«ферменттермен жұмыс істеу әдістемесі. ферменттерді бөліп алу»

І. Кіріспе
ІІ.Негізгі бөлім
1. Ферменттерге жалпы сипаттама.
2. Жасушалық ферменттер ішінен қажетті биореагенттерді анықтау .
3. Ферменттер модификациясы және оларды алу әдістері.
4. Ферменттерді бөліп алу және тазарту.
ІІІ. Қорытынды
IV. Пайдаланған әдебиеттер
Қазіргі кезеңде, басқа да ғылым салаларымен бірге қарқынды дамып келе жатқан өзінің зерттеулерінің қолданбалы нәтижелері және жетістіктері жердегі бүкіл тіршілік иелері үшін аса маңызды биохимия ілімінің бір бөлімі ферменттер болып табылады.
Ферменттердің тірі ағзаларда өтетін химиялық реакциялардың жү¬ру барысын реттеп, белгілі бір тәртіппен өткізуі сол ағзаның тіршілік ету қабілетінің сақтауының, тұрақты болуының, ұрпақ жал¬ғас¬ты¬ру¬ының кепілі.
Қандай да бір реакциялардың жүру барысының өзгерісі міндетті түрде метаболиттік процесстердің өзгеруіне әкелетіні, сол себепті, ағзада зат алмасуының бұзылатыны күмән келтірмейді.
Ферменттерді медицинада пайдалану адам ағзасындағы әртүрлі патологиялық қалыптың (аурудың) пайда болу себептері мен дамуы механизмдерін (этиопатогенезді), (бұл — энзимодиагностика), емдеу жолдарының стратегиясы мен тактикасын құруды және емдеуді (бұл сол мақсатта ферменттерді дәрілік препарат ретінде пайдалану — энзимотерапия), емдеу барысының тиімділігін бақылау тәріздес аса ма¬ңызды проблемаларды шешуге жоғары дәлдікпен көмектеседі. Сонымен бірге, аурудың диагностикасы үшін маңызды, қазіргі қоғамда дені сау ұрпақ жалғастыру үшін алдын-ала болжауға мүмкіндік беретін саланың бірі – энзимопатология – тұқымқуалаушы және жүре пайда болатын аурулардың себептері мен даму механизмдерін ай-қын¬дап, адамның қоғамдық және индивидуалдық аспектілеріндегі проблемаларды шешіп бере алады.
Ферменттерді зерттеудің нәтижелері тірі биологиялық объекті¬лер¬дің құрылысын, қасиеттері мен зат алмасуы процестерін басқа салалар мен бірге медицинаның да молекулалар деңгейінде зерделей алуына мүмкіндік береді.
Энзимологияны оқып-үйрену және білу студенттің болашақ кә¬сіп¬қой дәрігер болып қалыптасуы үшін өте қажетті.
1. Аубакиров Х.Ә. Биотехнология: Оқулық.-Алматы: ЖШС РПБК «Дәуір», 2011.- 135-144 беттер.
2. Әлмағамбетов Қ.Х. Биотехнология негіздері.-Астана, 2007.-208 бет.
3. Уәлиханова Г.Ж. Өсімдік биотехнологиясы. 2-ші толықт. Бас.-Алматы: ЖШС « Дәуір», 2009- 164-179 беттер.
4. Жұбанова А.А., Абдиева Ж., Шөпшібаева Қ. К. Биотехнология негіздері.-Алматы: Қазақ университеті, 2006.-256 бет.
5. Әлмағамбетов Қ.Х. Биотехнология: оқу құралы.-Астана: «Республикалық микроорганизмдер коллекциясы», 2011.-316 бет.
        
        Қазақстан Республикасының Ғылым және Білім министрлігі
Семей қаласындағы Шәкәрім атындағы мемлекеттік университеті
Тақырыбы: .
Орындаған: Ашкенова З.Н. ... ... ... қ. 2015 ... ... бөлім
* Ферменттерге жалпы сипаттама.
* Жасушалық ферменттер ішінен қажетті биореагенттерді анықтау .
* ... ... және ... алу ... ... бөліп алу және тазарту.
ІІІ. Қорытынды
IV. Пайдаланған әдебиеттер
Кіріспе
Қазіргі кезеңде, басқа да ғылым салаларымен бірге қарқынды ... келе ... ... ... қолданбалы нәтижелері және жетістіктері жердегі бүкіл тіршілік иелері үшін аса маңызды биохимия ілімінің бір бөлімі ферменттер болып табылады.
Ферменттердің тірі ... ... ... ... жү - ру барысын реттеп, белгілі бір тәртіппен өткізуі сол ағзаның тіршілік ету қабілетінің сақтауының, ... ... ... жал - ғас - ты - ру - ының ... ... да бір ... жүру ... өзгерісі міндетті түрде метаболиттік процесстердің өзгеруіне әкелетіні, сол себепті, ағзада зат алмасуының бұзылатыны күмән келтірмейді.
Ферменттерді ... ... адам ... ... ... ... ... пайда болу себептері мен дамуы механизмдерін (этиопатогенезді), (бұл -- энзимодиагностика), емдеу жолдарының стратегиясы мен тактикасын ... және ... (бұл сол ... ... ... препарат ретінде пайдалану -- энзимотерапия), ... ... ... ... ... аса ма - ... ... шешуге жоғары дәлдікпен көмектеседі. Сонымен бірге, аурудың диагностикасы үшін маңызды, қазіргі қоғамда дені сау ұрпақ жалғастыру үшін ... ... ... ... ... бірі - ... - тұқымқуалаушы және жүре пайда болатын аурулардың себептері мен даму механизмдерін ай - қын - дап, адамның ... және ... ... проблемаларды шешіп бере алады.
Ферменттерді зерттеудің нәтижелері тірі биологиялық объекті - лер - дің ... ... мен зат ... ... ... ... мен ... медицинаның да молекулалар деңгейінде зерделей алуына мүмкіндік береді.
Энзимологияны оқып-үйрену және білу студенттің болашақ кә - сіп - қой ... ... ... үшін өте ... Ферменттерге жалпы сипаттама.
Фермент деп катализатор қызметін атқаратын ақуыздардың ерекше ... ... ... дегеніміз - ағзада жүретін химиялық реакциялардың бағытын өзгертетін немесе жүру ... ... ... ... ... ... ... ақуыздарды ыдыратып, немесе реакцияны басқа бағытқа ... ... ... ... Бұл ... адам үшін өте ... ... түзілетін қажетті реакциялардың бастамасы. Табиғатта ферменттің мыңдаған түрі бар.
Микроорганиздер ... өте ... ... ... заттары бар көптеген қосылыстарды синтездей алады. Жануарлар мен өсімдіктермен салыстырғанда, микроорганизмдер арқылы ферменттер алу өте ... ... ... ... ... тыныс алу жəне өнім түзілуге жауапты түрлі биохимиялық реакцияларға катализаторлық қызмет ... 2 ... ... ... ... Осы ... ішіндегі көптеген бөлігін бөліп алуға болады жəне олар жасушадан тыс та өз белсенділіктерін таныта біледі. Ферментті ... алу ... ... саңырауқұлақтармен қатар, бактериялар мен ашытқылар да ... ... ... ... ... тез басылып қалатындықтан, өндірісте құрғақ техникалық фермент дəрмектерін ... ... ... басқа глобулярлық ақуыздар сияқты рибосомада синтезделіп, клетка ішінде қызмет етіп (эндофермент) немесе ішкі оттаға секрецияланады (экзофермент). ... ... ... типтік, түріне сәйкес, генетикалық детерминацияланаған. Сонымен қатар оларды коститутивтік (тіршілікке ... ... ... эндогендік), клетка үнемі тұрақты концентрацияда болады және индуцибельдіферменттер, бұлардың концентрациясы мен активтілігі субстратпен байланысты. Клетка өз ... ... ... ... жүзі ... қажетті деп танылатын 20 фермент түрі (ғалымдардың айтуынша табиғатта ... ... бар) 65 мың ... көлемінде өндіріледі. Мысалы, өндірістік деңгейде көп өндірілетін ферменттер қатарына ... ... ... ... пектиназа, каталаза, стрептокиназа, целлюлаза жəне басқаларын жатқызуға болады.
Өндірісте көбінесе гидролазалар (синтетикалық жуғыш заттар өндірісіндегі детергенттер) және ... ... ... жеміс және көкөніс шырындарын шығаруөндірісінде) қолданылады. Сондай-ақ ферменттер тағамдық, целлюлоза-қағаз, медициналық және ... ... кең ... ... ... ... ... биореагенттерді анықтау.
Жасушаның таңқаларлық көп химиялық қосылыстарын сорттап, ішінен қажетті ферментті ... алу - өте ... ... Мұны шешу үшін ... ... ... ... болады:
* қызықтыратын қызметі бар жасушаны таңдап, кездейсоқ ферментті
бөліп алғаннан кейін, ... амин ... ... ... ... керек. Кейін, осы ферменттер арасындағы ұқсастықтарды анықтау үшін, анықталған фермент құрылысын, бізге белгілі ... ... ... ... ... Мұндай қажетті қызмет атқаратын ферменттің табылмауы да мүмкін.
- жасуша құрамынан қажетті затты синтездейтін мРНҚ бөліп алынып, олардың матрицасында трансляция үдерісі ... ... ... ферменттерді сынап көру қажет. Жасушаның белсенділігіне байланысты көрінетін ферменттерге басты назар аударылады. Кейін, ... ... ... ... арасындағы ұқсастықтарды анықтау үшін, қажетті фермент құрылысын белгілі қызмет ... ... ... ... ... емес ... популяциясы іріктеліп алынып, оларға
кездейсоқ жолмен ферменттер қосылады, нəтижесінде қажетті ... ... ... ... ... Сөйтіп, жасушаға қосылған фермент нəтижесінде қажетті белсенділік пайда болғандықтан, дəл осы ... ... ... екен деген пікір жасалынады.
Бұл бағыттағы ізденіс жұмыстарының қарқынды түрде жүргізіле бастауы, ақуыздардың құрылысы мен ондағы амин ... ... реті ... мол ... ... байланысты арта түскен болатын. Нəтижесінде атқаратын қызметтері ұқсас ... ... ... ... ... ... Жүздеген мың табиғи ферменттердің шектеулі ғана архитиптерге, немесе супержанұялық типке (суперсемейство) ... ... Бір ... ... жататын ақуыздар, ұқсас құрылым мен қызметтерге ие болады жəне олар алыс туыстарда да кездеседі. Жаңа табылған ... ... ... бұрыннан белгілі ферменттің құрылымымен салыстыра келе, оның түзілген классификациядағы орнын анықтауға болады. Алайда, ферменттің қандай ұялық ... ... ... ... оның амин ... ... ретін басқа ұқсас құрылымды ферменттермен салыстыру нəтижесі де, əрдайым бұл проблеманы шешуге қол жеткізе бермейді. ... ... ... ферменттің атқаратын қызметі оның үш сатылы құрылымымен анықталатынын жəне тек ... амин ... ғана ... ... ... бұл ... ... басқа қызмет атқара бастайтынын еске түсірсек жеткілікті. Бірақ та, соңғы жылдардағы ... ... ... ... ... ... скрининг нəтижелерінің тиімділігін арттыруға қол жеткіздірді. Соның нəтижесінде көптеген пайдалы жақтары мол ... ... деп ... ... ... ... болып отыр.
20-суретте жасушалық ферменттерді анықтауға қажетті үдерістердің түрі жинақталып берілген.
Табиғи ферменттер өте ... ... ... ... ... қызметі біздердің сұранысымызды əрдайым толықтай қанағаттандыра бермейді. Біздер, қажетті өнімді көп мөлшерде алуды, яғни оны ... ... ... қалаймыз. Жасушалар болса, зат алмасуы үдерісі барысында түзілетін өнімдерін (метаболизм) ... ... ... ... ... ғана ... бейімделген. Жасушалардың көптеген ферменттері қыздыруға шыдамсыз жəне өмір сүру мерзімі де қысқа болып келеді. Сонымен бірге, олар ... ... ... ... ... жеткілікті деңгейге жеткен уақытта, (отключение) қасиетіне ие. Кейбір жағдайларда, ... ... ... бар ... ... мүлдем болмағандықтан, оларды басқа ферменттерді өзгерістерге ұшырату жолымен алуымызға тура келеді.
Ферменттердің қалай ... ... ... ... ... ... мақсатымызда пайдалануымызға мүмкіндік беретін - рекомбинантты ДНҚ технологиясын меңгеруімізге жол ашты. Соның нəтижесінде, ... ... ... ... ... құрастыру мүмкіндігіне қол жеткізді. Мысалы, экстремалды жағдайда (температура, құрғақшылық, РН-ортасы) тіршілік ететін ... ... ... бұл ... ... өз ... сай ... əдістері табылды. Біздер үшін, əсіресе, табылған ферменттің ... ... ... бағытталуы, яғни оның əсері аумағының шектеулі болуы қызықтырады.
* Ферменттер модификациясы жəне оларды алу əдістері
Рекомбинантты ... ... ... ... ... ... ... пайдалану мүмкіндігін арттырды. Жақын аралықтағы жасуша үдерістерінің ... мен осы ... ... ... ... ... биореагенттерді өндірістік мақсатта қолданудың ауылы алыс еместігіне меңзейді.
Белгілі бір молекуланың химиялық құрамын өзгерту үшін ... ... ... ... Бұның мəні, арнайы жүргізілген ... ... ... ... бөлігінде жүретін өзгерістерге ... ... ... ... ... зерттеуші мутацияның жасушаның қызметіне əсерін бақылағаннан кейін, осы өзгерістің шығу ... ... ... бұл ... кері ... жүргізеді. Егерде зерттеушіні қызықтыратын қызмет көрініс бермесе, онда ол коды ... ... дəл осы ... жауап береді деген пікірге келеді. Ал егерде, белсенділігі жоқ ... ... ... ... өз ... ... онда осы ... біздерді қызықтыратын ақуыздың пайда болуына əкеледі деген қортынды жасауға болады.
Келесі ... ... ... ... қажетті жаңа ферменттерді алудың əдістері жинақталып берілген.
21-сурет. Жаңа биореагенттер мен биофабрикаларын жасау
Активті жасушалар деп қажетті (қызықтыратын) ... ... ... ... ... ... ... мақсатта пайдаланылатын көптеген ферменттерді синтездеу жұмыстарында қолданылған. Бірақ та, өте ... ... ... ақуыз құрылымындағы азғана өзгерістердің өзі, олардың үштік
құрылымындағы ... ... ... ... ... ... ақуыздың мүлде қызмет атқара алмауына алып келуі мүмкін. ... ... үшін бұл ... ... бас тарту мүмкін емес, өйткені ғалымдар ақуыз түзілімінің амин қышқылдық құрамын азғана өзгерту, кейбір жағдайларда қажетті реакцияларды өте нəзік жəне дəл ... ... алып ... ... Бұл ... ... осы ... іздену жұмыстарын əрі қарай қызығушылықпен жүргізулеріне ынталандырады.
Қолдан ... ... ... ... ... көп түрлілігін арттыратын жəне бір əдісті тапқан. Ол зертхана жағдайында ... ... ... гендерді рекомбинациялау əдісі. Бұл əдістің негізінде, əуелі, əр түрдің гендерін рекомбинациялау ... ... ... ... көп ... ... ... анықталған.
Бағытты мутагенез, не болмаса гендер рекомбинациясы нəтижесінде, қандай да бір жасушадағы ферменттердің көп ... ... ... ... ... мұндай жасушалар популяциясы зертханалық жағдайда көбейтіледі. Осындай жасушаларды əртүрлі қолайсыз жағдайларды қолдан тудыру ... ... ... ... ішінен тек қана құрамында мұндай жағдайларда қажет болатын ... ... ғана тірі ... Осы əдісті қолдана отырып, ғалымдар металдармен ластанған, РН реакцясы өзгертулеріне, температураға шыдамды жəне т.б. ... ... жəне ... ... мол өндіре алатын жасушаларды іріктеп алады. ... ... ... ... ... тұрақтылығы мен жоғары өнімділіктерінің қамтамасыз етілуі, оларды шығару ... ... ... ... ... ... ... көрсеткіштерінің артуына өз əсерін тигізеді.
* Ферменттерді бөліп алу және тазарту.
Ферменттер адамның, жануарлардың, ... ... және ... ... ... Ферментті бөліп алу үшін, ол көп кездесетін материалды (шикізатты) таңдап алу ... Егер ... ... материал жануар ұлпасы болса, онда ол ұлпаны басқа бөліктерден беліп ажыратады және қанын жуып тазартады. Тандап ... ... ... ... кетпеу үшін, оны төменгі температурада (2-8°С) ұнтақтайды. Осылайша ұнтақталған біртектес массаны центрифугаға салып өңдейді. Осы ... ... оның ... ... (центрифугатқа) етеді де, шегіндіні тастайды.
Ферменттер белоктік заттар болғандықтан, оларды алу үшін белокті бөліп шығаратын әдісті қолданады. Белокты шөктіріп тұнбаға ... ... ... ... ... ... ... органикалық еріткіштерді (этил спиртін немесе ацетонды) қосады. Бұл кезде ферменттермен қоса бүкіл белоктар дерлік тұнбаға түсіріледі. ... ... ... ептілікпен бөліп алу үшін ионалмасу хроматография әдісін қолданады. Әсіресе ... ... ... ... ... ... кең түрде қолданылады.
Полиакриламидті, крахмалды немесе агарлы гелде жүргізілетін электрофорез әдісімен де ферменттерді бөліп алуға болады.
Осыдан кейін бөліп алынған фермент препаратының ... ... ... ... ... ... оның ... активтілігімен бағаланады, бұл кезде ферменттің активтілігін 1 мг белокқа шағып есептейді. Әдетте ... ... ... осы істің келесі кезеңінде олардың меншікті активтілігі одан әрі артпайтындай деңгейге дейін немесе электрофорездеу, гель-сүзу, ионалмасу хроматография не ультрацентрифугалау ... тек бір ғана ... ... ... ... ... ... препараттарды өнеркәсіптік жолмен өндірудің түрлі жолдары бар.
Жасуша цитоплазмасында ... ... одан ... ... ... ... ерітінділерімен оңай экстракцияланады. Содан кейін бұл ферменттерді аммоний сульфатымен ... ... ... және ... ... ... ... құрылымдық элементтерімен байланысқан ферменттерді дезинтеграциадан, яғни жасуша ... ... ... ғана ... алуға болады. Жасушаларды уатып, қатырып және қайтадан ерітіп, ультрадыбыстың әсеріне ұшырату арқылы механикалық жолмен және арнайы ферменттік препараттарды пайдаланып ферментативтік ... ... ... бұзу үшін ... ... құрамында қандайда бір буфер, этилендиаминтетра сірке қышқылы және альбумин болатын сахарозаның децимолярлы ерітіндісіне (рн-7,3) жуады. ... сон шыны ... ... да, 13000 ... ... ... гомогенизациялайды. Жасуша қабықшаларын және шыны микрошарларды центрифугалау арқылы бөліп алады.
Егер фермент суда ерімейтін липопротеидті ... ... ... онда ферментті ерітінді көлемінің 3-6% мөлшеріндегі бутил ерітіндісінің көмегімен ерітіндіден липиттерді ... ... ... сулы ... ... ал липиттер бутил спиртінің қабатына ауысады.
Ферменттер ерітінділерін концентірлеуге ең ... ... ... ... арқылы қол жеткізіледі. Егер фермент термотұрақты болса, мысалы рибонуклеаза, онда белоктардан ерітіндіні қыздыру арқылы құтылады. Кейде ... ... ... немесе ферменттік ерітіндіге хлороформмен немесе хлорофильмен спирттің қоспасымен томен температурада әсер ету ... ... ... белоктардың бір бөлігін жойған соң одан кейінгі ... ... үшін ... ... ... ... сульфатымен фракционирлеуді пайдаланады. Бұл жағдайда белсенсіз белоктар коагуляцияланатын, ал белсенді фермент ерітіндіде қосатын тұздар концентрациясын концентрациясын ... ... ... ... ... ... ... және насадкасы сұйықтықты лиофильдендіруден кейін ферменттік препарат алады.
Белокатар коагуляциясы мен ферменттерді тазалау үшін ... ... ... ... этил ... ... ... диоксан қолданылады.
Ферменттік тазалаудың преспективті әдісі селективті немесе таңдамалы адсорбция болып табылады, мұнда ферменттік ерітіндіге аз мөлшерде ... ... ... ... ... және де басқа адсорбенттер қосылады. Осылайша белсенді ... ... ... белоктардың адсорбциясын жүзеге асырады. Бөлу центрифугалаумен бірге жүргізіледі. Адсорбенттен ферментті элюирлеу үшін фосфатты буфер ерітіндісін пайдаланады. Егер ферменттік ерітіндіде бейорганикалық ... көп ... ... ... ... ... сефадекс арқылы ерітіндіні фильтрлеуді жүргізеді.
Құрамында физико-химиялық қасиеттері бойынша ферментке ұқсас белоктар қоспасының біршама ... ... ... препаратты ион алмастырғыш хромотография әдісімен тазалайды. Ион алмастырғыш процесінде белоктар ... ... де, ... культуралды сұйықтықтан электростатикалық әсерлеудің көмегімен оның бетімен байланысады. Ионит бетінен белоктарды элюирлеу үшін ... ... ... ... рН ... ... ... немесе бейтарап тұздарды енгізуді (NaCl, KCl) қолданады.
Қорытынды
Ферменттер ... ... ... ыдыратып, немесе реакцияны басқа бағытқа аудара алатын катализаторлар кіреді. Бұл дегеніміз адам үшін өте ... ... ... қажетті реакциялардың бастамасы.
Ферменттер белоктік заттар болғандықтан, оларды алу үшін белокті бөліп шығаратын әдісті қолданады. Белокты шөктіріп тұнбаға ... ... ... ... аммоний сульфатын немесе органикалық еріткіштерді (этил спиртін немесе ацетонды) қосады. Бұл ... ... қоса ... белоктар дерлік тұнбаға түсіріледі. Бұдан кейін ферменттерді ептілікпен бөліп алу үшін ионалмасу хроматография әдісін қолданады. Әсіресе әртүрлі шайырлар, олардың ... ... ... кең ... ... ... ... бөліп алынған фермент препаратының біртекті тазалығын тексереді. Ферменттің тазалық дәрежесі оның ... ... ... бұл ... ... ... 1 мг ... шағып есептейді.
Организмде тіршілік процестерінің бірқалыпты жүрісі ферменттер әсеріне байланысты. Ферменттік реакциялардағы ... ... ... ... ... патологияға, дертті өзгеріске әкеліп соғады. Клеткалардағы немесе биологиялық сұйықтықтағы (мысалы, қан плазмасындағы) белгілі бір ... ... ... ... ... мүшелерде және ұлпаларда болып жатқан өзгеріс жөнінде тұжырым жасауға болады. Мұндай фермент активтілігіне қатысты зерттеулер адамның және жануарлардың ... ... оның ... бақылау үшін қажет.
Пайдаланған әдебиеттер
* Аубакиров Х.Ә. Биотехнология: Оқулық.-Алматы: ЖШС РПБК , 2011.- 135-144 беттер.
* Әлмағамбетов Қ.Х. ... ... ... ... ... Г.Ж. ... биотехнологиясы. 2-ші толықт. Бас.-Алматы: ЖШС >, 2009- 164-179 ... ... А.А., ... Ж., ... Қ. К. ... негіздері.-Алматы: Қазақ университеті, 2006.-256 бет.
* Әлмағамбетов Қ.Х. Биотехнология: оқу ... , ... бет.

Пән: Химия
Жұмыс түрі: Материал
Көлемі: 10 бет
Бұл жұмыстың бағасы: 300 теңге









Ұқсас жұмыстар
Тақырыб Бет саны
Ферменттермен жұмыс істеу әдістемесі. Ферменттерді бөліп алу14 бет
Уыт өсірудің морфологиялық және физико-биохимиялық процестері3 бет
Целлюлозалитикалық бактериялар50 бет
«Ферменттерді бөліп алу ферменттер әсерінің кинетикасы»5 бет
Ферменттiк препараттардың халық шаруашылығындағы мәні жайлы ақпарат8 бет
Ферменттiк препараттардың халық шаруашылығындағы мәні туралы мәлімет6 бет
Ферменттер биологиясы10 бет
Ферменттер биосинтезі жайлы мәлімет12 бет
Ферменттер әсерінің кинетикасы туралы мәлімет9 бет
Ферменттерді бөліп алу. ферменттер әсерінің кинетикасы14 бет


+ тегін презентациялар
Пәндер
Көмек / Помощь
Арайлым
Біз міндетті түрде жауап береміз!
Мы обязательно ответим!
Жіберу / Отправить


Зарабатывайте вместе с нами

Рахмет!
Хабарлама жіберілді. / Сообщение отправлено.

Сіз үшін аптасына 5 күн жұмыс істейміз.
Жұмыс уақыты 09:00 - 18:00

Мы работаем для Вас 5 дней в неделю.
Время работы 09:00 - 18:00

Email: info@stud.kz

Phone: 777 614 50 20
Жабу / Закрыть

Көмек / Помощь