұрышы
Микроскоптың толық үлкейтуі
Объективтің үлкейтуі жақтауда көрсетілген, ал сандық апертура да сол жерде көрсетілген. Конденсаторларда да белгілі бір сандық апертура болады. Егер конденсатор апертурасы объективті саңылаудан кіші болса, онда объективтің мүмкіндіктері жұмыста толық пайдаланылмайды.
Микроскоптың жалпы үлкейтуі объективті үлкейтудің көбейтіндісі ретінде анықталады ( V туралы ) окулярды үлкейту бойынша ( V) Жарайды ):
V = V рев · V жарайды .
Егер объектив 90 есе, ал окуляр 15 есе үлкейтсе, онда жалпы үлкейту 1350 болады. Бұл мәннен жоғары үлкейтулер маңызды емес және пайдасыз деп аталады және бұл окуляр препараттың құрылымын ұлғайта алатындығы соншалықты, ол объективтегідей көру бұрышында көрінеді. Бұл өсу пайдалы деп аталады және ол 1000 А-ға тең. Есептеулер пайдалы өсу 1300-1450 еседен аспайтынын көрсетеді. Жоғары ұлғайту кескіндегі жаңа бөлшектерді ашпайды және оның жарықтандыруы азаяды.
Кескін өрісінің тереңдігі
Кескін өрісінің тереңдігі (фокус тереңдігі) - линзаның бір уақытта өзінен әр түрлі қашықтықта орналасқан нүктелердің анық кескіндерін шығару мүмкіндігі немесе препараттың бір уақытта күрт көрінетін тереңдігі. Бұл микроскоптың үлкейтуіне және объективті апертураға байланысты. Әрбір линза бір жазықтықта белгілі бір тереңдікте дайындықты көруге мүмкіндік береді . Жоғары ұлғайту кезінде линзаны әртүрлі жазықтықта кезекпен фокустау қажет . Төмен үлкейтулерде және кіші саңылауларда өріс тереңдігі жоғары үлкейтуге қарағанда үлкенірек болады. Бір көру жазықтығында объектінің бейнесін анық көру қажет болғанда, өрістің тереңдігі индикаторын фотомикрографияда ерекше ескеру керек . Ол формула бойынша анықталады:
T = (10007 A ∙ V )+(λ2 A 2 ) , мұндағы
А - апертура, V - микроскоптың үлкейтуі, λ - толқын ұзындығы.
Төмен үлкейтулерде және кіші саңылауларда өріс тереңдігі жоғары үлкейтулер мен үлкен саңылауларға қарағанда көбірек болады.
Микроскоптың сапасы оның үлкейтуімен емес, оның оптикалық құрылғыларының ажырату қабілетімен анықталады.
Құрғақ нысаналар жағдайында ( сұйық ортаны пайдаланбай - батыру) сыну көрсеткіші бірлікке тең (n = 1) және A 0,95.
Иммерсиондық жүйеде алдыңғы линза мен қаралатын объект арасындағы кеңістік ауадан жоғары сыну көрсеткіші бар сұйықтықпен толтырылады . Суға батыру мақсаттары үшін сандық саңылау үлгі мен объектив арасында орналасқан сұйықтықтың сыну көрсеткішіне байланысты болады . Сондықтан суға батыру мақсаттары үшін A 1,25-тен аз немесе оған тең (суда n = 1,33), ал майға батыру мақсаттары үшін A 1,4- тен аз немесе оған тең (балқарағай майында n = 1,515). 3-суретте майға батыру және құрғақ объектив пайдаланатын сәуле жолы көрсетілген .
Күріш. 3. Құрғақ (сол жақта) және майлы (оң жақта) заттарды пайдалану кезіндегі сәуле жолын салыстыру.
Бұл суреттен көрініп тұрғандай, құрғақ жүйеде сәулелердің бір бөлігі объективке жетпейді, өйткені олар қақпақ шынысынан шыққан кезде ауытқиды. Шыны бетіне шыққан жерінде 41 ° -тан (шектеу бұрышы) үлкен бұрыш құрайтын сәулелер толығымен шағылысады. Шыны мен су үшін шектеу бұрышы 41°, балқарағай майы мен шыны үшін олардың сыну көрсеткіштерінің теңдігіне байланысты ол жоқ . Кескін сапасын жақсарту үшін толық батыру жиі пайдаланылады, онда батыру сұйықтығы конденсаторға да қолданылады.
Суға батыру объектілерімен жұмыс істегенде, түтікті түсірген кезде объективке зақым келтірмеу үшін абай болу керек.
препараттың жабын шынысының бетіне тамшы түрінде жағылады және түтікшені түсіру арқылы линзаны батыру тамшысына батырады. Батыру сұйықтығын объектив линзасының бетіне немесе тамшылатып үлгіге де, объективке де қолдануға болады. Негізгі талап - ауа көпіршіктері жоқ батыру жасау.
Сәулелендіру құралының коллекторының, конденсатордың және объективтің саңылаулары сәйкес болғанда ғана микроскоп оптикасының ажырату қабілеті толығымен пайдаланылады.
Жаттығу. Т және d толқын ұзындығына тәуелділігін анықтаңыз
Биологиялық микроскоптың мақсаттарымен, окулярларымен және конденсаторымен танысу. Пияз қабығының уақытша препаратын дайындаңыз және оны түрлі-түсті сүзгілердің көмегімен әртүрлі толқын ұзындығында тексеріңіз: қызыл, көк және жасыл. Дайындаманы үш толқын ұзындығында сызыңыз. Қандай толқын ұзындығында кішірек бөлшектер көрінетінін анықтаңыз. Ажыратымдылық пен өріс тереңдігін есептеңіз. Нәтижелер 3-кестеге енгізілген.
3-кесте
Ажыратымдылық пен өріс тереңдігінің жарықтың толқын ұзындығына тәуелділігі
Көрсеткіш
Арттыру
λ=440 нм
λ=570 нм
λ= 68 0 нм
d
8x
d
40x
Т
8x
Т
40x
d және T толқын ұзындығына ( λ ) тәуелділігі туралы қорытынды жасаңыз .
Өсімдіктер мен жануарлар жасушаларының құрылысының жалпы жоспары
Жасуша - Жер планетасында кездесетін барлық тірі тіршілік иелерінің құрылымы мен қызметінің негізгі өздігінен көбейетін бірлігі. Тірі организмдердің арасында жасуша ұйымының екі түрі бар. Құрылымның қарапайым түріне бактериялар мен көк-жасыл балдырлардың жасушалары жатады, олар әдетте прокариот деп аталады, ал ұйымдасқан түріне төменгі сатыдағы өсімдіктерден адамға дейін эукариоттардың барлық басқа тірі ағзалардың жасушалары жатады. Суретте. 4, 5 про- және эукариоттық жасушалардың құрылымының диаграммасын көрсетеді.
Күріш. 4. Прокариоттық жасушаның құрама диаграммасы: 1 - жасуша қабырғасы; 2 - плазмалық мембрана; 3 - ДНҚ нуклеоиды; 4 - цитоплазмалық полирибосомалар; 5 - мезосома; 6 - пластинкалы құрылымдар; 7 - плазмалық мембраналық инвагинациялар; 8 - хроматофорлардың шоғырлары; 9 - қосындылары бар вакуольдер; 10 - бактериялық жгутика; 11 - пластинкалы тилакоидтар
Прокариот жасушаларының эукариоттық жасушалардан айырмашылығы қарапайым (қарапайым) құрылымы. Прокариоттық жасушаның түзілген ядросы жоқ, оның функцияларын нуклеоид атқарады . Прокариот жасушасында центриолдар , сондай-ақ бір мембраналық және қос мембраналық органеллалар болмайды - олардың функцияларын мезосомалар атқарады . Рибосомалар, қозғалыс органеллалары және прокариот жасушаларының мембраналары белгілі бір құрылымға ие.
Өсімдіктердің органикалық заттардың көзі ретіндегі ерекше рөлін ескере отырып, эукариоттық жасушаларды зерттеуді жасыл өсімдіктің жасушасына қараудан бастаған жөн. Бұл жағдайда негізгі назарды тірі жасушаның құрылымына аудару керек , оны зерттеу үшін жарық микроскопы қолданылады.
жасушаның тірі бөлігін (протопласт) қоршап тұрған тығыз , әдетте көмірсутекті мембрана, пластидтер, олардың ішінде ең маңыздылары фотосинтез процесін жүзеге асыратын хлоропласттар және жоғары гидратталған жасуша шырынымен толтырылған үлкен вакуольдер болады. Дегенмен, аталған белгілер әмбебап емес. Сонымен, кейбір өсімдік жасушаларында, мысалы, балдырлардың гаметалары мен зооспораларында , олар сыртқы ортадан жануарлар ағзаларының жасушасын қоршап тұрған мембранамен бірдей плазмалық мембранамен бөлінген ; Жасыл пластидтер органикалық заттарды синтездеу үшін күн сәулесінің энергиясын пайдаланатын өсімдіктерге ғана тән . Дайын органикалық заттарды (саңырауқұлақтар) пайдаланатын гетеротрофты организмдерде олар болмайды .
Вакуольдер өсуді аяқтаған ересек жасушаларға тән. Тамырдың ұшында және өркеннің жоғарғы жағында орналасқан білім беру ұлпаларының (меристемалардың) жасушаларында , сондай-ақ тұқым жасушаларында әдетте вакуольдер болмайды немесе олар өте кішкентай.
Сонымен, өсімдік жасушасының құрылымының ерекшелігі оның тіршілік әрекетінің сипатымен, жастық жағдайымен және таксономиялық ерекшеліктерімен анықталады .
Күріш. 5. Эукариоттық жасуша құрылымының құрама диаграммасы: а - жануар текті; b - өсімдік текті : 1 - хроматинді ядро, 2 - плазмалық мембрана, 3 - жасуша мембранасы, 4 - плазмодесма, 5 - түйіршікті эндоплазмалық тор, 6 - агранулярлы эндоплазмалық ретикулум, 7 - пиноцитоздық вакуоль түзетін, 8 - 9 - 1-10 майлы кешен, центриоль және микротүтікшелер, 12 - митохондриялар, 13 - полирибосомалар, 14 - вакуольдер, 15 - хлоропласттар
Төменгі сатыдағы өсімдіктерде жасуша көбінесе біртұтас, тәуелсіз тірі ағзаны білдіреді. Мұндай біржасушалы өсімдіктерге жасыл балдырлар (хлорелла, хламидомонас ) және кейбір саңырауқұлақтар (ашытқы) жатады. Көпжасушалы өсімдіктердің денесі әртүрлі мөлшердегі, пішіндегі, ішкі құрылымы әртүрлі және әртүрлі қызметтерді атқаратын көптеген жасушалар кешенінен тұрады . Даму процесінде өзінің тірі мазмұнын жоғалтқан жасушалар суды өткізуге қатыса алады, олардың кейбіреулері өсімдікті механикалық әсерлерден, температураның ауытқуынан және т.б.
Сондықтан ботаникада жасуша термині цитоплазмаға, ядроға, пластидтерге, митохондрияларға және басқа органоидтарға дифференциацияланған протопласты бар құрылымдық бірліктерге ғана емес, сонымен қатар протопластар өлгеннен кейін қалған мембраналар үшін де қолданылады.
Плазмалық мембрана немесе плазмалемма - жасушаны сыртынан шектейтін беткей перифериялық құрылым. Ол мембрана арқылы екі бағытта төмен және жоғары молекулалы заттардың еркін ағынын шектейтін тосқауыл қызметін атқарады. Ол сондай-ақ әртүрлі химиялық заттарды қабылдайтын және осы заттардың жасушаға тасымалдануын таңдамалы түрде реттейтін құрылым қызметін атқарады.
Канадалық элодеяның дамушы жапырақтарының жасушаларының құрылымы ( Elodea canadensis Michx .)
Элодея - жіңішке сабағында ұзын сопақша жапырақтары бар тұщы су өсімдігі. Құрылымы әлі қалыптаспаған ең жас жасушалар өсу конусының астындағы өркеннің жоғарғы жағында орналасқан кішкентай жапырақ рудименттерін құрайды . Препаратты дайындау үшін өсіндінің үстіңгі жағын ( ұзындығынан ұзағырақ емес 1 см) үлкен су тамшысындағы шыны слайдқа салады және үлкен жапырақтарды микроскоптың немесе үлкейткіш әйнек астында екі кескіш инелермен мұқият алып тастайды. Ең кішкентай қабыршақ тәрізді жапырақтары, өркеннің жоғарғы жағында жиналып, сабағынан үзіліп, түзетіліп, әйнекпен жабылып, микроскоптың төмен, содан кейін жоғары үлкейтуімен зерттеледі. Жасушалардың мөлшері мен пішіні дамып келе жатқан жапырақ тақтасының мөлшеріне байланысты . Сабақтан бөлінетін ең жас жапырақ примордиялары контурлары айтарлықтай өзгеретін жасушалардан тұрады. Көптеген жасушалар көпбұрышты, кейбіреулері тар және ұзартылған. Көбінесе біз бөліну нәтижесінде жаңадан пайда болған жасушаларды кездестіреміз . Жасуша мембраналары өте жұқа және тығыз жабылған. Жасушалар үлкен, айқын көрінетін ядроны қоршап тұрған тығыз цитоплазмаға толы . Цитоплазмада да орналасқан ұсақ денелер хлоропластар болып табылады (6 а, б- сурет ).
Күріш. 6. Элодея жапырағы жасушаларының құрылысы: а, б - жасуша дамуының кезекті кезеңдері; 1 - ядролар; 2 - пластидтер; 3 - вакуольдер
Төменгі жапырақтарда жасушалардың мөлшері ұлғайған сайын пластидтердің саны және олардың мөлшері ұлғаяды, сулы жасуша шырыны бар вакуольдердің пайда болуына байланысты жасушалардың мазмұны жеңіл және мөлдір болады ; ядролар барлық жасушаларда көрінбейді. Жас жасушаларда бірнеше ұсақ вакуольдар болуы мүмкін, олар жасуша өсіп, дифференциацияланғанда бір-бірімен қосылып, бір немесе бірнеше ірі вакуольдер түзіп, жалпы жасуша көлемінің 90%-ын алады. Орталық вакуоль цитоплазмадан қалыңдығы бойынша плазмалық мембранаға ұқсас жалғыз мембранамен бөлінген. Бұл мембрана тонопласт деп аталады. Вакуольдер әртүрлі қызмет атқарады. Негізгі функциялардың бірі - жасушалардың тургорлық қысымын сақтау. Вакуоль шырынында еріген молекулалар оның осмостық концентрациясын анықтайды. Вакуольдерді клеткалар қойма резервуары ретінде де пайдалана алады, мұнда тек резервтік заттар ғана емес, сонымен бірге экскрецияға арналған метаболиттер де жиналады. Ядроларды көру үшін жапырақтарды калий йодидінің сулы ерітіндісіндегі йод ерітіндісімен өңдеуге болады (бұл реагент ядроларды қоңырға айналдырады );
Жаттығу. Жапырақ рудиментінің уақытша препаратын дайындаңыз. Жас және дамып келе жатқан жасушаны қарап шығыңыз және сызыңыз. Сызбаларға тақырыпшалар жасаңыз. Жас және дамып келе жатқан жасушаның айырмашылығын сипаттаңыз.
Түзілген элодея жапырағы жасушаларының құрылысы
Сабағынан үзілген жапырақты астыңғы жағымен су тамшысына салып шыны әйнекпен жауып, микроскоптың төмен және жоғары үлкейтуінде зерттейді. Элодея жапырағы микроскоптың көру аймағынан едәуір үлкен, сондықтан аз ұлғайту кезінде жұмыс істегенде де препаратты жылжыту керек. Жапырақ екі қабат жасушалардан тұрады, жоғарғы қабаттың жасушалары бақылаушыға қараған, төменгі қабаттың жасушаларынан үлкенірек. Төмен үлкейту кезінде де жапырақ тақтасының біркелкі емес түсі байқалады, жапырақтың ортасында орналасқан, жеңілірек жасушалардан тұратын ортаңғы тамыр бар. Жапырақтың шеткі жасушалары дерлік мөлдір. Кейбір жасушалар ұштары жапырақтың ұшына қараған үшкір тістер түрінде сыртқа шығады (7а-сурет). Жапырақ тақтасының түбіндегі жасушаларда тістер болмайды (7б-сурет). Тістердің сыртқы қабырғалары өте қалың, қызыл-қоңыр түсті.
Жапырақтың бойында ортаңғы тамырға параллель әртүрлі ұзындықтағы тар қара жолақтар бар. Олар жасушааралық кеңістіктер жүйесін білдіреді - ауамен толтырылған жапырақтың жоғарғы және төменгі жақтарының жасушалары арасындағы кеңістіктер. Микроскоппен қарағанда, ауа (n=1) мен жасуша мембраналары (n=1,5) арасындағы жарықтың сыну көрсеткіштерінің үлкен айырмашылығына байланысты жасушааралық кеңістіктер қараңғы болып көрінеді. Сыну көрсеткіші мембраналардың сыну көрсеткішіне жақын су (n=1,33) зақымдалған аймақтар арқылы жасушааралық кеңістіктерге еніп, олардан ауаны ығыстырса, жасушааралық кеңістіктер көрінбейтін болады.
Күріш. 7. Түзілген элодея жапырағының жасушалары: 1 - ядро; 2 - хлоропласттар; 3 - вакуоль; 4, 8 - цитоплазма; 5 - жапырақ тіс; 6 - жасуша мембранасы; 7 - жасушааралық кеңістік; 9 - ортаңғы тамырдың жасушалары
Жасушалардың бір-бірімен тығыз байланысқан жұқа мөлдір қабырғалары бар. Жасушалардың мөлшері, пішіні және олардың құрамындағы жасыл пластидтердің (хлоропластар) саны әртүрлі.
Ортаңғы тамырдың жасушалары тар, жапырақтың ұзындығы бойынша қатты созылған, оларда пластидтер аз, олардың көпшілігі бүйір қабырғаларында орналасқан бұл пластидтердің контурлары.
Орта жолға іргелес ұяшықтар кеңірек, төртбұрышты, көпбұрышты немесе ұзынша. Жасушаларда көптеген пластидтер болады, олар дөңгелек, бүйір проекциясында олар сопақ немесе эллипс тәрізді. Жасушадағы ядро, цитоплазма және вакуоль көрінбейді, өйткені бұл құрылымдардың барлығының жарықтың сыну көрсеткіштері шамамен бірдей. Жапырақ калий йодидінің сулы ерітіндісіндегі йод ерітіндісімен өңделсе, ядро көрінетін болады, бірақ бұл реагент жасушаны өлтіретінін есте ұстаған жөн.
Цитоплазманың болуын және жасуша вакуолының шартты шекараларын тек қана пластидтердің қозғалуы арқылы бағалауға болады, ол жасуша қабырғалары бойымен сағат тілімен немесе сағат тіліне қарсы бағытта жүреді, бұл айналмалы немесе айналмалы қозғалысқа тән. Мұндай жасушаларда үлкен орталық вакуольді қоршап тұрған цитоплазма париетальды позицияны алады. Жаңа ғана үзілген жапырақтың жасушаларында цитоплазма әдетте қозғалмайды немесе өте баяу қозғалады, бірақ бірнеше минуттан кейін қозғалыс алдымен ортаңғы тамырдың жасушаларында, содан кейін оған жақын орналасқан жасушаларда анық көрінеді.
Жапырақ тақтасының шетінде орналасқан жасушалар ұзартылған, бірақ ортаңғы тамырдың жасушаларынан айтарлықтай қысқа. Олардың сыртқы қабырғалары ішкі қабырғаларына қарағанда қалыңырақ. Жасушалар құрамындағы аздаған пластидтер басқа жасушаларға қарағанда әлдеқайда аз; Жақынырақ тексергенде, шеткі жасушаларда, соның ішінде жеңіл, ұсақ түйіршікті денелер болып табылатын тістерде ядроларды көруге болады.
Жапырақтың жалпы құрылымымен танысу үшін жоғары үлкейту кезінде оны құрайтын жасушалардың ерекшеліктерін толығырақ қарастыру керек.
Жаттығу. Қалыптасқан элодея жапырағының уақытша препаратын дайындаңыз. Дайындықты қарап шығыңыз, сызбасын сызыңыз және сипаттаңыз. Сызбаларға тақырыпшалар жасаңыз.
Валлиснерияның жапырақ терісінің жасушалары ( Vallisneria спираль L. )
Препаратты дайындау үшін скальпель немесе кескіш инемен валлиснерияның сызықты жапырағының кез келген жағындағы теріні кесіп алады , оның бір бөлігін жапырақ тақтасынан жұлып алып, шыны слайдқа су тамшысына салып , жабын шынымен мұқият жауып, микроскоптың төмен және жоғары үлкейтуінде зерттейді (8-сурет).
Терінің жасушалары жапырақтың ұзындығы бойынша ұзартылған немесе төртбұрышты немесе көпбұрышты контурлары бар. Жасуша қабықшалары жұқа, мөлдір және бір-бірімен тығыз орналасқан. Жасушаларда көптеген жасыл денелер , хлоропластар немесе хлорофилл түйіршіктері көрінеді. Хлоропласт екі беті дөңес линза тәрізді , оның алдыңғы жағы әрқашан жасуша қабырғасына қараған.
Күріш. 8. Валлиснерия жапырағының қабығы: 1 - жасуша қабығы; 2 - хлоропласттар; 3 - өзек; 4 - цитоплазманың қозғалыс бағыттары; 5 - цитоплазма
жасуша қабырғалары бойымен қозғалатынын көруге болады . Бұл цитоплазманың орталық вакуоль айналасында қозғалуы нәтижесінде пайда ... жалғасы
Сіз бұл жұмысты біздің қосымшамыз арқылы толығымен тегін көре аласыз.
Ұқсас жұмыстар
Пәндер
- Іс жүргізу
- Автоматтандыру, Техника
- Алғашқы әскери дайындық
- Астрономия
- Ауыл шаруашылығы
- Банк ісі
- Бизнесті бағалау
- Биология
- Бухгалтерлік іс
- Валеология
- Ветеринария
- География
- Геология, Геофизика, Геодезия
- Дін
- Ет, сүт, шарап өнімдері
- Жалпы тарих
- Жер кадастрі, Жылжымайтын мүлік
- Журналистика
- Информатика
- Кеден ісі
- Маркетинг
- Математика, Геометрия
- Медицина
- Мемлекеттік басқару
- Менеджмент
- Мұнай, Газ
- Мұрағат ісі
- Мәдениеттану
- ОБЖ (Основы безопасности жизнедеятельности)
- Педагогика
- Полиграфия
- Психология
- Салық
- Саясаттану
- Сақтандыру
- Сертификаттау, стандарттау
- Социология, Демография
- Спорт
- Статистика
- Тілтану, Филология
- Тарихи тұлғалар
- Тау-кен ісі
- Транспорт
- Туризм
- Физика
- Философия
- Халықаралық қатынастар
- Химия
- Экология, Қоршаған ортаны қорғау
- Экономика
- Экономикалық география
- Электротехника
- Қазақстан тарихы
- Қаржы
- Құрылыс
- Құқық, Криминалистика
- Әдебиет
- Өнер, музыка
- Өнеркәсіп, Өндіріс
Қазақ тілінде жазылған рефераттар, курстық жұмыстар, дипломдық жұмыстар бойынша біздің қор #1 болып табылады.
Ақпарат
Қосымша
Email: info@stud.kz