Саңырауқұлақпен залалданған картоптың қорғаныштық реакцияларына СА2+ -АТФ-аза ферментінің қатысы

КІРІСПЕ

1. ӘДЕБИЕТКЕ ШОЛУ
1.1. Са2+ .АТФ.азаның өсімдік клеткасындағы маңызы 5
1.2. Са2+. АТФ.аза ферментіне жалпы сипаттама беру 6
1.3. Fusarium solani саңырауқұлағының жалпы сипаттамасы 7

2. ЗЕРТТЕУ ОБЪЕКТІЛЕРІ МЕН ӘДІСТЕМЕЛЕРІ
2.1. Зерттеу объектілері 10
2.2. Зерттеу әдістері 10
2.1.1.Сұйық ортада картоптың каллус клеткаларын өсіру 10
2.2.2. Fusarium solani саңырауқұлағын өсіру 11
2.2.3. Fusarium solani саңырауқұлағымен картоп түйіндерін және сұйық ортада өсірілген каллус клеткаларын залалдау 12
2.2.4. Са 2+. АТФ.азаның активтілігін анықтау 12
2.2.5. Са2+. АТФ.азаға әсер ететін факторларды анықтау әдістері 13

3. ЗЕРТТЕУ НӘТИЖЕЛЕРІ МЕН ОЛАРДЫ ТАЛҚЫЛАУ
3.1. Са 2+. АТФ.азаның активтілігіне Са 2+ иондары концентрациясының
және рН деңгейінің әсері 14
3.2. Картоптың каллус клеткаларын Fusarium solani саңырауқұлағы
залалдағанда Са 2+. АТФ.азаның активтілігіне әсері 17
3.3. Fusarium solani саңырауқұлағымен залалданған картоп
түйіндерінде
Са 2+. АТФ.азаның активтілігінің өзгеруі

ҚОРЫТЫНДЫ

ПАЙДАНЫЛҒАН ӘДЕБИЕТТЕР ТІЗІМІ
Табиғаттағы өсімдіктер әртүрлі микроорганизмдердің арқасында залалданып қауіпке ұшырайды. Сол сияқты, қазіргі кезде фузариоз проблемасы ауылшаруашылық өсімдіктері үшін өте маңызды болып саналады.
Олар әртүрлі топырақта кездесетін спора түрінде сақталады. Ең көп тараған және қатерлі Fusarium solani саңырауқұлағы болып табылады. Негізінен инфекцмя споралары бар топырақ арқылы жұғады. Бұл ауру қыстық-көктемдік кезңдегі картоп шығынының негізгі себебі болып саналады. Осы ауру әсерінен сақтау кезеңінде шығын 20% дейін жетеді. Фузариоздық аурудың зияндық әсері картоп түйіндерінің шығынымен ғана емес, инфекцияланған түйіндерді себу кезінде өсімдіктердің өсуі тежеліп және ол өз кезегінде түсімінің азаюына себеп болады. Ал инфекцияланған түйіндердің біреулері өспей, дамымай қалады.
Осы мәселені шешудің бір көзі болып Fusarium туысына жататын саңырауқұлақтардың әсеріне қарсы тұра алатын өсімдіктердің метаболизмін зерттеу табылады. Осыған байланысты көптеген ғалымдар патоген мен өсімдік арасындағы қатынасты зерттеуге көңіл аударуда.
Сонымен қатар картоптың патогенге тәуелді Са2+-АТФ-аза ферментін зерттеу маңызды болып отыр. Бұл фермент картоп клеткасының әртүрлі қорғаныштық реакцияларына қатысады.
Бұл жұмыстың мақсаты: Fusarium solani саңырауқұлағымен залалданған картоп клеткаларында Са2+-АТФ-аза ферментінің қатысын зерттеу.
Мақсатқа байланысты туатын міндеттер:
1. Каллус клеткаларын агарланған қоректік ортада өсіру.
2. Картоп клеткаларын сұйық ортада өсіру.
3. Fusarium solani саңырауқұлағын өсіріп, әртүрлі картоп сорттарын залалдау.
4. Fusarium solani саңырауқұлағымен залалдаған картоп түйіндеріндегі және сұық отрада өсірілген клеткалардағы Са2+-АТФ-аза ферментінің активтілігін анықтау.
1. Лукаткин А.С., Еремкина Т.Н. Активность Са2+- АТФазы в листьях растений кукурузы под влиянием охлаждения и в последействии // Сельскохозяйственная биология,2002, №3, с.73-76.
2. Michael N. Zook, Jeffrey S. Rush and Joseph A.Kuc // A role for Ca2+ in the elicitation of rishitin and lubimin accumulation in Potato tuber tissue. Plant Physiol. 1987, 84, 520-525.
3. Дячок Ю.В., Дмитриев А.П., Гродзинский Д.М. Роль Са2+ как вторичного мессенджера в индукции синтеза фитоалексинов и каллозы в культуре клеток Allium cepa L.// Физиология растений,1997,том 44,№ 3,с.385-391
4. Briskin D.P. Ca2+- translocating ATPase of the plant plasma membrane // Plant Physiol.1990, 94, 2:397-400.
5. Кондрашова М.Н., Лесогорова М.Н., Шноль С.Э. Метод определения неорганического фосфата по спектрам поглощения молибдатных комплексов в ультрафиолете// Биохимия,1965,30,567-572.
6. Кочетов Г.А. Практическое руководство по энзимологии. М.:1971.С.309-310.
7. Дуброво П.Н., Крылова В.В., Ливанова Г.И., Жизневская Г.Я, Измайлов С.Ф.// Физиология растений, 1992, том 39,вып.3,с.503-512.
8. Шибарова А.Н. Действие ионизирующего излучения в малой дозе на кинетические параметры работы Н+-АТФазы плазматических мембран клеток высшего растения
(Cucurbita pepo) // Тез.докл.III международной междисциплинарной конференции «НБИТТ-21», Петрозаводск,2004,С.37.
9. С.С Медведев // Физиология растений Санкт- Петербург,2004,С.145-152.
10. Авдонин П.В., Ткачук В.А. Рецепторы и внутриклеточный кальций. М. Наука, 1994, С.44-50.
11. Владимиров Ю.А., Ритов В.Б. Механизм работы Ca2+-АТФ-азы в мембранах саркоплазматического ретикулума // Биомембраны׃ Структура, функций, медицинские аспекты. Рига׃ Зинатне, 1981.С. 22-47.
12. Левицкий Д.О. Кальций и биологические мембраны. М.׃ Высш. шк., 1990
13. Левицкий Д.О. Кальций и биологические мембраны. М. Высш. шк., 1991. С. 124
14. Котык А.М., Яначек К.М. Мембранный транспорт. Изд. Москва 1980
15. Опритов В.А. Электричество в жизни растений и животных // Соровский Образовательный Журнал. 1996 №9. С. 40-46.
16. Опритов В.А. Электричество в жизни растений и животных // Соровский Образовательный Журнал. 1996 №9. С. 20-27
17. Болдырев А.А. Строение и функции биологических мембран. Знание М: 1987
18. Парсонс Д.С. Биологические мемебраны. М, Атомиздат 1978
19. Уалиханова Г.Ж. Өсімдіктер биотехнологиясы, Қазақ университеті 2001
20. Метлицкий Л.В., и др., Индуцирование у растении устойчивости к инфекционным болезням //Успехи соврем. Биологии. 1981 Т. 92
21. Билай В.И. Фузари: Киев «Наукова думка» 1977
22. Малюга А.А. Видовой состав и патогенность грибов рода Fuzarium вызывающих сухую гниль клубней картофеля в западной Сибири. Микалогия и фитопатология Т-37 Вып. 4 2003.
23. Сапко О.А., Утарбаева А.Ш., Кунаева Р.М. Активность ферментов фенольного обмена при вирусном заражении культивируемых in vitro тканей Solanum tuerosum // Изв. НАН РК. Сер. биол. и мед. 2002. №6. с. 117-128.
24. Дуброво П.Н., Крылова В.В., Ливанова Г.И., Жизневская Г.Я, Измайлов С.Ф. // Физиология растений, 1992, том 39,вып.3,с.503-512.
        
        ӘЛ-ФАРАБИ АТЫНДАҒЫ ҚАЗАҚ ҰЛТТЫҚ УНИВЕРСИТЕТІ
БИОЛОГИЯ ФАКУЛЬТЕТІ
Биохимия, биотехнология және өсімдіктер ... ... ... ... ... ... реакцияларына Са2+
-АТФ-аза ферментінің қатысы
Орындаушы:
IV курс студенті _____________________________Маллахожаева Г.С.
Ғылыми жетекші:
Б.ғ.к., профессор:_____________________________Валиханова Г.Ж.
Б.ғ.к:________________________________________Манадилова А.М.
Норма бақылаушысы:________________________Әкімбекова А.Б.
Қорғауға кафедра
меңгерушісімен жіберілді:_____________________Иващенко ... ... ... ... ... атындағы молекулалық биология және
биохимия ... ... ... знзималогиясы лабораториясында
орындалды.
Бітіру жұмысқа ... ... ... ... ... мен әдістемемелер,нәтижелер және оларды ... ... ... тізімі, 5 сурет кіреді.
МАЗМҰНЫ
КІРІСПЕ
1. ӘДЕБИЕТКЕ ШОЛУ
1.1. Са2+ ... ... ... маңызы ... Са2+- ... ... ... ... беру ... Fusarium solani саңырауқұлағының жалпы сипаттамасы 7
2. ЗЕРТТЕУ ... МЕН ... ... ... ... ... ... ... каллус клеткаларын өсіру
10
2.2.2. Fusarium solani саңырауқұлағын өсіру
11
2.2.3. Fusarium solani ... ... ... ... ортада өсірілген каллус клеткаларын залалдау
12
2.2.4. Са 2+- АТФ-азаның активтілігін анықтау
12
2.2.5. Са2+- ... әсер ... ... ... ... ... МЕН ОЛАРДЫ ТАЛҚЫЛАУ
3.1. Са 2+- АТФ-азаның активтілігіне Са 2+ ... ... рН ... әсері
14
3.2. Картоптың каллус ... Fusarium solani ... ... ... ... ... Fusarium solani саңырауқұлағымен залалданған картоп
түйіндерінде
Са 2+- АТФ-азаның активтілігінің өзгеруі
ҚОРЫТЫНДЫ
ПАЙДАНЫЛҒАН ӘДЕБИЕТТЕР ТІЗІМІ
КІРІСПЕ
Табиғаттағы ... ... ... ... қауіпке ұшырайды. Сол сияқты, қазіргі кезде фузариоз проблемасы
ауылшаруашылық өсімдіктері үшін өте маңызды болып саналады.
Олар әртүрлі топырақта ... ... ... ... Ең көп
тараған және қатерлі Fusarium solani ... ... ... ... ... бар ... арқылы жұғады. Бұл ауру қыстық-
көктемдік кезңдегі картоп ... ... ... болып саналады. Осы
ауру әсерінен сақтау кезеңінде ... 20% ... ... ... ... ... ... түйіндерінің шығынымен ғана емес, ... себу ... ... өсуі ... және ол өз ... ... себеп болады. Ал инфекцияланған түйіндердің біреулері
өспей, дамымай қалады.
Осы ... ... бір көзі ... Fusarium ... жататын
саңырауқұлақтардың әсеріне қарсы тұра ... ... ... ... ... байланысты көптеген ғалымдар патоген мен өсімдік
арасындағы қатынасты зерттеуге көңіл ... ... ... патогенге тәуелді Са2+-АТФ-аза ферментін
зерттеу маңызды болып отыр. Бұл ... ... ... ... ... ... жұмыстың мақсаты: Fusarium solani саңырауқұлағымен залалданған
картоп клеткаларында Са2+-АТФ-аза ферментінің қатысын зерттеу.
Мақсатқа байланысты туатын міндеттер:
1. ... ... ... ... ... өсіру.
2. Картоп клеткаларын сұйық ортада өсіру.
3. Fusarium solani саңырауқұлағын өсіріп, әртүрлі ... ... Fusarium solani ... ... ... және сұық ... ... клеткалардағы Са2+-
АТФ-аза ферментінің активтілігін ... ... Са2+ ... ... ... маңызы
Табиғатта өсімдіктер көптеген патогенді микроорганизмдердің арқасында
қауіптілікке ұшырайды, бірақ соның өзінде көпшілік түріне қарсы тұра алады.
Патогенді ... ... ... ... ... ... бере
әртүрлі индуцияланған төзімділік механизмдерін ... ... ... ... ... ... қалындау (каллоза мен
лигниннің бөлінуі) ... ... ... ... яғни ... ... реакциясы гидролитикалық және транспорттық
ферменттердің босалуы. Төзімділік ... ... ... ... ... Са2+ ... ... роль атқарады.
Cа2+ иондары өсімдік клеткаларында қалыпты жағдайында және ... ... әсер ... ... төмендеуі, қуаншылық,
патогенез) реттегіш ... ... ионы ... өсу және даму ... ... роль атқаратын
бұрыннан белгілі. Cа2+ ионы Allium сера in vitro өсірілген ... мен ... ... индукциясының екіншілік
мессенджерлік қызмет ... ... /2/. Cа2+ ... клеткаларды
элиситормен өңдегенде бастапқы кезеңінде клетка ... ... өсіп ... ... ... ... /3/. Өсімдік
клеткасындағы Cа2+ ионының концентрациясының қалыпты ... ... ... ... сақталуы гомеостаздың өзгермеуіне жағдай
туғызады. Кальций концентрациясының цитоплазмада ... Cа2+ ... ... ... ... ... ол артық иондардың клетканың
органеллаларына немесе клетка қабығына ауысуына тікелей қатысады. Осы
процесте ... ... ... ретикулуммен
байланысқан Cа2+-ді тасмалдайтын аденозинтрифосфатазалар (Са2+ ... ... роль ... ... гипотезасы бойынша Cа2+
ионының ... ... ... орын ... ... қатар,
өсімдікке әртүрлі факторлар әсер ... Cа2+ ... ... ... ... 2˚ С ... Cа2+ ионының жүгері тамырына
сіңірілуі 20-25%- ға ... Жылу ... ... ... әсері кальций бос иондалған ... ... ... яғни Cа2+ ... ... ... ... цитоплазманың қозғалысына және
субклеткалық құрылысына әсер ... ... ... ... кальциофильді, кальциофобты және нейтралды болып бөлінеді.
Бұршақ тұқымдасты, ... ... ... ... ... көп.Кальцийдің жетіспеушілігінен бірінші кезекте жас ... және ... ... ... ... ... ... мембрананың
саңылауларының жұмысы нашарлайды, мембрананың ... ... ... ... ... және ... ... тежеледі.
Нәтижесінде жемістерде некроз пайда болады. Жапырақтардың түсі өзгеріп,
бірінші ... ... ... қараяды. Бірақ кальцийдің жетіспеушілігі аз
байқалады. Себебі топырақ ... ... ... ... ролі өте ... Cа2+ ... ... ионмен қамтамасыз ету барысында реттегіштік маңызы өте күшті.
Кальцийдің ... ... Cа2+ - ... және Са2+- ... ... ... ... болады. Кальций клеткалық
сигнализация процесі кезінде ... ... ... атқарады. 1980 жылы
Г.Расмуссеном Cа2+ ионың екіншілік месенджерлік қызмет атқаратыны туралы
айтты./1/ Өсімдіктерде Cа – модульдейтін ... ... ... ... Са2+- ... ... ... сипатама беру
Клетка цитоплазмасындағы кальций иондарының концетрациясы 50-
100 нм ... М). Осы ... ... ... ... ... ... Са2+- АТФ-аза ферменті клеткада
орналасуына, ... және ... ... ... ... ... ... бұл ферментердің барлығы кальций
иондарын ... ... ... ... ... ... ... гидролизіндегі энерияны пайдалана ... ... ... ... ... ... ... клеткалық мембранадан кальций ... ... және ... кіріп, бұл иондар клетка ... ... әсер ... Са2+- ... ... және ... ішілік мембрана ... ... ... ... Са2+- АТФ ... ... белок болып табылады, яғни
бір полипептидтік тізбектен ... ... ... ... бір-бірінен айырмашылығы бар.Саркоплазмалық
ретикулум Са2+- АТФ-аза ферментінің ... ... 108 кД, ... Са2+- ... ... ... массасы 120 кД.
Кальций ионының транспорты тік ішек ... және ... ... зерттелген. Са2+- АТФ-азаның әсер ету ... ...... Са2
Е1-АТФ- Са2 ↔ Е1~Р- Са2 +АДФ
Е2~Р- Са2 ↔ Е1-Р- Са2
Мg
Е2~Р~Са2 ↔ Е1-фосфат- 2Са2+
E2↔ Е1
Е1 – микросомның сыртқы ... ... ­ ... ішкі ... орналасқан. Са2+ - ға
тәуелді АТФазаның активациясы үшін фосфолипидтер мен ... ... ... ... соңғы кезеңінде тікелей фосфатазды реация үшін
қажет.
1.3. Fusarium ... ... ... ... табиғатына кең таралған
және олардың көбі ... ... ... ... кейбір жағдайда
олар паразитті болуы мүмкін. Олар ... ауыл ... ... /1/.
Топырақ Fusarium туысына жататын түрлердің ... ... ... ... /1/. ... Fusarium ... болады, өсімдіктің әр түрлі қалдықтарында, ... ... ... ... өседі. Бұл түрге жататын саңырауқұлақтар
ішінде ризосфералық және ... көп ... ... ... саны өте аз, ... олар басқа саңырауқұлақтар
және бактериялардың бөлген антибиотиктері мен литикалық ... ... ... ... орта, яғни көмірсутектің көп мөлшері бар ... ... Бұл ... ... ... болып
келеді. Көптеген түрлері pH мағынасының ... ... да ... ... қатар олар өсу барысында ортаның pH – ын ... ... ... мүмкін. Фузариум ... ... ... ... ... 18-24-28С0. Ал
температураның және рН – ың ... ... ... спора түзу және кейбір арнайы метаболиттердің ... ... түзу Fusarium ... ... ... түзу әдістері жағынан әр түрлі ... ... ... ... оның бір ... екі ... ... аяқшалардың болуында, төменгі бөлігіндегі ... ... ... ... және ... мейелилерде,
конидияносецтерде түзілуі мүмкін. Fusarium ... ... ... кезде бөлек клеткаларға бөлініп, клетка қабығы
қалыңдаған ... ... Орта ... оптимальды болғанда
конидиялық спара түзу үлкен қарқынмен жүреді. Бұл ... ... ... ... алып ... элипс тәріздес бүгілген болып келеді. Көптеген
түрлеріне сәйкестік қасиет - ... ... ... жіңішкеруі.
/7/
Әр түрге жататын макроконидиялар бөліктерінің саны 3 тен ... 5 тен 7 ... ... ... ... мен ... ... боялмаған болып келеді.
Сонымен қатар көбею және ... ... қалу ... кейбір түрлерінде микроконидиялар түзіледі. Олардың бөліну
саны 0-1 ... ... де көп ... ... ... Оның
дифференциясы әр түрлерде, өсіру ... және ... ... болады./7/
Жоғарыда айтылғандай, бұл саңырауқұлақ ... ... ... ... ... ... ... сол клеткаға әсер
ететін токсиндер, сол ... ... ... ... ... ... ... құрылымын бұзып, яғни өсімдік клеткасының
мембранасын ... ішке ... ауру ... Осындай
механизммен зақымдайтын Fusarium solani болып келеді. Ол ... бұзу үшін ... ... синтездейді. Мысалы:
пектиназа, эндотемигалактуреназалар т.б
Fusarium solani конидиялары.
.
1 ... solani ... ... ... тудыратын
аурулар өсімдіктер және картоп түйінддерінде кең тарадған. ... ... ... құрамы, таралуы және ...... ... ... ... ... ... технологиясына байланысты болады. ... ... ... ... ... ... ... әлсіз желдер, ауаның және ... ... ... ... ... ... дамуына себеп
болады. Оған ... ... жәй ... ... ... олардың аралас инфекциялары жатады /1/.
Құрғақ ... ... - ең көп ... және ... картоп
ауруы. Ол сақтау ... ... ... ... ... мен жаралардан енеді. Әсіресе ол механикалық ... ... ... ... тез ... ... көп болады. Ауру
түйіндерде қоңырлау - ашық дақ, ... ішке ... ... және ... жабынды ұлпасының әжімделуімен ... ... ... ... ... ... ... және
қышқыл қоңыр түсті болады. ... ... бос ... ... ақ, сары және ... ... саңырауқұлақ мицелилерімен толады.
Ылғалды болғанда түйін сулы консистенцияға ие ... Ал ... ... әжімделген қабықпен жабылған мумияға ... ... ... ... ... ... ... 15-30 % болады.
Ауру түйіндер өсудің ... және ... ... ... ... ... ... саналады. Қорытындысында өнім алу 12 % және
одан да ... ... Ауру ... ... ... ... да, ... сақтауда құрғақ шірікті ... ... ... ... ... ... ғалымдар өсімдік және ... ... ... ... көп ... бөлуде.
Сонымен қатар көптеген ферменттік ... ... ... Са2+ - ... ... ... зерттейді.
2. ЗЕРТТЕУ ОБЪКТІЛЕРІ ЖӘНЕ ӘДІСТЕРІ
2.1. Зерттеу объектілері
Зерттеу ... ... ... және Санта картоп сорттарының
каллус клеталары мен картоп ... ... ... Fusarium ... ... ... ал ... сезімтал сорт болып табылады.
Каллус клеткалары агарланған және ... ... ... ... ... ... ... ретінде Fusarium solani ... ... ... ... ... ... алу және ... қатты агарланған қоректік ортасы(г/л)
Макро және микро тұздары (орта Мурасига Скуг дайын ұнтақ) 4,4 ... 30 г, ... ... 2 ... ... 10 мл,Гормондар
(2,4 Д) және кинетин ,Агар 7,2 г.
Каллус клеткаларын шығару үшін ... ... ... ... сортының өсімдіктерінің сабақ кесінділері ... ... ... Скуг қоректік ортасы құйылған ... ... ... бөлмеде температурасы 25-27˚С
өсірілді.
Каллус клеткаларын пробиркалық картоп өсімдіктерінің ... ... ... ... ... қоректік ортаға отырғызамыз. Тамаша сорты
2,4­Д (0,8 мл) гормоны бар агарланған қоретік ... ... Ал ... Д1 к-0,5 (кинетин 1мл) гормоны бар ... ... ... Бұл
клеткаларға жарық жақсы түсуіне байланысты қарқынды ... Әр апта ... ... ортаға егіп отыру қажет.
Сұйық ортада клеткаларды өсіру.
Каллусогенез процесі жүріп өсіп ... ... ... ... ... әр апта ... ... Сұйық қоректік орта Мурасиге-
Скуг бойынша дайындалды, агар қосылған жоқ.
Тәжірибе үшін бір күн ... жаңа ... ... ... 250 мл ... өсіріледі. Колбаға шамамен 50 мл орта
құйылып, ішіне каллусты салынып, оны ... ... ... ... ... ... заттық әйнекке салып, фуксин бояуымен бояп,
микроскоптың астында көріп оларды бағалайды. ... ... ... деп ... ... клеткалардың цитоплазмалық жүйесіне
бұзылған мембрана арқылы бояу өтіп, клеткаларды бояйды. Ал тірі клеткалар
болып боялмайды. ... ... ... микроорганизмдермен немесе
бактериялармен залалданбағанын тексереміз. Клеткалар ашық түсті немесе
хлорофил арқасында ... ... ... ... Fusarium solani ... ... solani саңырауқұлағы үшін Чапектің агарланған ... ... ... (1 ... 30 ... 2 ... 1 ... 0,76 ... 0,5 ... 0,5 ... ... 20 г
Картоп экстраты 100-150 ... ... ... алып ... қосып қайнауға деін жеткізіп,
содан кейін ... ... ... ... ... 25 мин ... ... жатқыза орналастырып, дайын болған орта
құйылады. Конидиялары өсіп шыққан пробиркалардан ... ... ... ... ... ... ... енгізіледі. Конидийлер
термостатта 20-25˚ С ... және ... ... ... ... апта ... өсіп шығады, мицелий алу үшін бір ай өсіріледі.
Ал оны ұзақ сақтау үшін ... ... ... ... ... ... өсуі ... Осындағы патогенді саңырауқұлақ
қызғылт ... ... Fusarium solani ... картоп түйіндерін және
сұйық ортада ... ... ... ... екі ... ... алынды, олардың бірі-Тамаша Fusarium solani
саңырауқұлағына төзімді, ал ... ... ... ... ... 15 мин ... перманганатының 5% ерітіндісінде ұстап,
шайылады және 10 мин стерилизация үшін натрий гипохлоридінде ұсталынады (
0,1% NaClO, 0,1% Tween). ... ... ... ... бокста
картоп түйіндерін кесіп, Петри табақшасына 4 данадан кесіп салынады. Петри
табақшасының түбінде фильртлі ... ... және оның ... 2 мл
стерильденген құбыр суы құйылды. Бұл ... ... ... ... ... 1,5 мл Fusarium solani ... фильтратымен
залалдандырылды. 4 Петри ... әр ... төрт ... Екі ... ... сортынан алынған үлгілері бақылау мен
тәжірибе үшін. ... ... ... ... сортының бақылау және тәжірибе
үлгілері. Бақылау үшін табақшаға 1,5 мл құбыр суы ... ... ... 24 ... ... ... түсін өзгертеді. Ал ... ... ... ... ... ... және ... екі колба ... ... ... тек 5 мл ... суы ... да, ал ... ... 5 мл Fusarium ... ... ... Са 2+- АТФ-азаның активтілігін анықтау.
Картоп түйіндерінен 2 г ... ... 10 мл ... ... (0,1 ... 50 mM Трис-HCl буферінде рH 7,4) гомогенезделіп, сол гомогенаттан
1 мл алынып ол инкубация ортасына қосылды. ... ... ... ... ... Нсl ... рH 7,4, 0,5 мМ АТФ және 2,25 мМ ... Ерітіндінің
көлем барлық жерде 3 вариантта да 4 мл ... 30 мин ... ... да, 0,5 мл 30 % - ды үшхлорсірке қышқылымен
реакция тоқтатылады. Осы процестен ... ... 10000 ... ... Одан 2 мл ... ... ... 2 мл 1М натрий
ацетаты, 4 мл 0,025М буферлі ацетат және 1 мл ... ... ... ... 10 ... соң 1 мл аммоний молибдаты қосылады. Содан 10 мин
ұсталынып, спектрофотометрде 720 нм толқын ұзындығында тығыздығы ... ... ... ... 0,5 мл фильтраттан бейорганикалық
фосфор анықталынады /5/.
Зерттеліп ... ... 2 мл ... оған 2 мл ... ... ... мл (рН=4) ... буфері, 1 мл аскорбин қышқылы қосылады. 10 ... ... ... 1 мл ... ... қосылады. 10 минуттан
кейін спектрофотометрде 660 нм толқын ұзындығында фосфордың ... ... ... ... микробиурет әдісімен /6/ анықталынды.
50 мкл гомогенатты пробиркаға ... ... 2 мл ... су ... ... 2 мл 6 % натрий гидрооксиді және 0,2 мл Бенедикт реактиві құйылып,
аралыстыралады. Бөлме температурасында 15 минут ... ... 330 ... ... өлшенеді.
Сұйық ортада каллус клеткаларын залалдау үшін стерильді ортада
алдын ала ... ... Fusarium solani ... орта ... 1׃10 ... ... Бұл ... кейінгі бір күндік клеткалар суспензиясы қолднды. Уақыт
өткенне ... ... ... ... Са2+- АТФ-аза ферментінің
активтілігі анықталды.
2.2.5. Са 2+- АТФ-азаға әсер ... ... ... ... ететін факторлар ретінде кальций концентрациясы , рН деңгейі
және ингибиторлар ... ... ... ... ... үшін ... ... 2,25 мМ СаСl2 Бұл Лукаткин,
А.С. Еремкин әдісі бойынша ... Рн және ... ... ... ... анықталды. Ингибитор ... ... ... РН ... ... үшін ... пайдаланылды: 5,0. 6,0. 7,0. 8,0. 9,0.
3.ЗЕРТТЕУ НӘТИЖЕЛЕРІ МЕН ОЛАРДЫ ТАЛҚЫЛАУ
3.1 Са2+- АТФ-азасына Са 2+ иондары концентрациясының және ... ... ... ... ... ... Са 2+- АТФ-аза
ферментінің активтілігі туралы мәліметтер жоқ. Сондықтан бұл ферментті
зерттеу алдында Са 2+ ... ... ... қажет болды. Сол
үшін 2,25мМ СаCl2 Са 2+ ионының концентрациясы бар, кальций ионы жоқ ... ... ... ... активтілігінің анықтаудың
(кальций ионыны Са 2+ ионынымен байланысқан ЭГТА вариантарында Са 2+- АТФ-
азаның ... ... ... ... ... ... ... яғни 2,25мМ СаCl2 пайданылған. Нәтижесінде, бұл
концентрация объект ретінде ... ... ... ... мен
түйіндеріне сәйкес келеді. ... ... ... ... 2,25мМ концентрациясында көрінді. ... ... ... активтілігі білінбеді, ал концентрациясы
жоғары болғанда активтілі төмендеді. 2 суретте ... ... ... ... ... ... ... картоп сорттарындағы Са 2+- АТФ-аза ... ... ... ... АТФ-аза ферментінің активтілігіне
әсері
Шартты белгілер:
-2,25мМ СаCl2
-СаCl2 жоқ
-ЭГТА бар СаCl2
2 сурет
Екі ... да ... ... ... активтілігі каллус
клеткаларынан түйіндерге қарағанда ... ... ... СаCl2 2,25мМ ... ... ... ферменттің
активтілігі жоғары екені анықталынды. Сондықтан келесі тәжірибелердің
барлығында ... ... ... активтілігін зерттеуде Са 2+-
ионындары осы ... ... Ал ... және сезімтал сорттарында
бақылау вартанттарда, яғни Fusarium solani ... сау ... ... ... ... ... ... Са 2+- АТФ-аза ... ... ... ... ... ... ... ферментінің активтілігі рН көрсеткіші
7,0-7,5 аралығында ... ... ... /1/. Бірақ
өсімдіктердің түрлеріне байланысты бұл параметрлер ... ... ... ... - түйіндері мен каллустарында
Fusarium solani саңырауқұлағына сезімтал ... ең ... ... 7,0 ... (3 сурет) Ал Тамаша түйіндерінде - Fusarium ... ... ... ... ферменттің активті ... 8,0(.4 ... solani ... ... ... ... ... ферментінің рН көрсеткіші
3 сурет
Fusarium solani саңырауқұлағына төзімді Тамаша сортындағы Са 2+-
АТФ-аза ферментінің рН ... ... ... түін 2
4 ... ... ... ... Fusarium solani саңырауқұлағымен
залалдағанда Са 2+- АТФ-азаның
активтілігіне әсері ... ... ... ... каллус клеткалары Fusarium solani
саңырауқұлағының конидияларымен ... ... ... ... ... алынған деректер 5 суретте келтірілген.
Картоптың каллус клеткаларын Fusarium solani саңырауқұлағының
конидияларымен залалдағанда Са 2+- АТФ-азаның ... ... ... 1 ... ... 1 сағ
3. бақылау, 1 тәулік
4. тәжірибе, 1 тәулік
5 сурет
Бұл суреттен 1 ... ... Fusarium solani ... ... ... ... ... ферменттің активтілігі
бірден өсетіндігі көрініп тұр, ал төзімді ... ... ... ... төмендеді.
1 тәуліктен кейін ... ... ... ферменттің
активтілігі бастапқы деңгейде қалды. Ал сезімтал ... ... ... ... ... және ... ... екі есе өсті.. Сонымен қатар залалдану әсерінен
тәжірибе варианттарын бақылаумен өзара салыстырғанда ферменнтің ... ... ... Fusarium solani саңырауқұлағы ... ... ... АТФ-аза ферментінің ... ... ... ... ... ... ... ферменттің қатысы көрсетілді. Са 2+- АТФ-аза ... рН ... және ... ... концентрациясы
анықталды. Сезімтал сортында қысқа мерзім ... ... ... қосылмағаны ферменттің активтілігі төмендегені ... ... ... ... ... ... ... қосылуымен
түсіндіріледі. Төзімді Тамаша сортының каллус клеткаларында Fusarium
solani ... ... ... ... ... Сезімтал Санта сортының каллус клеткаларында Fusarium
solani саңырауқұлағы ... ... ... ... ... ... Төзімді Тамаша сортында Са 2+- АТФ-азаның активтілігі ... ... ... ... ... Санта сортында Са 2+- АТФ-азаның активтілігі ... ... ... Са 2+- АТФ-аза ферментінің активтенуі клеткалық мемебрана арқылы
Са 2+-иондарының тасымалдану қарқынының артқанын дәлелдейді. Соның
арқасында Са 2+-иондары петтегіш ... ... ... ... ... А.С., ... Т.Н. Активность Са2+- АТФазы в листьях
растений кукурузы под ... ... и в ... ... биология,2002, №3, с.73-76.
2. Michael N. Zook, Jeffrey S. Rush and Joseph A.Kuc // A role for ... the ... of rishitin and lubimin ... in ... tissue. Plant Physiol. 1987, 84, ... ... Ю.В., Дмитриев А.П., Гродзинский Д.М. Роль Са2+ как вторичного
мессенджера в индукции синтеза фитоалексинов и ... в ... Allium cepa L.// ... ... 44,№ ... Briskin D.P. Ca2+- translocating ATPase of the plant plasma ... Plant ... 94, ... ... М.Н., Лесогорова М.Н., Шноль С.Э. ... ... ... по ... ... ... ... ультрафиолете// Биохимия,1965,30,567-572.
6. Кочетов Г.А. Практическое руководство по энзимологии. М.:1971.С.309-
310.
7. Дуброво П.Н., Крылова В.В., Ливанова Г.И., ... Г.Я, ... ... ... 1992, том ... ... А.Н. ... ионизирующего излучения в малой дозе на
кинетические ... ... ... ... ... высшего растения
(Cucurbita pepo) // Тез.докл.III ... ... ... ... С.С Медведев // Физиология растений Санкт- Петербург,2004,С.145-152.
10. Авдонин П.В., Ткачук В.А. Рецепторы и ... ... ... 1994, ... ... Ю.А., ... В.Б. Механизм работы Ca2+-АТФ-азы в мембранах
саркоплазматического ретикулума // Биомембраны׃ Структура, функций,
медицинские аспекты. Рига׃ ... 1981.С. ... ... Д.О. ... и ... ... М.׃ ... шк., 1990
13. Левицкий Д.О. Кальций и биологические мембраны. М. Высш. шк., 1991.
С. 124
14. Котык А.М., Яначек К.М. Мембранный ... Изд. ... ... ... В.А. Электричество в жизни растений и животных // Соровский
Образовательный Журнал. 1996 №9. С. 40-46.
16. ... В.А. ... в ... растений и животных // Соровский
Образовательный Журнал. 1996 №9. С. ... ... А.А. ... и функции биологических мемебран. Знание М:
1987
18. Парсонс Д.С. Биологические мемебраны. М, Атомиздат 1978
19. ... Г.Ж. ... ... ... ... ... ... Л.В., и др., Индуцирование у растении устойчивости к
инфекционным болезням ... ... ... 1981 Т. 92
21. Билай В.И. Фузари: Киев «Наукова думка» 1977
22. ... А.А. ... ... и ... ... рода ... ... гниль клубней картофеля в ... ... и ... Т-37 Вып. 4 ... ... О.А., Утарбаева А.Ш., Кунаева Р.М. Активность ферментов
фенольного ... при ... ... ... in
vitro тканей Solanum tuerosum // Изв. НАН РК. Сер. ... ... 2002. №6. с. ... ... П.Н., ... В.В., ... Г.И., ... Г.Я, Измайлов
С.Ф.
// Физиология растений, 1992, том 39,вып.3,с.503-512.
ТҮЙІН
Fusarium solani саңырауқұлағымен ... ... ... ... ... ... ... Төзімділігі
әртүрлі картоп сорттарында фермент активтілігі өзгеше анықталды.
РЕЗЮМЕ
Исследовано влияние заражения Fusarium solani на активность фермента
Са 2+- АТФ-азы в ... ... ... ... что у различающихся
по устойчивости сортов картофеля активность ... ... по ... ...

Пән: Биология
Жұмыс түрі: Реферат
Көлемі: 15 бет
Бұл жұмыстың бағасы: 300 теңге









Ұқсас жұмыстар
Тақырыб Бет саны
Супероксидсинтазалық сигналдық жүйе45 бет
Қоршаған ортаны қорғауды ұйымдастыру және табиғат ресурстарын ұтымды пайдалану6 бет
10 кВ кернеулерге арналған резеңке оқшаулы күштік кабельдер4 бет
Алматы облысы Еңбекшіқазақ ауданы жағдайында қызанақты аурулардан қорғау шараларының жүйесі23 бет
Американдық ақ көбелегі: зияндылығы, биологиясы, анықтау әдістемесі және күресу шаралары4 бет
Балқытып дәнекерлеуді жіктеу және оның негізгі түрлері7 бет
Жұпсыз жібек көбелегі: зияндылығы, биологиясы, морфологиясы, анықтау әдістемесі және күресу шаралары7 бет
"АТФ Банкі" АҚ-ның тартылған қаражаттарын талдау және бағалау61 бет
I сынып қазақ тілі оқулығын қатысымдық бағыт тұрғысынан тузу әдіс-тәсілдері38 бет
«АТФ банк» акционерлік қоғамының қызмет нәтижелерін талдау35 бет


+ тегін презентациялар
Пәндер
Көмек / Помощь
Арайлым
Біз міндетті түрде жауап береміз!
Мы обязательно ответим!
Жіберу / Отправить


Зарабатывайте вместе с нами

Рахмет!
Хабарлама жіберілді. / Сообщение отправлено.

Сіз үшін аптасына 5 күн жұмыс істейміз.
Жұмыс уақыты 09:00 - 18:00

Мы работаем для Вас 5 дней в неделю.
Время работы 09:00 - 18:00

Email: info@stud.kz

Phone: 777 614 50 20
Жабу / Закрыть

Көмек / Помощь